[發明專利]鬼針草總黃酮的提取方法及其在制備治療類風濕性關節炎藥物中的應用

無效

• 申請號: 201210238676.5
• 申請日: 2012-07-10
• 公開（公告）號: CN102716166A
• 公開（公告）日: 2012-10-10
• 發明（設計）人: 李霞;袁鳳來;趙懿清;李成萬;賀春暉
• 申請（專利權）人: 無錫市第三人民醫院
• 主分類號: A61K36/28
• 分類號: A61K36/28;A61P29/00;A61P19/02
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所 32104
• 代理人: 殷紅梅

技術領域

本發明涉及鬼針草總黃酮的提取方法及其在制備治療類風濕性關節炎藥物中的應用，屬于醫藥技術領域。

背景技術

類風濕性關節炎（rheumatoid?arthritis，RA）是一種不明病因的臨床綜合征，以慢性多關節炎癥為主要表現，目前認為屬于系統性自身免疫性疾病。主要特征為慢性、全身性、侵蝕性外周關節滑膜炎，主要侵犯滑膜組織，繼而引起關節軟骨、周圍韌帶及骨質的破壞。本病呈全球性分布，我國的患病率為0.32％～0.36%，低于歐美國家白人的1%，是造成我國人群喪失勞動力和致殘的主要病因之一。目前RA的治療主要是：①控制關節及其他組織炎癥，緩解癥狀；②保持關節功能和防止畸形；③修復受損關節以減輕疼痛和恢復功能，尚缺乏根治RA的方案以及預防RA的措施。到目前為止尚無特異性治療藥物，臨床上常采用的是控制炎癥和抑制機體免疫應答的藥物，如潑尼松、氨甲喋呤等，但是，它們在抑制機體免疫應答引起的炎癥反應和組織損傷的同時，也抑制了免疫系統的抗感染能力，將由此而產生一系列不良反應。

RA是一種以關節滑膜及關節軟骨損害為特征的全身性免疫性疾病，主要表現為對稱性、慢性、進行性多關節炎。一旦發病，往往終身罹患，嚴重影響患者的生活質量。但類風濕性關節炎至今尚無特效療法，抗炎和免疫療法是治療RA的主要手段，但主要是激素和抗代謝等不良反應較多的藥物。因此尋找有效的具有免疫調節作用且副作用小的藥物，對于類風濕性關節炎的治療具有重要的意義。在此背景下，人們的目光轉向了中醫中藥。中醫藥防治類風濕性關節炎的長期臨床實踐積累給抗類風濕性關節炎的中藥研究奠定了堅實的基礎，特別是前人對類風濕性關節炎（中醫痹癥范疇）治療的理論總結和處方用藥經驗，為當今中藥抗類風濕性關節炎研究提供了線索和捷徑。尋找價格便宜和療效好的中藥及其有效成分治療RA，日漸成為研究的熱點。迄今報道對類風濕性關節炎中藥有效成分有多糖類、黃酮類、苷類、生物堿類、內酯類、揮發油類及其他。具有療效確切、安全、副作用少、價格便宜等特點。

《中藥大辭典》載鬼針草有清熱解毒、祛風除濕、散瘀消腫之功效。我們從鬼針草中提取了活性成分TFB，研究其在治療類風濕性關節炎中的作用和作用機制。

鬼針草（Bidens?bipinnata?L.）系菊科鬼針草屬一年生草本植物，在我國大多數省區均有分布。鬼針草藥用歷史悠久，味苦、性平而無毒，具有清熱解毒，散瘀消腫等功效。其主要成分有黃酮苷、皂苷、生物堿、揮發油等，民間用于治療痢疾、腹瀉、肝炎、胃痛、關節痛等，現代研究發現鬼針草富含黃酮類化合物，為將其開發成對類風濕性關節炎有治療作用的有效藥物提供非常珍貴的依據。我們提取其有效部位，通過動物實驗證實其有顯著的抗類風濕性關節炎的作用。

經檢索，尚未見關于鬼針草總黃酮治療類風濕性關節炎的文獻報道。

發明內容

本發明的目的在于提供鬼針草總黃酮（total?flavones?of?Bidens?pilosa?L，TFB）的提取方法及其在治療類風濕性關節炎藥物中的應用。

按照本發明提供的技術方案，鬼針草總黃酮的提取方法，其提取工藝步驟為：取鬼針草，用10~14倍鬼針草重量的、質量濃度為70%~90%的乙醇溶解提取2次，每次1h；收集提取液，用大孔吸附樹脂HPD10吸附提取液；提取液上樣濃度為1~1.5mg·mL^-1，以1~3BV·h^-1的吸附速率進行吸附，上樣量以溶質總黃酮計為3~5mg·mL^-1大孔吸附樹脂；吸附后先以3~5BV的水水洗去雜質，再用3~5BV質量濃度為70%~90%的乙醇以3~5BV·h^-1的速率進行洗脫；在此條件下進行吸附、洗脫，大孔吸附樹脂能夠重復使用3~5次；經大孔吸附樹脂吸附，質量濃度為70%~90%的乙醇解吸后為鬼針草總黃酮溶液，采用比色法測定鬼針草總黃酮溶液中總黃酮的含量和得率。

所述總黃酮百分含量為60%~80%，得率為3%~6%。

所述鬼針草總黃酮溶液在制備治療類風濕性關節炎藥物中的應用。

所述鬼針草總黃酮溶液制備成治療類風濕性關節炎藥物，即片劑、膠囊劑、沖劑和顆粒。

鬼針草總黃酮的臨床推薦劑量為100~400mg/天，口服，一日三次。（80~160mg/kg是大鼠的用藥劑量）

將所制備得到的鬼針草總黃酮溶液進行動物實驗，結果如下：