[發(fā)明專利]聚酰胺胺型樹枝狀大分子在制備抗細(xì)菌生物被膜形成的藥物中的應(yīng)用

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210257399.2
• 申請日: 2012-07-25
• 公開（公告）號: CN102846654A
• 公開（公告）日: 2013-01-02
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 羅曉星;薛小燕;李治;周穎;孟靜茹;侯征
• 申請（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍第四軍醫(yī)大學(xué)
• 主分類號: A61K31/785
• 分類號: A61K31/785;A61P31/04
• 代理公司: 北京中知法苑知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11226
• 代理人: 常玉明;張?zhí)m海

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及高分子化合物的新用途，特別涉及聚酰胺胺型樹枝狀大分子在制備抗細(xì)菌生物被膜形成的藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

細(xì)菌生物被膜（或稱細(xì)菌生物膜Bacterial?biofilm，BF），是指細(xì)菌粘附于接觸表面，分泌多糖基質(zhì)、纖維蛋白、脂質(zhì)蛋白等，將其自身包繞其中而形成的大量細(xì)菌聚集膜樣物。多糖基質(zhì)通常是指多糖蛋白復(fù)合物，也包括由周邊沉淀的有機物和無機物等。

在特定的條件下，細(xì)菌可以形成生物被膜，包被有生物被膜的細(xì)菌稱為被膜菌。被膜菌無論其形態(tài)結(jié)構(gòu)、生理生化特性、致病性還是對環(huán)境因子的敏感性等都與浮游細(xì)菌有顯著的不同，尤其對抗生素和宿主免疫系統(tǒng)具有很強的抵抗力，從而導(dǎo)致嚴(yán)重的臨床問題，引起許多慢性和難治性感染疾病的反復(fù)發(fā)作。細(xì)菌生物被膜粘附在各種醫(yī)療器械及導(dǎo)管上極難清除，以至引發(fā)大量的醫(yī)源性感染。

抗生素是治療細(xì)菌感染最經(jīng)典的藥物，然而幾乎所有抗生素在治療細(xì)菌感染時都會不可避免地誘導(dǎo)細(xì)菌耐藥。近半個世紀(jì)以來，抗生素研發(fā)策略仍局限于傳統(tǒng)抗生素結(jié)構(gòu)改造和修飾，新抗生素用于臨床后細(xì)菌又會很快產(chǎn)生耐藥；而且，傳統(tǒng)的抗生素對細(xì)菌生物被膜的形成沒有抑制作用。因此，新型抗生素的研制并不能從根本上解決細(xì)菌耐藥問題。而且抗生素耐藥菌株的出現(xiàn)速度已經(jīng)遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過了新抗生素研發(fā)的速度，臨床有效的抗菌藥物日趨減少。為了有效對抗日益嚴(yán)重的耐藥細(xì)菌，必須突破傳統(tǒng)思路，尋找具有新型結(jié)構(gòu)且不誘導(dǎo)耐藥的抗菌藥物。

聚酰胺-胺（polyamidoamine,?PAMAM）是一種人工合成的納米級大分子化合物，由于具有單分散性、內(nèi)部空腔及表面豐富的可修飾基團(tuán)等獨特結(jié)構(gòu)優(yōu)勢，PAMAM在生物醫(yī)藥領(lǐng)域，如基因藥物載體、助溶劑、高效催化劑及納米材料等方面，有非常廣泛的應(yīng)用和研究。PAMAM-NH₂合成方法成熟，目前市售有G1.0-G10.0等數(shù)十種，隨著代數(shù)的增加，PAMAM納米尺寸、末端氨基數(shù)目、形狀和結(jié)構(gòu)特征也會隨之變化。

由于PAMAM-NH₂的種類繁多，耐藥菌的種類更是變化多樣，PAMAM-NH₂是否具有抑制細(xì)菌生物被膜形成的活性？以及特定的PAMAM-NH₂對哪些種類的耐藥菌具有抑制生物被膜形成的活性？這些技術(shù)問題在現(xiàn)有技術(shù)中沒有報道過。因此，針對PAMAM-NH₂的抗被膜菌活性研究對于新藥開發(fā)而言顯得尤為重要。

發(fā)明內(nèi)容

鑒于現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于通過大量試驗對聚酰胺胺型樹枝狀大分子（PAMAM-NH₂）進(jìn)行體外活性研究，提供一種聚酰胺胺型樹枝狀大分子在制備抗細(xì)菌生物被膜形成的藥物中的新用途。

本發(fā)明創(chuàng)造性地通過試驗將G2.0-G4.0?PAMAM-NH₂分別與ESBLs-EC和MRSA共培養(yǎng)7天，通過銀染法檢測PAMAM-NH₂對生物被膜形成的影響；結(jié)果得出20?μg/mL?G2.0-G4.0?PAMAM?均可減少黑色棉絮樣膜狀物，可抑制ESBLs-EC和MRSA生物被膜的形成。

因此，根據(jù)上述研究結(jié)果，發(fā)明人提供了聚酰胺胺型樹枝狀大分子在制備抗細(xì)菌生物被膜形成的藥物中的應(yīng)用，所述的聚酰胺胺型樹枝狀大分子為2.0-4.0代聚酰胺胺型樹枝狀大分子。

優(yōu)選地，所述細(xì)菌為耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌MRSA或/和產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶的大腸桿菌ESBLs-EC。

進(jìn)一步優(yōu)選地，所述的聚酰胺胺型樹枝狀大分子為2.0代聚酰胺胺型樹枝狀大分子。

本發(fā)明通過銀染法得出了PAMAM-NH₂可以抑制ESBLs-EC和MRSA生物被膜的形成，顯著優(yōu)于抗生素，為臨床上耐藥菌的徹底殺滅增加了候選藥物，豐富了現(xiàn)有技術(shù)。

附圖說明

圖1?細(xì)菌ESBLs-EC和MRSA培養(yǎng)7天后生物被膜的銀染色照片（放大倍數(shù)，×200）；其中：（A）空白對照組；（B）ESBLs-EC對照組；（C）MRSA對照組；（D-F）20?μg/mL?G2.0,?G3.0或G4.0?PAMAM-NH₂?處理的ESBLs-EC實驗組；（G-I）20?μg/mL?G2.0,?G3.0或G4.0?PAMAM-NH₂?處理的MRSA實驗組。

具體實施方式