[發(fā)明專利]一種特異性結(jié)合稀土納米顆粒的多肽及其篩選方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210260132.9
• 申請日: 2012-07-25
• 公開（公告）號: CN103145798A
• 公開（公告）日: 2013-06-12
• 發(fā)明（設計）人: 溫龍平;張云嬌
• 申請（專利權）人: 中國科學技術大學
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K14/00;C07K7/08;C12N15/11;C12Q1/02;C12M3/00;G01N21/33;G01N21/64
• 代理公司: 上海華工專利事務所 31104
• 代理人: 應云平

1.一種篩選具有特異性結(jié)合稀土納米顆粒能力的多肽的方法，包括噬菌體展示技術，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

（a）將噬菌體展示多肽庫與稀土納米顆粒混合孵育；

（b）回收結(jié)合在稀土納米顆粒上的噬菌體；

（c）擴增回收的噬菌體用于稀土納米顆粒下一輪結(jié)合篩選；

（d）重復上述（a）到（c）的步驟至少一次；

（e）對回收的噬菌體挑取單克隆，測序后獲得所編碼的展示多肽。

2.一種特異性結(jié)合稀土納米顆粒的多肽，其特征在于，所述多肽含有SEQ?ID?NO：1所示的多肽序列或其類似物。

3.如權利要求2所述的多肽，其特征在于，所述類似物是通過將SEQ?ID?NO：1所示的多肽序列的氨基酸增加、缺失、變換順序或替換獲得。

4.如權利要求3所述的多肽，其特征在于，所述氨基酸增加的類似物為SEQ?ID?NO：2、SEQ?ID?NO：13、SEQ?ID?NO：14、SEQ?ID?NO：15、SEQ?ID?NO：16、SEQ?ID?NO：17、SEQ?ID?NO：18、SEQ?ID?NO：19、SEQ?ID?NO：20、SEQ?ID?NO：21、SEQ?ID?NO：22所示的多肽序列。

5.如權利要求3所述的多肽，其特征在于，所述氨基酸缺失的類似物為SEQ?ID?NO：3所示的多肽序列。

6.如權利要求3所述的多肽，其特征在于，所述氨基酸變換順序的類似物為SEQ?ID?NO：4所示的多肽序列。

7.如權利要求3所述的多肽，其特征在于，所述氨基酸替換的類似物為SEQ?ID?NO：5、SEQ?ID?NO：6、SEQ?ID?NO：7、SEQ?ID?NO：8、SEQ?ID?NO：9、SEQ?ID?NO：10、SEQ?ID?NO：11、SEQ?ID?NO：12所示的多肽序列。

8.一種核苷酸序列，其特征在于，所述核苷酸序列含有編碼如權利要求2所示的多肽序列或其類似物的核苷酸序列。

9.一種評估納米材料懸浮能力的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

（a）將納米材料懸浮液置于紫外檢測池中；

（b）用該納米材料的紫外特征吸收波長對樣品池中的納米材料進行實時觀測和掃描，得出時間動力學曲線；

（c）根據(jù)時間動力學曲線評估納米材料懸浮能力。

10.一種評估納米材料沉降速率和擴散能力以及與細胞相互作用的方法，其特征在于，所述方法包括如下步驟：

（a）將細胞培養(yǎng)在蓋玻片上，正面細胞朝上或細胞朝下分別置于細胞培養(yǎng)板中，蓋玻片架在小玻璃體上；

（b）將納米材料培養(yǎng)基倒入細胞培養(yǎng)板中，使得細胞充分浸入培養(yǎng)基中，細胞蓋玻片的位置正好位于液體的中間高度；

（c）用裝備有紅外激光器的熒光顯微鏡觀察細胞表面上結(jié)合的納米材料；

（d）根據(jù)熒光觀察結(jié)果評估納米材料沉降速率和擴散能力以及與細胞相互作用。

11.一種評估納米材料沉降速率和擴散能力以及與細胞相互作用的裝置，其特征在于，所述裝置包括細胞培養(yǎng)板、蓋玻片、小玻璃體，所述小玻璃體位于細胞培養(yǎng)板中，所述蓋玻片架在小玻璃體上。