[發明專利]一種β2-微球蛋白檢測試劑盒及其制備方法

無效

• 申請號: 201210261840.4
• 申請日: 2012-07-27
• 公開（公告）號: CN102749457A
• 公開（公告）日: 2012-10-24
• 發明（設計）人: 張雷
• 申請（專利權）人: 北京恩濟和生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明屬于生物醫藥技術領域，具體地說涉及一種檢測人β2-微球蛋白的檢測試劑盒。

背景技術

β2-微球蛋白是由100個氨基酸殘基組成的單鏈多肽低分子蛋白。電泳在β2區，故稱β2-微球蛋白。起源于人體間質，上皮細胞和造血系統的正常細胞以及惡性腫瘤細胞均能合成β2-微球蛋白。

β2—微球蛋白相對分子量小，可自由通過腎小球濾過，并僅由腎臟排泄且體內產生速率恒定，不受年齡、性別、機體肌肉組織多少的影響，因此血清β2—微球蛋白是腎損害的早期指標。

血清β2—微球蛋白的升高可反映腎小球濾過功能受損或濾過負荷是否增加的情況，而尿液中排出β2—微球蛋白增高，則提示腎小管損害或濾過負荷增加。血β2－微球蛋白升高而尿β2－微球蛋白正常，主要由于腎小球濾過功能下降，常見于急、慢性腎炎，腎功能衰竭等。

血清β2—微球蛋白增高，除因腎小球濾過率降低外，另一個原因是合成增加，見于惡性增生性病變及結締組織病變，在腫瘤方面，播散性病變較局限的病變中，更易產生血清β2—微球蛋白升高。某些惡性腫瘤（如原發性肝癌、肺癌、骨髓瘤等），自身免疫性疾病（如系統性紅斑狼瘡、溶血性貧血）時，血、尿β2－微球蛋白均升高。

因此，β2－微球蛋白測定在評價腎臟功能、協助診斷和鑒別診斷惡性腫瘤方面有顯著作用。

目前已知的測定β2—微球蛋白的方法有免疫擴散法、免疫電泳法、放射免疫法、酶聯免疫法。這些方法具有操作繁瑣、耗時長、過度浪費資源的缺點，不適于常規檢驗。

發明內容

本發明的目的是提供一種β2-微球蛋白的檢測試劑盒。該試劑盒可直接應用于全自動生化分析儀上，結果準確性強、試劑穩定性好、使用方便、便于大規模推廣。

本發明的另一目的是提供上述檢測試劑盒的生產制備及使用方法。

為實現上述目的，本發明提供的試劑盒組成為：

試劑R1：緩沖液、聚乙二醇、疊氮鈉、乙二胺四乙酸鈉、牛血清白蛋白；

試劑R2：緩沖液、結合有β2-微球蛋白單克隆抗體的乳膠粒子、吐溫-20、疊氮鈉、乙二胺四乙酸鈉、牛血清白蛋白。

本發明提供的上述試劑盒的制備方法及操做步驟如下：

（a）按下列比例配制好試劑：

試劑R1：

Tris緩沖液??????200-220mmol/L

聚乙二醇????????5-10?mmol/L

疊氮鈉??????????1-5?mmol/L

乙二胺四乙酸鈉??1-5mmol/L

牛血清白蛋白????1-5mmol/L；

試劑R2：

Tris緩沖液??????200-220mmol/L

結合有β2-微球蛋白單克隆抗體的乳膠粒子???3.5-5%（v/v）

吐溫-20?????????1-5mmol/L

疊氮鈉??????????0.5-3?mmol/L

乙二胺四乙酸鈉??1-5mmol/L

牛血清白蛋白????1-5mmol/L。

（b）將試劑與待測樣本按一定比例混合，使其完全反應；

（c）用半/全自動生化分析儀測定吸光度變化值；

（d）根據吸光度變化值計算出樣本中β2-微球蛋白的濃度。

具體實施方式

下述實施例是為了更詳細的解釋本發明，但不應理解為本發明局限于此。

實施例1：

本發明的試劑盒舉例是雙試劑，其中：

試劑R1：

Tris緩沖液??????200mmol/L

聚乙二醇????????8?mmol/L

疊氮鈉??????????5?mmol/L

乙二胺四乙酸鈉??5mmol/L

牛血清白蛋白????5mmol/L；

試劑R2：

Tris緩沖液??????200mmol/L

結合有β2-微球蛋白單克隆抗體的乳膠粒子???5%（v/v）

吐溫-20?????????5mmol/L

疊氮鈉??????????3?mmol/L

乙二胺四乙酸鈉??5mmol/L

牛血清白蛋白????5mmol/L。

實施例2：試劑盒使用方法

1.試劑準備，試劑為液體雙試劑，開瓶即用，其中：

試劑R1：

Tris緩沖液??????200mmol/L