[發(fā)明專利]甜瓜抗蔓枯病聚合基因的鑒定

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210254561.5
• 申請日: 2012-07-23
• 公開（公告）號: CN102845300A
• 公開（公告）日: 2013-01-02
• 發(fā)明（設計）人: 陳勁楓;徐兵劃;錢春桃;婁群峰;王紅英
• 申請（專利權）人: 南京農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: A01H1/04
• 分類號: A01H1/04;A01H1/02;C12Q1/68
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.甜瓜抗蔓枯病聚合基因材料創(chuàng)制方法：

通過抗蔓枯病材料PI?420145作為母本與父本抗蔓枯病材料PI482398(Gsb-4)進行雜交，自交，室內(nèi)PCR鑒定，田間抗性篩選和農(nóng)藝性狀選擇，連續(xù)自交三代得到F₄，在F₄中篩選出PI?420145和PI482398抗蔓枯病基因聚合的純合株系。

2.PI?420145、PI482398抗蔓枯病基因分子標記定位：

已篩選出3個AFLP分子標記EcoRI-TG/MseI-CTC200，EcoRI-AT/MseI-CTG90，EcoRI-TC/MseI-CAG60與PI420145的抗蔓枯病基因連鎖；篩選到一個SSR標記與PI482398的抗蔓枯病基因連鎖，該標記為CMAT170a，用該SSR標記能擴增出長度約為120bp的DNA片段。

3.甜瓜PI?420145×PI482398?F4抗蔓枯病基因聚合，其特征在于：

PI420145、PI482398蔓枯病抗基因均為單顯性。PI420145×PI482398的自交后代F₄聚合了PI420145和PI482398抗蔓枯病基因，三個AFLP標記EcoRI-TG/MseI-CTC200，EcoRI-AT/MseI-CTG90，EcoRI-TC/MseI-CAG60，在F₄和PI420145上分別擴增出相同大小的特異片段。SSR標記CMAT170a在F₄和PI482398上均擴增出長度大小約為120bp的特異片段。回收AFLP和SSR特異條帶，克隆測序，F(xiàn)₄上擴增出的特異片段與在PI?420145、PI482398上擴增出的特異片段大小、序列均相同。