[發明專利]1-甲基-β-咔啉-3-甲酰RGD肽、其合成、納米結構、抗血栓作用和應用

在審

• 申請號: 201210242876.8
• 申請日: 2012-07-15
• 公開（公告）號: CN103539837A
• 公開（公告）日: 2014-01-29
• 發明（設計）人: 彭師奇;趙明;彭莉
• 申請（專利權）人: 彭莉
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/107;A61K38/08;A61P7/02
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技術領域

本發明涉及通式I代表的1-甲基-β-咔啉-3-甲酰RGD肽(式中AA為Ser,?Val或Phe),?涉及它們的制備方法,?涉及它們的納米結構,?涉及它們對凝血酶誘導的血小板聚集的高度選擇性,?涉及它們的強抗血栓活性以及作為抗血栓劑的應用。本發明屬于生物醫藥領域。?

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背景技術

在全球范圍內,?血栓性疾病的發病率和死亡率都居首位。通常,?血管損傷處所發生的止血作用稱為生理性凝血,?血管壁未受損傷發生的止血過程稱為血栓形成。血栓形成與凝血系統有關。根據反應起始點的凝血因子和復合物形成的途徑,?凝血系統可分為內源性和外源性兩種凝血系統。

內源性凝血系統的凝血酶原復合物的形成完全依賴于血漿中的凝血因子。具體凝血過程是,?血漿中的凝血因子XII與受損傷的血管壁內的膠原或基膜接觸,被激活成XIIa,?然后催化因子XI成為Xia。XIa繼而催化因子IX成為IXa。因子IXa,?因子VIII,?Ca²⁺和血小板磷脂等共同催化因子X成Xa。?Xa與因子V,?Ca²⁺和血小板磷脂形成“凝血酶原激活物”。

外源性凝血系統是指組織受外傷時,釋放出因子III,發動的凝血過程。因子III是一種脂蛋白,它與血漿因子VIII和Ca²⁺形成復合物,?該復合物可催化因子X成Xa。Xa與因子V在血小板磷脂和Ca²⁺參與下形成“凝血酶原激活物”。

凝血酶原沒有活性,?在Ca²⁺與凝血酶原激活物的作用下轉變為凝血酶。凝血酶除了能催化纖維蛋白形成外,?還能夠促進血小板磷脂的釋放以及增強因子VIII與因子V的活性,?加速血凝過程。

纖維蛋白原是一種二聚體蛋白質,在血漿中呈溶解狀態。凝血酶將其水解為單體,然后各單體之間以氫鍵作用,聚合在一起成為多聚體。此多聚體不穩定,?在Ca²⁺的參與下,?因子a催化多聚體中的單體,?使之相互反應形成共價鍵。這樣的纖維蛋白多聚體才是穩定的,并呈不溶解狀態。它們相互連接,?以蛋白質細絲縱橫交錯織成網狀,?將各種血細胞,?尤其是GP?IIb/IIIa血小板表面糖蛋白受體活化的血小板,?網羅其中形成血塊。GP?IIb/IIIa血小板表面糖蛋白受體活化時與纖維蛋白原a鏈及纖維蛋白原g鏈的RGDS，RGDV和RGDF序列結合的關鍵位點外化,?加速血凝過程。

這些知識說明,?抑制凝血酶是防止血栓的最根本的手段。在長期的研究中,?發明人逐漸認識到結構式II代表的1-甲基-β-咔啉-3-羧酸對凝血酶有一定的選擇性抑制作用。在長期的研究中,?發明人逐漸認識到在II的3位羧基偶聯RGD肽形成通式I代表的1-甲基-β-咔啉-3-甲酰RGD肽(式中AA為Ser,?Val或Phe)?對凝血酶有高度的選擇性抑制作用。這種核心創新和關鍵技術的進步必然使本發明的化合物的抗血栓有效劑量大幅度下降。于是,?發明人提出了本發明。

發明內容

本發明的第一個內容是提供通式I代表的三種新型1-甲基-β-咔啉-3-甲酰RGD肽,?特征在于其肽鏈中的AA為Ser,?Val或Phe。

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本發明的第二個內容是提供制備三種新型1-甲基-β-咔啉-3-甲酰RGD肽,?特征在于其肽鏈中的AA為Ser,?Val或Phe,?的方法,?該方法由以下步驟構成:

(1)?在二環己基碳二亞胺(DCC)和N-羥基苯并三唑(HOBt)存在下采用液相法制備Boc-Arg(NO₂)-Gly-Asp(OBzl)-Ser(Bzl)-OBzl,?Boc-Arg(NO₂)-Gly-Asp?(OBzl)-Val-OBzl?和Boc-Arg(NO₂)-Gly-Asp(OBzl)-Phe-OBzl;