[發明專利]一種新型磷脂雙分子層褶皺態的構建方法

無效

• 申請號: 201210238654.9
• 申請日: 2012-07-10
• 公開（公告）號: CN102749239A
• 公開（公告）日: 2012-10-24
• 發明（設計）人: 邵志峰;李林;丹尼爾·恰科夫;孫潔林;沈軼;胡鈞
• 申請（專利權）人: 上海交通大學
• 主分類號: G01N1/28
• 分類號: G01N1/28
• 代理公司: 上海思微知識產權代理事務所(普通合伙) 31237
• 代理人: 鄭瑋

技術領域

本發明涉及磷脂雙分子層制備領域，且特別涉及一種新型磷脂雙分子層褶皺態的構建方法。

背景技術

細胞是生命體的基本生命單元，它是由細胞膜包裹住的，從而能維持其內部結構的穩定性，保證正常的生命活動。

細胞膜不單是細胞的物理屏障，也是在細胞生命活動中重要的功能結構組成。細胞膜的主要組成部分是磷脂雙分子層、鑲嵌蛋白質以及糖被，而磷脂雙分子層是細胞膜的基本支架，它對整個細胞的功能實現具有重要的作用。

磷脂雙分子層是由上下兩層磷脂分子組成的，每個磷脂分子由頭部和尾巴組成，頭部是親水的，由磷脂和膽堿組成，尾巴是疏水的，由兩條碳鏈組成

由于磷脂雙分子層在生物細胞結構和功能上的重要作用，并且它具有豐富的相變——液態、膠態，對于某些磷脂還有褶皺態，許多科研工作者對它進行了研究，使用的儀器主要有原子力顯微鏡、X射線等等。在利用這些儀器對磷脂雙分子層進行研究的時候，必須在基底上制備樣品，因此如何制備更接近于自然狀態下的樣品就成為首要解決的問題。

磷脂雙分子層的褶皺態是介于液態和膠態之間的一種中間態，它可以利用溫度的控制來形成。但是，許多儀器并不具有溫度控制的功能，因此，我們只有使用其它方法來引導褶皺態。

褶皺態的實現方法主要有利用三羥甲基氨基甲烷(Tris)方法，而本發明的方法制備的樣品進一步消除了基底對生物樣品的影響，因此更接近于自然狀態。

發明內容

本發明提出一種新型磷脂雙分子層褶皺態的構建方法，可使制備的生物樣品更接近于自然狀態，適合生物學的研究，且操作手段簡單、成本低廉。

為了達到上述目的，本發明提出一種新型磷脂雙分子層褶皺態的構建方法，包括下列步驟：

提供一基底，所述基底為云母或其它基底；

在所述基底表面制備一層膠態下的第一磷脂雙分子層；

在所述第一磷脂雙分子層上再制備一層第二磷脂雙分子層，從而穩定實現其褶皺態。

進一步的，所形成的磷脂雙分子層褶皺態具有一定周期上下起伏的結構。

進一步的，所述膠態下的第一磷脂雙分子層利用囊泡融合或其它平面磷脂雙分子層制備的方法來實現。

進一步的，所述囊泡融合的構建方法包括將溶解于氯仿中的磷脂樣品利用氮氣吹干，放置在通風櫥中20小時。

進一步的，所述囊泡融合的構建方法包括加入500ul的20mM氯化鈉溶液，使得磷脂分子溶液濃度達到2mg/ml，并超聲振動，直至溶液變清澈。

進一步的，所述囊泡融合的構建方法包括在4mm*4mm新揭開的云母表面上滴上25ul的2mg/ml磷脂溶液，放置在4℃的環境中16小時。

進一步的，所述囊泡融合的構建方法包括將該樣品放置于60℃環境中，烘烤40分鐘，再緩慢降溫至室溫。

進一步的，所述第二磷脂雙分子層的制備方法包括加入25μl的2mg/ml磷脂溶液，放置在4℃的環境中48小時。

進一步的，所述第二磷脂雙分子層的制備方法包括將該樣品升溫至60℃，烘烤40分鐘，再緩慢降溫至室溫。

本發明公開了一種新型磷脂雙分子層褶皺態的構建方法，其包括利用囊泡融合的方法在云母上制備一層膠態下的磷脂雙分子層，在該層新基底上再制備一層磷脂雙分子層從而穩定實現其褶皺態。并且該層新基底還可用于其它生物樣品的制備，如磷脂雙分子層、蛋白質等等。本發明可使制備的生物樣品更接近于自然狀態，適合生物學的研究，且操作手段簡單、成本低廉。

附圖說明

圖1所示為本發明較佳實施例的新型磷脂雙分子層褶皺態的構建方法流程圖。

具體實施方式

為了更了解本發明的技術內容，特舉具體實施例并配合所附圖式說明如下。

本發明介紹了一種新型磷脂雙分子層褶皺態的構建方法，其包括利用囊泡融合或其它平面磷脂雙分子層制備的方法在云母或其它基底表面制備一層膠態下的磷脂雙分子層，在該層新基底上再制備一層磷脂雙分子層從而穩定實現其褶皺態。

請參考圖1，圖1所示為本發明較佳實施例的新型磷脂雙分子層褶皺態的構建方法流程圖。本發明提出一種新型磷脂雙分子層褶皺態的構建方法，包括下列步驟：

步驟S100：提供一基底，所述基底為云母或其它基底；

步驟S200：在所述基底表面制備一層膠態下的第一磷脂雙分子層；

步驟S300：在所述第一磷脂雙分子層上再制備一層第二磷脂雙分子層，從而穩定實現其褶皺態。