[發明專利]腎炎清片中黃芪主要成分檢測方法

有效

• 申請號: 201210257780.9
• 申請日: 2012-07-24
• 公開（公告）號: CN103575842A
• 公開（公告）日: 2014-02-12
• 發明（設計）人: 周桂榮;鄂秀輝;張蘭蘭;周水平
• 申請（專利權）人: 天士力制藥集團股份有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88;G01N30/06
• 代理公司: 北京華科聯合專利事務所(普通合伙) 11130
• 代理人: 王為

技術領域

本發明涉及中藥制劑的檢測方法，特別是腎炎清片中黃芪主要成分檢測方法。

技術背景

腎炎清片，為一種治療腎炎的中藥制劑，是由黃芪、益母草、白茅根、萹蓄、瞿麥、小薊、石韋、地榆炭、土大黃和甘草制成。

腎炎清片方中益母草，性苦、辛而微寒，具有利水消腫、解毒活血之功，為方中君藥。白茅根性甘、寒，既能涼血止血，又能清熱利尿、導熱下行，適宜于膀胱濕熱蘊結而致的血尿。本方用其與益母草共為君藥，可使妄行之血歸于脈中而降血尿。萹蓄與瞿麥二者合用，善于清下焦濕熱而利水通淋；小薊善治下焦結熱所致尿澀赤痛、血淋尿血；石韋能上清肺熱、下走膀胱而利尿通淋；地榆長于治療下焦病證，在本方中攜諸藥清熱下焦火熱之邪，破解下焦淤血；土大黃可治療血熱所致的咳血、吐血、尿血、痔血、崩漏，以及外傷出血等證。黃芪功于補氣升陽、益衛固表、利水消腫、托瘡生肌。腎炎清片對于降低急性腎小球腎炎、慢性腎小球腎炎、隱匿性腎小球腎炎、紫癜性腎炎等原因所致血尿有明顯作用，可減少和減輕糖皮質激素治療過程中的不良反應。

為使該藥物生產標準化，達到療效確切，質量穩定的目的。本發明經過研究，建立了一種檢測本發明制劑中有效成分黃芪甲苷的方法，該方法采用HPLC法對其中的有效成分黃芪甲苷進行含量測定。該方法精密度、靈敏度、穩定性均好，確保產品質量的“安全、均一、穩定、有效、可控”。

發明內容

本發明提供一種中藥腎炎清片中黃芪主要成分的檢測方法，該檢測方法包括，對藥品中的藥物有效成分黃芪甲苷進行含量測定，該測定方法采用HPLC法。

本發明的檢測方法，包括以下步驟：

步驟1，對照品溶液的制備，

步驟2，供試品溶液的制備，

步驟3，將對照品溶液和供試品溶液注入色譜儀，得到色譜圖，

步驟4，根據色譜圖計算供試品中黃芪甲苷的含量，

其中，色譜柱采用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，流動相為乙腈-水溶液，檢測器采用蒸發光散射檢測器。

根據本發明，流動相乙腈-水的體積比為1:0.538-9。

根據本發明，其中步驟1所述對照品溶液的制備，方法如下：取黃芪甲苷對照品加甲醇制成溶液。優選地，方法如下：取黃芪甲苷對照品加甲醇制成每1ml含0.2-0.6mg的溶液。

根據本發明，其中步驟2中所述供試品溶液的制備，方法如下：取檢測樣品，加入氨水超聲處理，離心得上清液，過C18柱，甲醇洗脫，濾過，即得。優選地，方法如下：檢測樣品研細，取0.5-3g，加入2-8%氨水10-50ml，超聲處理20min以上，離心，取上清液5-25ml，上樣于C18上，10-20ml水洗，棄去，甲醇洗脫，微孔濾膜濾過，即得。

根據本發明實施方式之一，其中C18的重量不少于150mg。

根據本發明的另一實施方式，其中微孔濾膜的孔徑為0.22-0.45μm。

根據本發明，其中步驟3的方法如下：分別取對照品溶液10-20μl，供試品溶液10-20μl，注入液相色譜儀，得到色譜圖，用外標兩點法對數方程計算黃芪甲苷含量。

本發明目的在于檢測中藥腎炎清片中的藥物有效成分黃芪甲苷的含量，并通過該有效成分的含量了解腎炎清片在生產過程中是否達到生產要求，起到控制產品質量的作用。

根據本發明的檢測方法，所得供試品中每片黃芪甲苷的含量不得少于0.15mg。

本發明找到一種合適的質量控制方法來確定產品的質量，該質量控制方法較為完善，操作性強，重現性好，測定偏差小，穩定性好，精密度高。

附圖說明

圖1黃芪甲苷標準曲線。

具體實施方式

以下通過實施例，進一步說明本發明，但不作為本發明的限制。

實驗例1黃芪甲苷含量測定方法學研究

本發明的含量測定方法，是通過篩選獲得的，篩選過程如下：

1、儀器與試藥

儀器??高效液相色譜儀：Waters2695進樣系統，Waters2424ELSD檢測器；Waters?Empower色譜工作站；Mettler?AE240(十萬分之一)天平(梅特勒-托利多上海儀器有限公司)。

試藥??黃芪甲苷購自中國藥品生物檢定所（批號110781-200613）

乙腈為色譜純；成品樣品及陰性對照品(由本公司提供)。

2、色譜條件的選擇