[發明專利]用于診斷非小細胞肺癌的試劑盒

有效

• 申請號: 201210262372.2
• 申請日: 2012-07-27
• 公開（公告）號: CN102759620A
• 公開（公告）日: 2012-10-31
• 發明（設計）人: 白春學;王向東;楊達偉
• 申請（專利權）人: 復旦大學附屬中山醫院
• 主分類號: G01N33/574
• 分類號: G01N33/574
• 代理公司: 上海申匯專利代理有限公司 31001
• 代理人: 翁若瑩

技術領域

本發明涉及一種用于診斷非小細胞肺癌功能的試劑盒，屬于生物技術領域。

背景技術

肺癌是世界范圍內常見的癌癥且是導致癌癥患者死亡的主要原因之一。在我國肺癌發病率和死亡率高居各惡性腫瘤之首。根據世界衛生組織國際腫瘤研究所(The?International?Agency?for?Research?on?Cancer，IARC)統計，我國2008年肺癌發病率為35/10萬人，并且該機構估計至2025年，我國將每年新增肺癌100萬例。根據衛生部2010年衛生統計年鑒，截止2009年，全國肺癌死亡率為30.83/10萬人，高于第二高死亡率的肝癌逾4/10萬人。肺癌一般分為小細胞肺癌(small?cell?lung?cancer，SCLC)和非小細胞肺癌(non-small?cell?lung?cancer，NSCLC)兩種組織學類型。非小細胞肺癌約占所有肺癌病例數的85％，并進一步分為鱗狀細胞癌、腺癌和大細胞癌等。在過去的30年中，我國肺癌組織學類型發生改變，自1970年起，腺癌發病率快速增長，并逐步取代鱗癌，成為我國肺癌最常見類型。

盡管肺癌的5年生存率只有15％，但僅占16％的早期診斷為肺癌的患者其5年生存率可達到49％，可見早期診斷是提高生存率的重要因素。影像學和細胞學篩查用于肺癌的早期檢測，盡管具有一定敏感性，但對降低肺癌患者病死率的作用不大；而發展特異性細胞因子標志物作為影像技術的補充可能會降低肺癌患者的病死率。因此，探索具有診斷價值的新型簡易生物標記物不僅有益于肺癌患者的早期診斷和早期干預，還會帶來巨大的社會效益和經濟效益。

發明內容

本發明的目的是提供一種用于診斷非小細胞肺癌的試劑盒。

為了達到上述目的，本發明提供了一種用于診斷非小細胞肺癌的試劑盒，其特征在于，由細胞因子及其酶標抗體，pH值為9.6的碳酸鹽緩沖液，pH值為7.4的磷酸鹽緩沖液，血清蛋白稀釋液，終止液，四甲基聯苯胺底物溶液，正常人血清和陽性對照血清組成；

其中，所述的細胞因子為包括趨化因子配體21，酪氨酸蛋白激酶7，β細胞素，趨化因子配體28，皮膚T細胞虜獲趨化因子，粒細胞趨化蛋白2，人生長調節致癌基因，血液濾過CC趨化因子1，血液濾過CC趨化因子-2，白介素-9，白介素-18-結合蛋白a，白血病抑制因子，可與糖蛋白D競爭皰疹病毒進入T細胞位點的TNF樣誘導蛋白，單核細胞趨化因子-3，單核細胞趨化因子-4，巨噬細胞源性細胞因子，巨噬細胞刺激蛋白α，中性粒細胞趨化蛋白-2，骨橋蛋白，人重組的巨噬細胞炎性蛋白-4，血小板因子4，基質細胞衍生因子-1α，胸腺表達趨化因子在內的23種細胞因子。

優選地，所述pH值為9.6的碳酸鹽緩沖液為將1.59克碳酸鈉和2.93克碳酸氫鈉加至1L蒸餾水中而得。

優選地，所述pH值為7.4的磷酸鹽緩沖液為將0.2克磷酸二氫鉀，2.9克十二水合磷酸氫二鈉，8.0克氯化鈉，0.2克氯化鉀，0.5mL吐溫-20加至1L蒸餾水中而得。

優選地，所述的血清蛋白稀釋液為0.1克牛血清、羊血清或兔血清蛋白加至100mL?pH值為7.4的磷酸鹽緩沖液而得。

優選地，所述的終止液為2M硫酸溶液。

優選地，所述的四甲基聯苯胺底物溶液為0.5mL濃度為10mg/5mL的四甲基聯苯胺的無水乙醇溶液，10mL?pH值為5.0的底物緩沖液與32uL濃度為0.75vol％的過氧化氫水溶液混合而得；

其中，所述pH值為5.0的底物緩沖液為含0.2M磷酸氫二鈉和0.1M檸檬酸的蒸餾水溶液。

本發明的優點是：

1、本發明首次提出包括趨化因子、炎癥相關因子，以及免疫細胞因子等多種細胞因子類別在內的23種細胞因子或與其它臨床指標組合可成為非小細胞肺癌診斷的主要指標。

2、包括趨化因子、炎癥相關因子，以及免疫細胞因子等多種細胞因子類別在內的23種細胞因子作為預測指標較目前用于診斷非小細胞肺癌的胸部X射線指標及其它臨床指標更為客觀，而且測定此類蛋白表達水平簡單易行可靠。

具體實施方式

為使本發明更明顯易懂，茲以優選實施例，作詳細說明如下。

實施例

一種用于診斷非小細胞肺癌的試劑盒，其特征在于，由細胞因子及其酶標抗體，pH值為9.6的碳酸鹽緩沖液，pH值為7.4的磷酸鹽緩沖液，血清蛋白稀釋液，終止液，四甲基聯苯胺底物溶液，正常人血清和陽性對照血清組成；