[發(fā)明專利]VSTM1蛋白在制備抑制白血病細(xì)胞增殖產(chǎn)品中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210256581.6
• 申請日: 2012-07-23
• 公開（公告）號: CN102764428A
• 公開（公告）日: 2012-11-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 阮國瑞;韓文玲;馬大龍;黃曉軍;謝敏;冷馨;李婷
• 申請（專利權(quán)）人: 北京大學(xué)人民醫(yī)院
• 主分類號: A61K38/19
• 分類號: A61K38/19;A61K48/00;A61P35/02
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種VSTM1蛋白在制備抑制白血病細(xì)胞增殖產(chǎn)品中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

白血病是以造血細(xì)胞分化阻滯為特征的一類惡性疾病，目前根據(jù)累及的細(xì)胞類別不同分為淋巴細(xì)胞白血病、髓系白血病、紅白血病及巨核細(xì)胞白血病等。其中以急性髓系白血病（AML）因髓系細(xì)胞分化阻滯階段不同而呈現(xiàn)很大的異質(zhì)性。傳統(tǒng)的對AML的FAB分型已經(jīng)不足以反映AML的特征，臨床應(yīng)用有限。因此，目前廣泛運(yùn)用的WHO的分型將AML的免疫標(biāo)志物表達(dá)（免疫分型）、細(xì)胞遺傳學(xué)改變及分子生物學(xué)（融合基因、突變）等納入分類因素，更詳細(xì)的反映了AML的真實(shí)特征及其與預(yù)后的關(guān)系，對臨床治療的指導(dǎo)意義更大。

VSTM1（V-set?and?transmembrane?domain?containing?1）是由北京大學(xué)人類疾病基因研究中心新發(fā)現(xiàn)的一種潛在的細(xì)胞因子編碼基因。人類VSTM1基因定位于染色體19q13.42，存在五種剪切體，其中VSTM1-v1和VSTM1-v2是兩種主要形式。VSTM1-v1為Ⅰ型膜蛋白，在NK、T、B、單核和粒細(xì)胞中廣泛表達(dá)，在大多數(shù)腫瘤來源的細(xì)胞系中表達(dá)缺失；VSTM1-v2為經(jīng)典分泌的糖蛋白，能促進(jìn)外周血CD4+T細(xì)胞分泌IL-17A。Gene?Atlas數(shù)據(jù)庫提示VSTM1在正常骨髓CD33+髓系細(xì)胞中選擇性高表達(dá)，而在其它組織、細(xì)胞中的表達(dá)豐度非常低。提示VSTM1不僅參與正常髓系細(xì)胞的發(fā)生、發(fā)展，而且可能在血液腫瘤的病理機(jī)制中發(fā)揮重要作用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供了如下1）-5）中任一一種物質(zhì)的新用途。

本發(fā)明提供了如下1）-5）中任一一種物質(zhì)的在制備抑制白血病細(xì)胞增殖和/或治療白血病產(chǎn)品中的應(yīng)用：

1）、VSTM1蛋白；2）VSTM1蛋白編碼基因；3）含有所述VSTM1蛋白編碼基因的重組載體；4）含有所述VSTM1蛋白編碼基因的表達(dá)盒；5）含有所述VSTM1蛋白編碼基因的轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系；

所述VSTM1蛋白的氨基酸序列為序列表中的序列1。

上述應(yīng)用中，所述VSTM1蛋白編碼基因的核苷酸序列為序列表中的序列2。

上述應(yīng)用中，所述含有所述VSTM1蛋白編碼基因的重組載體為將所述VSTM1蛋白編碼基因插入表達(dá)載體中得到的重組載體。

上述含有所述VSTM1蛋白編碼基因的重組載體具體為pcDB-VSTM1，為將序列2（VSTM1蛋白編碼基因）插入pcDNA3.1-Myc-his(-)B的Not?I和Kpn?I酶切位點(diǎn)間得到的載體。

上述應(yīng)用中，所述含有所述VSTM1蛋白編碼基因的轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系為將所述重組載體轉(zhuǎn)入目的細(xì)胞得到的轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系。

上述應(yīng)用中，所述白血病細(xì)胞和所述目的細(xì)胞均為慢性髓性白血病細(xì)胞或巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞系；所述慢性髓性白血病細(xì)胞系具體為K562細(xì)胞；所述巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞具體為MEG-01細(xì)胞。

本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種制備抑制白血病細(xì)胞增殖和/或治療白血病產(chǎn)品。

本發(fā)明提供的產(chǎn)品，為上述的應(yīng)用中的所述1）-5）中任一一種物質(zhì)。

上述產(chǎn)品中，所述白血病細(xì)胞為慢性髓性白血病細(xì)胞或巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞系；所述慢性髓性白血病細(xì)胞系具體為K562細(xì)胞；所述巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞具體為MEG-01細(xì)胞。

本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)VSTM1蛋白可以抑制白血病細(xì)胞的生長，將VSTM1蛋白編碼基因轉(zhuǎn)染白血病細(xì)胞K562細(xì)胞或MEG-01細(xì)胞，得到的轉(zhuǎn)基因細(xì)胞的生長均慢于不轉(zhuǎn)染該蛋白的編碼基因。說明過表達(dá)VSTM1可以抑制白血病細(xì)胞生長，可用于白血病治療，尤其是耐化療藥白血病的治療提供了新的途徑。

附圖說明

圖1為轉(zhuǎn)染細(xì)胞VSTM1蛋白表達(dá)水平檢測

圖2為轉(zhuǎn)染VSTM1的K562及MEG-01細(xì)胞生長受抑

具體實(shí)施方式

下述實(shí)施例中所使用的實(shí)驗(yàn)方法如無特殊說明，均為常規(guī)方法。

下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到。

下述實(shí)施例中所用的材料、試劑等，如無特殊說明，均可從商業(yè)途徑得到，部分具體如下列出：

1、小牛血清、RPMI1640：購自GIBCO公司。

2、人慢性髓性白血病細(xì)胞系K562和巨核細(xì)胞白血病細(xì)胞系MEG-01（K562細(xì)胞購自中國科學(xué)院細(xì)胞庫，產(chǎn)品目錄號為TCHu191；MEG-01細(xì)胞購自中國科學(xué)院細(xì)胞庫，產(chǎn)品目錄號為TCHu197）。