[發(fā)明專利]一種幽門螺桿菌抗原HLA限制性免疫顯性表位肽及其制備方法和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210261563.7
• 申請日: 2012-07-26
• 公開（公告）號: CN102746381A
• 公開（公告）日: 2012-10-24
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 吳超;鄒全明;郭紅;楊武晨;陳立;李濱;趙卓;章金勇;李海波;毛旭虎;郭剛;童文德;魯東水
• 申請（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍第三軍醫(yī)大學(xué)
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;A61K39/02;A61P31/04;C07K1/14
• 代理公司: 重慶志合專利事務(wù)所 50210
• 代理人: 胡榮琿

1.一種幽門螺桿菌抗原HLA限制性免疫顯性表位肽，其氨基酸序列如SEQ?ID?NO:63、74、95和105所示。

2.如權(quán)利要求1所述的幽門螺桿菌抗原HLA限制性免疫顯性表位肽，其特征在于，所述表位肽具有HLA-DR亞型限制性。

3.如權(quán)利要求2所述的幽門螺桿菌抗原HLA限制性免疫顯性表位肽，其特征在于，所述SEQ?ID?NO:63和95所示的表位肽的HLA-DR亞型為HLA-DRB1*1404，SEQ?ID?NO:74和105所示的表位肽的HLA-DR亞型為HLA-DRB1*0803。

4.權(quán)利要求1-3任一項所述的幽門螺桿菌抗原HLA限制性免疫顯性表位肽在制備用于預(yù)防或治療幽門螺桿菌感染的制劑中的應(yīng)用。

5.如權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于，所述制劑為疫苗。

6.一種制備權(quán)利要求1所述的幽門螺桿菌抗原HLA限制性免疫顯性表位肽的方法，其特征在于，包含步驟：

1）從蛋白數(shù)據(jù)庫中獲取幽門螺桿菌來源的UreB蛋白質(zhì)序列；

2）從步驟1）獲取的UreB蛋白質(zhì)序列的第1號氨基酸開始，每次步移6個氨基酸，以步移重疊的18個氨基酸為一個多肽段，形成第一多肽庫，和/或在獲得的第一多肽中每次步移2個氨基酸，以步移重疊的至少13個氨基酸為一個多肽段，形成第二多肽庫；和/或通過分別在核心序列FFGVKPNMI和NMIIKGGFI的基礎(chǔ)上進行逐個氨基酸的增加而合成多肽，形成第三多肽庫；

3）利用抗原特異性CD4⁺T細胞從步驟2）所述的第一多肽庫和/或第二多肽庫和/或第三多肽庫中篩選免疫顯性表位肽；

4）利用HLA-Ⅱ類分子抗體阻斷實驗初步確定步驟3）篩選的免疫顯性表位肽的HLA限制性；

5）利用不同HLA-Ⅱ類分子亞型的B淋巴母細胞系對表位的遞呈實驗確定步驟3）篩選的免疫顯性表位肽的HLA限制性的具體亞型；

6）通過抗原遞呈實驗驗證所篩選的免疫顯性表位肽。

7.如權(quán)利要求6所述的方法，其特征在于，步驟2）所述的第一多肽庫的多肽的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:1-93所示；第二多肽庫的多肽的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:94-103所示；第三多肽庫的多肽的氨基酸序列如SEQ?ID?NO:104-115所示。