[發(fā)明專利]海參糖肽、制備方法及在制備化妝品中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210248315.9
• 申請日: 2012-07-18
• 公開（公告）號: CN102743300A
• 公開（公告）日: 2012-10-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 李偉;佟長青;曲敏;成芳;金橋
• 申請（專利權(quán)）人: 大連湘藍(lán)生物科技有限公司
• 主分類號: A61K8/64
• 分類號: A61K8/64;A61Q17/04
• 代理公司: 大連非凡專利事務(wù)所 21220
• 代理人: 閃紅霞

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種海參酶解物，尤其是一種制備工藝簡單、成本低、具有顯著的促進(jìn)成纖維細(xì)胞生長及對成纖維細(xì)胞紫外輻射損傷具有保護(hù)作用的海參糖肽、制備方法及在制備化妝品中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

目前，防曬化妝品的種類繁多，其防曬原理各不相同。如中國發(fā)明專利號為ZL02817885.8，名稱為“二氧化硅被覆混晶氧化物顆粒、其制備方法以及用其制備的化妝品材料”的發(fā)明專利就公開了一種具有防曬（預(yù)防紫外線造成皮膚損傷）功能的化妝品，是在化妝品基本原料中添加具有遮擋紫外線能力的二氧化硅被覆混晶氧化物顆粒而制成，即通過物理方法預(yù)防紫外線損傷。還有一種防曬化妝品是在化妝品基料中添加纖維細(xì)胞生長因子，通過促表皮細(xì)胞修復(fù)增殖預(yù)防紫外線損傷，但因現(xiàn)有纖維細(xì)胞生長因子生產(chǎn)工藝復(fù)雜、價格昂貴，為此限制了它的廣泛應(yīng)用。

目前，以海參為原料所制備的活性物質(zhì)均粘多糖、肽以及皂苷等小分子活性物質(zhì)。迄今為止，還沒有關(guān)于以海參為原料，酶解制備海參糖肽和其在化妝品中應(yīng)用的相關(guān)報道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明是為了解決現(xiàn)有技術(shù)所存在的上述技術(shù)問題，提供一種制備工藝簡單、成本低、具有顯著的促進(jìn)成纖維細(xì)胞生長及對成纖維細(xì)胞紫外輻射損傷具有保護(hù)作用的海參糖肽、制備方法及在制備化妝品中的應(yīng)用。

本發(fā)明的技術(shù)解決方案是：一種海參糖肽，其特征在于分子量小于3000Da，糖鏈通過GalNAc連接到絲氨酸或蘇氨酸上，具有?-Galβ1-3?GalNAc?α-O-Ser/Thr結(jié)構(gòu)。

所含氨基酸的摩爾百分含量為：天冬氨酸與天冬酰胺11.41?%，蘇氨酸4.93?%，絲氨酸5.23%，谷氨酸與谷氨酰胺14.68%，脯氨酸6.28?%，甘氨酸12.33%，丙氨酸13.05%，纈氨酸3.27%，異亮氨酸2.61%，亮氨酸3.9%，酪氨酸1.61%，苯丙氨酸2.18%，組氨酸1.22%，賴氨酸3.8%，精氨酸5.78%，甲硫氨酸1.75%，半胱氨酸1.48%；含糖量為總質(zhì)量的10~20%，相對濕度不大于10%，溶解度為1克/30毫升水。

一種上述海參糖肽的制備方法，其特征在于按如下步驟進(jìn)行：

a.?將海參體壁在0~10℃時進(jìn)行勻漿處理；

b.?向所得勻漿中加入1~3倍體積pH?7~8的0.01~0.1M磷酸緩沖液及與勻漿質(zhì)量比為0.1~1%的復(fù)合酶，酶解12~48?h；所述復(fù)合酶是堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶按活力單位比為3：3：4的混合物；?

c.?離心取上清，采用截留分子量為3000?Da以下的超濾膜分離器分離，取透過超濾膜的液體；

d.?通過Sephadex?LH-20分子篩層析柱，收集OD_280nm吸收峰；

e.?將所收集的液體通過大孔吸附樹脂及活性炭后冷凍干燥，制得海參糖肽。

一種上述的海參糖肽在制備化妝品中的應(yīng)用。

在制備防曬化妝品中的應(yīng)用。

在所述化妝品基料中摻入總質(zhì)量0.1~1?%的海參糖肽。

本發(fā)明是以海參為原料，經(jīng)過酶解等工藝制備而成，原料來源廣泛且安全可靠，制備工藝簡單、成本低、便于應(yīng)用。所制備的海參糖肽具有顯著的促進(jìn)成纖維細(xì)胞生長及對成纖維細(xì)胞紫外輻射損傷具有保護(hù)作用，因此可以在制備化妝品中應(yīng)用，可有效預(yù)防紫外線損傷，避免因紫外線照射等引起的皮膚老化。

附圖說明

圖1是本發(fā)明實(shí)施例1、2、3的紫外線光譜圖。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1：

制備方法按如下步驟進(jìn)行：

a.?將海參體壁在10℃時進(jìn)行勻漿處理；

b.?向所得勻漿中加入3倍體積pH?7~8的0.01~0.1M磷酸緩沖液及與勻漿質(zhì)量比為0.1%的復(fù)合酶，酶解48?h；所述復(fù)合酶是堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶按活力單位比為3：3：4的混合物；?

c.?離心取上清，采用截留分子量為3000?Da以下的超濾膜分離器分離，取透過超濾膜的液體；

d.?通過Sephadex?LH-20分子篩層析柱（2.5×60~100cm），收集OD_280nm吸收峰；

e.?將所收集的液體通過大孔吸附樹脂（HPD系列）除鹽及活性炭后冷凍干燥，制得海參糖肽。

所用堿性蛋白酶是由地衣芽孢桿菌發(fā)酵而得（CAS編號:?9014-01-1A0271），堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶等原料均為市售產(chǎn)品。

實(shí)施例2：

制備方法按如下步驟進(jìn)行：