[發明專利]一種用固定化磷脂酶C脫膠的方法

無效

• 申請號: 201210248337.5
• 申請日: 2012-07-18
• 公開（公告）號: CN102807917A
• 公開（公告）日: 2012-12-05
• 發明（設計）人: 于殿宇;江連洲;張立國;胡立志;劉晶;張春艷;宋云花;王玥;宋鵬;李萬振;劉鑫;鄒小雨
• 申請（專利權）人: 東北農業大學
• 主分類號: C11B3/00
• 分類號: C11B3/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種用固定化磷脂酶C對大豆毛油脫膠的方法，其特征在于用固定化磷脂酶C對大豆毛油脫膠的方法通過以下步驟實現：一、磷脂酶C的固定化：首先稱取一定量的海藻酸鈉于40℃水浴保溫溶解；同時稱取一定量的殼聚糖于5%的醋酸溶液中，40℃水浴保溫溶解；再向溶解的殼聚糖醋酸溶液中加入一定量的CaCl₂溶液，混勻；稱取一定量的磷脂酶C，加入到10?mL海藻酸鈉溶液中，攪拌均勻，靜置一段時間，用滅菌后的注射器吸取混合液，以約5滴/s的速度注入殼聚糖醋酸溶液、CaCl₂混合溶液中，以180?r/min轉速攪拌，將其置于4℃環境固定化10?h；二、固定化酶脫膠：取水化大豆毛油300?g，預熱至75℃，加入45%檸檬酸0.?6?mL混合攪拌維持30?min；冷卻至溫度為30~40℃左右，加入4mol/L?NaOH溶液和一定量的蒸餾水混合均勻，然后取一定量的固定化磷脂酶加入大豆毛油中，60?r/min機械攪拌，在溫度50℃下水浴反應一段時間；得到脫膠后的大豆毛油磷含量為3.8mg/kg，磷脂酶C脫膠后的油脂得率增長1.2倍；并確定了固定化磷脂酶C連續用于對大豆毛油的脫膠，使用6個批次后，測定固定化酶相對活力，結果酶活力仍保持在80％左右。

2.根據權利要求1所述的用固定化磷脂酶C對大豆毛油脫膠的方法，其特征在于步驟四中將油相中起始pH值為?5.5～8.0的條件下進行固定化磷脂酶C對大豆毛油脫膠。

3.根據權利要求1所述的用固定化磷脂酶C對大豆毛油脫膠的方法，其特征在于步驟二中油相中起始pH值為?5.5～8.0，反應時間30～90min的條件下，進行固定化磷脂酶C對大豆毛油脫膠。

4.根據權利要求1所述的用固定化磷脂酶C對大豆毛油脫膠的方法，其特征在于步驟二中油相中起始pH值為?5.5～8.0，反應時間30～90min，反應溫度為35～65℃的條件下，進行固定化磷脂酶C對大豆毛油脫膠。

5.根據權利要求1所述的用固定化磷脂酶C對大豆毛油脫膠的方法，其特征在于步驟二中油相中起始pH值為?5.5～8.0，反應時間30～90min，反應溫度為35～65℃，固定化酶添加量0.01%～0.09%的條件下，進行固定化磷脂酶C對大豆毛油脫膠。

6.根據權利要求1所述的用固定化磷脂酶C對大豆毛油脫膠的方法，其特征在于步驟二中固定化酶脫膠條件進行進一步確定，結果為油相中起始pH值為?6.0～8.0，反應時間40～80min，反應溫度為40～60℃，固定化酶添加量0.02%～0.06%，用優化結果進行固定化磷脂酶C對大豆毛油脫膠。

7.根據權利要求1所述的用固定化磷脂酶C對大豆毛油脫膠的方法，其特征在于步驟二中將固定化酶脫膠后的油脂得率與常規酶法脫膠后油脂得率進行比較，得到固定化磷脂酶C脫膠后的油脂得率增長1.2倍。

8.根據權利要求1所述的用固定化磷脂酶C對大豆毛油脫膠的方法，其特征在于步驟二中將固定化磷脂酶C連續用于對大豆毛油的脫膠，使用6個批次后，測定固定化酶相對活力，結果酶活力仍保持在80％左右。