[發明專利]基于抑癌基因NDRG2提高乳腺癌化療敏感性的應用

無效

• 申請號: 201210239146.2
• 申請日: 2012-07-11
• 公開（公告）號: CN102784399A
• 公開（公告）日: 2012-11-21
• 發明（設計）人: 張健;藥立波;張永平;張璟;陳蘇寧
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第四軍醫大學
• 主分類號: A61K48/00
• 分類號: A61K48/00;A61P35/00
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責任公司 61200
• 代理人: 陸萬壽

技術領域

本發明屬于腫瘤的治療技術領域，涉及提高化療敏感性的相關基因，特別涉及基于抑癌基因NDRG2提高乳腺癌化療敏感性的應用。

背景技術

乳腺癌是女性最常見的腫瘤之一，發病率是女性罹患腫瘤的首位，約占女性全身癌癥的1/4，嚴重威脅著女性的身體健康。乳腺癌的治療以手術治療結合化療、放療為主。目前，化學藥物仍是乳腺癌治療的常用方法，在乳腺癌的治療過程中發揮重要作用。但化療存在著敵我不分、副作用大、耐藥性較普遍等問題，嚴重制約著其臨床療效。

阿霉素（Adr）是一種抗腫瘤抗生素，可抑制RNA和DNA的合成，對各種生長周期的腫瘤細胞都有殺傷作用，是乳腺癌治療的一線藥物。其主要的毒性反應有白細胞和血小板減少、脫發、心臟毒性、惡心、食欲減退等。這些毒副作用嚴重影響著阿霉素的臨床應用效果。因此，發現新的化療敏感性相關基因可有效提高化療藥的臨床療效，并降低其毒副作用，成為提高化療敏感性的重要手段。

NDRG2基因是一種已報道的抑癌基因，研究發現NDRG2在多種腫瘤組織中低表達或無表達，并且這種低表達與患者的不良預后密切關系。

發明內容

本發明解決的問題在于提供基于抑癌基因NDRG2提高乳腺癌化療敏感性的應用，抑癌基因NDRG2可提高乳腺癌化療療效，為有效提高乳腺癌的臨床療效提供新的藥物靶標選擇。

本發明是通過以下技術方案來實現：

抑癌基因NDRG2在制備抗乳腺癌的藥物的應用。

所述的藥物為與化療藥物聯合使用的藥物。

抑癌基因NDRG2依賴于p53蛋白在乳腺癌細胞的表達。

所述的藥物是促進表達p53蛋白的乳腺癌細胞損傷的藥物。

所述的藥物是促進抑制表達p53蛋白的乳腺癌細胞的增殖的藥物。

所述的藥物是促進表達p53蛋白的乳腺癌細胞的凋亡的藥物。

所述的p53蛋白為野生型的表達或者外源性的表達。

抑癌基因NDRG2在制備提高乳腺癌化療敏感性的藥物的應用。

抑癌基因NDRG2通過表達載體或病毒載體轉染到乳腺癌細胞中。

所述的乳腺癌細胞還進行表達p53蛋白的表達載體的轉染。

與現有技術相比，本發明具有以下有益的技術效果：

本發明提供的基于抑癌基因NDRG2提高乳腺癌化療敏感性的應用，將抑癌基因NDRG2通過表達載體或病毒載體轉染到乳腺癌細胞中，結果表明抑癌基因NDRG2在能夠提高乳腺癌化療敏感性，從而可應用相關藥物的制備：

NDRG2促進了Adr誘導p53野生型乳腺癌細胞的DNA損傷能力，但在p53突變的MDA-MB-231細胞中，NDRG2的過表達卻不能促進Adr導致的DNA損傷；當將p53轉導進入p53突變的MDA-MB-231細胞中后，NDRG2依然能夠發揮相應的作用；

NDRG2提高了Adr對p53野生型乳腺癌細胞的形態學損傷，在NDRG2高表達的MCF-7細胞系中不但微絨毛消失，而且可見凋亡小體，出現較明顯的空泡狀溶酶體，表現為較明顯的細胞凋亡中晚期的細胞特點；

NDRG2提高了Adr對p53野生型乳腺癌細胞的增殖抑制能力，同時檢測了NDRG2表達對順鉑的敏感性，發現NDRG2也能提高藥物順鉑的化療敏感性；這表明NDRG2提高乳腺癌細胞化療敏感性是非具體化療藥物依賴性的。

在p53野生型的乳腺癌細胞系MCF-7中，NDRG2促進了Adr誘導的p53野生型乳腺癌細胞的凋亡。

附圖說明

圖1為MCF-7細胞系包裝成功熒光顯微鏡觀察感染效率結果圖；

圖2為MDA-MB-231細胞系包裝成功熒光顯微鏡觀察感染效率結果圖；

圖3-1～3-2為NDRG2穩定轉染MCF-7細胞系的表達鑒定結果圖；其中3-1為Real-time?PCR檢測RNA水平的變化，3-2為Western?blot檢測蛋白水平的變化；

圖4-1～4-2為MDA-MB-231慢病毒穩轉細胞系NDRG2表達鑒定結果圖；4-1為Real-time?PCR檢測RNA水平的變化，4-2為Western?blot檢測蛋白水平的變化；

圖5為MCF-7細胞中不同Adr濃度導致的DNA損傷程度檢測結果圖；

圖6為MDA-MB-231細胞中不同Adr濃度導致的DNA損傷程度檢測結果圖；