[發(fā)明專利]用于檢測PCV2的抗體的ELISA檢測試劑盒

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201210251556.9
• 申請日: 2012-07-19
• 公開（公告）號: CN103575883A
• 公開（公告）日: 2014-02-12
• 發(fā)明（設計）人: 張許科;孫進忠;白朝勇
• 申請（專利權(quán)）人: 普萊柯生物工程股份有限公司
• 主分類號: G01N33/569
• 分類號: G01N33/569
• 代理公司: 北京聿宏知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11372
• 代理人: 吳大建;歐穎

1.一種ELISA檢測PCV2的抗體的方法，其特征在于，利用鏈霉親和素-生物素結(jié)合ELISA的ABC-ELISA方法檢測。

2.一種用于檢測PCV2的抗體的ELISA檢測試劑盒，包括包被PCV2抗原的檢測板、樣品稀釋液、洗滌液、PCV2陰陽性對照血清、生物素化抗豬IgG、鏈霉親和素交聯(lián)辣根過氧化物酶結(jié)合物、顯色液和終止液。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測試劑盒，其特征在于，其中還包括一份試劑盒的使用說明書。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述檢測板為密封包裝的、帶有棕色覆蓋板以覆蓋反應板的檢測板。

5.根據(jù)權(quán)利要求2~4中任意一項所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述檢測板中的PCV2抗原為稀釋1000倍的抗原，所述PCV2陰陽性對照血清為稀釋100倍的血清，所述生物素化抗豬IgG為稀釋1000倍的IgG，所述鏈霉親和素交聯(lián)辣根過氧化物酶結(jié)合物為稀釋2000倍的結(jié)合物。

6.根據(jù)權(quán)利要求2~4中任意一項所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括檢測板5塊，樣品稀釋液一瓶250ml，10倍濃縮洗滌液一瓶250ml，PCV2陰陽性對照血清各一瓶15ml，生物素化羊抗豬IgG為50ml，鏈霉親和素交聯(lián)辣根過氧化物酶結(jié)合物為50ml，顯色液一瓶100ml，終止液一瓶100ml。

7.根據(jù)權(quán)利要求2~4中任意一項所述的檢測試劑盒，其特征在于，所述樣品稀釋液為0.01mol/L、pH值為9.6的磷酸鹽緩沖液，洗滌液為PBST洗滌液，顯色液為ABTS液，終止液為1%的NaF溶液。

8.根據(jù)權(quán)利要求2~7中任意一項所述的檢測試劑盒的使用方法，其特征在于，取出檢測板后，加待測樣品血清和陰陽性對照血清，其中待測樣品血清由樣品稀釋液稀釋，均在25~40℃反應0.2~2h后用洗滌液洗滌1~10次，每次0.2~10min；加生物素化抗豬IgG，25~40℃反應0.2~2h，洗滌；加鏈霉親和素交聯(lián)辣根過氧化物酶結(jié)合物，25~40℃反應0.2~2h，洗滌；加顯色液顯色1~30min，以終止液終止反應；吸光度法測定P/N值。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的使用方法，其特征在于，取出檢測板后，加待測樣品血清和陰陽性對照血清，其中待測樣品血清由樣品稀釋液稀釋100倍，均在37℃反應30min后用洗滌液洗滌3次，每次1min；加生物素化抗豬IgG，37℃反應30min，同上洗滌；加鏈霉親和素交聯(lián)辣根過氧化物酶結(jié)合物，37℃反應30min，同上洗滌；加顯色液顯色5min，以終止液終止反應；于405nm處測定其吸光度，根據(jù)P/N值與2.1的大小來判斷陰、陽性結(jié)果。