[發(fā)明專利]腫柄菊倍半萜提取物及其制備方法和用途

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210239520.9
• 申請日: 2012-07-11
• 公開（公告）號: CN102764284A
• 公開（公告）日: 2012-11-07
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 孫連娜;陶霞;李霞;趙貴鈞;席忠新;陳萬生
• 申請（專利權(quán)）人: 中國人民解放軍第二軍醫(yī)大學(xué)
• 主分類號: A61K36/28
• 分類號: A61K36/28;A61P3/10;A23L1/29
• 代理公司: 上海德昭知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 31204
• 代理人: 丁振英

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，是腫柄菊的倍半萜提取物及其制備方法和在制備防治糖尿病藥物或食品中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

糖尿病是21世紀(jì)威脅人類健康的主要疾病之一，其與癌癥、心血管疾病并稱為世界性三大疾病，嚴(yán)重影響患者的生存和生活質(zhì)量。目前我國糖尿病患者約有3千多萬，由于生活水平提高、營養(yǎng)過剩、運(yùn)動(dòng)少等原因，糖尿病發(fā)病率仍在逐年增加，糖尿病患者的治療、預(yù)后給社會(huì)帶來沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。因此，治療糖尿病和控制其并發(fā)癥是十分重要的，而降糖藥物的研發(fā)對控制糖尿病患者的血糖、延緩或減少并發(fā)癥具有重要意義。

目前臨床常用的降糖藥多為化學(xué)合成的藥物，如：磺脲類和雙胍類等。磺脲類降糖藥可以促進(jìn)胰島素釋放使血糖下降，而雙胍類降糖藥的作用是抑制食欲，減少身體對葡萄糖的吸收，加強(qiáng)對胰島素的敏感性。但是這些藥物有時(shí)降糖過快易引發(fā)低血糖癥狀，且長期服用會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重不良反應(yīng)，使其應(yīng)用受到很大限制。研發(fā)高效、低毒、廉價(jià)的天然的抗糖尿病藥物降低血糖以減緩糖尿病并發(fā)癥是臨床亟待解決的問題，因而從植物中尋找高效低毒的抗糖尿病藥物成為國內(nèi)外抗糖尿病藥物研究的重點(diǎn)。

腫柄菊（Tithonia?diversifolia(Hemsley)A.Gray）為菊科腫柄菊屬植物，原產(chǎn)于墨西哥和中美洲地區(qū)，作為觀賞植物和綠肥等，被引種到世界各地。我國在上個(gè)世紀(jì)初作為觀賞植物引入，目前在云南、廣東、廣西和福建等地有大量逃逸種群分布。腫柄菊作為中美洲地區(qū)的傳統(tǒng)用藥，主要用來治療瘧疾、發(fā)熱、血腫和肌肉損傷。腫柄菊的化學(xué)成分報(bào)道始于19世紀(jì)70年代末，發(fā)現(xiàn)該種植物主要含有倍半萜、黃酮、色原烯、二萜、蒽醌、神經(jīng)酰胺等成分。有報(bào)道腫柄菊水提物和80%乙醇提取物具有抗糖尿病活性（The?American?journal?of?Chinese?medicine，2002，30(1)：81-86；Chem?Pharm?Bull，2005，28(11)：2152-2154），但至今還未見有關(guān)用腫柄菊制備倍半萜提取物以及倍半萜提取物具有抗糖尿病活性的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種腫柄菊倍半萜提取物及其制備方法和在制備防治糖尿病藥物或食品中的應(yīng)用。

本發(fā)明腫柄菊倍半萜提取物的制備方法如下：

1、制備腫柄菊粗提物：按常規(guī)將腫柄菊地上部分粉碎后，以約3倍體積的80%-95%乙醇水溶液常溫下浸泡24-48小時(shí)，再于常溫下用80%-95%乙醇水溶液滲漉提取，收集20-30倍體積的滲漉液，得腫柄菊提取液，將腫柄菊提取液濃縮至干，得腫柄菊粗提物；

2、制備腫柄菊倍半萜提取物：

將上述腫柄菊粗提物用90%-95%乙醇水溶液溶解，腫柄菊粗提物重量：乙醇水溶液體積=1：1，再加蒸餾水稀釋至乙醇濃度為30%-35%，即為腫柄菊上柱樣品液。將處理好的大孔樹脂先用35%乙醇水溶液平衡，再加入腫柄菊上柱樣品液，用35%乙醇水溶液淋洗除去雜質(zhì)，然后再以40%-65%乙醇水溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，減壓濃縮至干，即為腫柄菊倍半萜提取物。

經(jīng)成分分析，本發(fā)明腫柄菊倍半萜提取物主要成分為tagitinin?A、tagitinin?C和tagitinin?F-3-O-methyl?ether等多種倍半萜化合物，三個(gè)倍半萜化合物的結(jié)構(gòu)如下：

按常規(guī)用高效液相色譜法-蒸發(fā)光檢測器檢測腫柄菊倍半萜提取物中倍半萜含量，其中tagitinin?C的含量為35-45%，tagitinin?A的含量為10-20%，tagitinin?F-3-O-methyl?ether的含量為5-10%，三者含量占腫柄菊提取物的50%以上，故稱為腫柄菊倍半萜提取物。

本發(fā)明腫柄菊倍半萜提取物經(jīng)如下動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，說明其具有防治糖尿病的活性：

1.通過正常KM小鼠葡萄糖耐量實(shí)驗(yàn)，觀察腫柄菊倍半萜提取物對糖尿病的預(yù)防作用：

腫柄菊倍半萜提取物低、中、高三個(gè)劑量組（按體重劑量依次為35mg/kg、70mg/kg、140mg/kg）與模型對照組比較，中、高兩個(gè)劑量組均能夠使糖負(fù)荷后的小鼠血糖值顯著降低，且高劑量組給藥后六個(gè)小時(shí)的血糖值明顯低于陽性對照組，表明腫柄菊倍半萜提取物有顯著的降糖作用，說明其具有預(yù)防糖尿病的活性。

2.通過DBDB小鼠糖尿病模型，觀察腫柄菊倍半萜提取物對糖尿病治療作用：