[發明專利]大花型蘭花的培育與快速繁殖方法

無效

• 申請號: 201210253074.7
• 申請日: 2012-07-22
• 公開（公告）號: CN102726288A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發明（設計）人: 李枝林;楊根華;王有國;唐敏;張小平;張愛玲;李葉芳
• 申請（專利權）人: 云南農業大學
• 主分類號: A01H1/02
• 分類號: A01H1/02;A01H4/00
• 代理公司: 昆明正原專利商標代理有限公司 53100
• 代理人: 金耀生

1.大花型蘭花的培育與快速繁殖方法，其特征在于按以下步驟進行：

（1）材料：將采得的碧玉蘭、獨占春、文山紅柱蘭及大花蕙蘭等蘭株在資源圃內進行雜交育種和果實培育，待培育至蘭花果實到九成熟，果皮略顯黃色時摘取；

（2）培養方法?

①?選取自然花期接近一致的大花型蘭花，待父母本花序1/2花蕾開放時陸續進行授粉育種操作；?

②?外植體處理：90%成熟度果實經75%酒精消毒40秒后，轉入0.1%氯化汞表面消毒8～12分鐘，用無菌水沖洗3～4次，在無菌室取出種子，用紗布包好種子后，以少量無菌水潤洗5次，然后用0.1mol/L?KOH溶液浸泡8～12分鐘，再用無菌水沖洗3次，在飽和漂白粉上清液中消毒10～20分鐘，再用無菌水沖洗5次后接種到固體培養基中；

③種子無菌萌發培養：篩選出改良MS（即1/2MS）為較適宜的基本培養基，加生長調節劑的配方為：改良MS+6-BA0.5～3.0mg.L^-1+NAA1.0～1.5mg.L^-1?，用暗箱培養，溫度24±2℃，光照1800～2500勒克斯（lx），每天光照12小時，培養基?pH5.8；?瓊脂7g/L，3個月后發芽；種子萌發后先長出芽，隨后長出幼根，轉接到改良MS+6-BA0.3mg.L^-1+NAA0.5mg.L^-1培養基中培養,4～6個月后逐漸成為具有根系并可煉苗和移栽的試管苗；

（3）增殖、分化誘導與生根培養

①?原球莖增殖培養：種子萌發后，多形成原球莖，可進行增殖培養，培養基及配方是：改良MS?+?6-BA1.0-3.0?mg.L^-1?+?NAA?0.3-0.8?mg.L^-1，培養30～45天；

②?原球莖分化培養：原球莖進行分化培養后能形成試管苗，其培養基及配方為：改良MS?+?6-BA2.0-3.5?mg.L^-1?+?NAA0.3-0.8?mg.L^-1?+?香蕉泥80g/L，培養35～55天；

③?試管苗生根培養：生根培養配方為：改良MS?+?6-BA0.3-?0.8mg.L^-1?+?NAA0.5-2.5?mg.L^-1，通過26～36天誘導出的根長達1cm左右時可出瓶在溫室煉苗，1-2個月后在大棚利用設施栽培；

增殖、分化誘導與生根培養條件：增殖、分化誘導與生根培養過程中，均采用光照培養，溫度24±2℃，光照1800～2500勒克斯（lx），每天光照12小時，培養基?pH5.8。