[發明專利]一種復合生物神經導管的制備方法

無效

• 申請號: 201210240513.0
• 申請日: 2012-07-12
• 公開（公告）號: CN102784413A
• 公開（公告）日: 2012-11-21
• 發明（設計）人: 禹華旭;趙娟
• 申請（專利權）人: 禹華旭;趙娟
• 主分類號: A61L27/40
• 分類號: A61L27/40;A61L27/20;A61L27/02;A61L27/54
• 代理公司: 長沙新裕知識產權代理有限公司 43210
• 代理人: 馮彥

技術領域

本發明涉及生物醫用材料領域，具體指一種復合生物神經導管的制備方法。?

背景技術

對于周圍神經缺損，自體神經移植仍是目前修復的“金標準”。但其存在再生速度慢、自體神經取材來源有限、供體與受體神經直徑不匹配等缺點，因此，制備理想的神經導管促進神經再生成為神經修復的關鍵。?

生物體內普遍存在的生物電活動在維持正常生理功能方面必不可少，如神經系統的信號傳導、肌肉收縮以及傷口愈合等。周圍神經并非單純的組織學結構，它除了輸送神經營養物質，還傳遞電生理信號。神經修復后雖然有大量再生神經纖維，但功能恢復欠佳，這與運動終板等靶器官因失去電刺激而萎縮，進而失去再生功能有關。因此，神經損傷修復過程中，材料的導電性是決定神經修復效果的重要因素之一。具有導電性的生物材料可調節神經細胞的粘附，增殖和分化。Brett等（Brett?RM,Mahrokh?D,Jonas?B,et?al.Development?of?electically?conductive?oligo(polyethylene?glycol)fumarate-poly?pyrrole?hydrogels?for?nerve?regeneration.Biomacromolecules.2010,11(11):2845-2853.）研究發現，電刺激培養在聚吡咯酸（一種導電性生物材料）上的PC-12細胞與未經過電刺激培養的對照組相比，其神經伸長程度大大增加，較對照組增加達90%。?

目前，現有的神經導管雖然能促使損傷在一定程度的神經自行修復，但由于神經導管缺乏導電性，其再生纖維的形態及功能修復的效果都不甚理想。?

發明內容

本發明的目的是提供是提供一種多孔型殼聚糖-碳納米管神經的制備方法，該方法制備神經導管具有良好的導電性和機械性能，對神經損傷的修復有很好的促進作?用，且制備方法簡單易行，成本低廉。?

本發明是這樣實現的，該復合生物神經導管的制備方法，包括下述步驟：?

a、芯層溶液的制備：將神經營養因子，如神經生長因子、層粘連蛋白用磷酸緩沖液（pH7.4）配成一定濃度的溶液；或將雪旺氏細胞、神經干細胞、脂肪干細胞用磷酸緩沖液(pH7.4)配成一定細胞密度的細胞懸液，即為芯層溶液；?

b、殼層溶液的制備：分別制備殼聚糖溶液和碳納米溶液，將兩種溶液按比例混合后，采用超聲（功率300-360w）處理，使碳納米管與殼聚糖充分混合，并均勻分布，得到殼聚糖/碳納米殼層溶液；?

c、多孔型殼聚糖-碳納米管膜的制備：采用同軸靜電紡絲技術，將殼層和芯層溶液紡織成多孔型殼聚糖-碳納米管膜，調節殼層和芯層給液速度，即得多孔型殼聚糖-碳納米管膜；?

d、將制備的多孔型殼聚糖-碳納米管膜用8-0顯微縫線縫合，制成復合生物神經導管。?

所述的殼層溶液中碳納米管的含量達3-5wt%。?

由于殼聚糖具有良好的可降解性和促細胞黏附性，碳納米管具有良好的導電性和機械性能，殼聚糖和碳納米管都是具有良好的生物相容性，分別制備殼聚糖溶液和碳納米溶液，將兩種溶液按比例混合后，采用超聲（功率300-360w）處理，使碳納米管與殼聚糖充分混合，并均勻分布，在碳納米管的一定濃度下，兩者制成的復合材料，既能提高材料的生物相容性也能提高材料的導電性和機械性能同時又具有生物降解性，當電刺激并匹配有導電性納米纖維時神經生長長度大大增加，表明電刺激與導電性納米生物材料有協同作用，將生物導電可降解神經導管與神經營養因子有機結合，可導電的支架材料和相關神經營養因子（細胞）的共同作用下，具有良好的導電性和機械性能，對神經損傷的修復有很好的促進作用，且制備方法簡單易行，成本低廉。在修復神經的結構的同時還修復其感覺和運動功能。?

表1超聲波功率、納米管濃度與皮層溶液電導率實驗數據?

從表1看出，當殼聚糖-碳納米管的混合液中，碳納米管的含量為3wt%、4wt%、5wt%時，用不同功率的超聲波處理溶液，其電導率有明顯差異，其中，在300-360w的功率范圍內，其電導率較高。?

表2電導率與形態、運動功能、感覺功能修復對照表?

從表2中可以看出，神經損傷修復時，材料的導電性為0時，損傷神經的形態、運動和感覺功能的修復水平都相對較低，但隨著材料導電性能的增加，其修復水平逐漸升高，當材料的導電性達到10^-3s/cm時，其修復水平顯著的高于無導電性的材?料。?

附圖說明：