[發明專利]基于磷光發光技術的時間分辨熒光檢測試劑盒及其制備方法和應用

無效

• 申請號: 201210235960.7
• 申請日: 2012-07-09
• 公開（公告）號: CN103293300A
• 公開（公告）日: 2013-09-11
• 發明（設計）人: 謝愛武
• 申請（專利權）人: 深圳市艾瑞生物科技有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種基于磷光發光技術的時間分辨熒光檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括：包被有抗原或抗體的磁顆粒、標記有磷光發光材料的抗原或抗體、待測物標準品溶液、洗滌液和微孔板。

2.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述包被有抗原或抗體的磁顆粒，是指磁顆粒通過表面修飾處理生成羧基或氨基中的至少一種活性基團，與抗原或抗體中的氨基酸殘基中裸露氨基共價反應形成的復合物。

3.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述標記有磷光發光材料的抗原或抗體，是指帶有羧基或氨基的鉑/鈀卟啉化合物，與抗原或抗體氨基酸殘基中的裸露氨基共價反應形成的復合物。

4.根據權利要求1所述的試劑盒，其特征在于，所述待測物標準品溶液，是指將待測物標準物質，按照一定的質量體積比或摩爾體積比溶解在基質配方中所得的溶液。所述配制待測物標準品溶液的基質配方為0.05mol/L?pH7.2Tris-HCl緩沖液，內含1.5％牛血清白蛋白、10％胎牛血清、0.1％防腐劑Proclin300和0.2％保護劑。

5.一種權利要求1所述試劑盒的制備方法，其特征在于，制備方法包括：制備包被有抗原或抗體的磁顆粒、標記有磷光發光材料的抗原或抗體、待測物標準品溶液和洗滌液。

6.根據權利要求6所述的試劑盒的制備方法，其特征在于，所述包被有抗原或抗體的磁顆粒，是將磁顆粒通過表面修飾處理生成羧基或氨基中的至少一種活性基團，與抗原或抗體中的氨基酸殘基中裸露氨基共價反應的過程。反應結束后用磷酸鹽緩沖液磁分離淋洗3次，2％牛血清白蛋白封閉，離心去除上清液后，用磁顆粒稀釋液溶解分散，備用。所述磁顆粒稀釋液為0.05mol/L?pH7.4MES緩沖液，內含2％牛血清白蛋白、3％聚乙二醇6000和0.1％蛋白穩定劑。

7.根據權利要求6所述的試劑盒的制備方法，其特征在于，所述標記有磷光發光材料的抗原或抗體采用異硫氰基(-NCS)偶聯法進行標記。

8.根據權利要求9所述的試劑盒的制備方法，其特征在于，所述磷光發光材料為金屬卟啉系列熒光染料，所述金屬卟啉為鉑/鈀卟啉，所述金屬卟啉的激發光光譜范圍為390-420nm，發射光波長范圍為600-700nm。

9.根據權利要求6所述的試劑盒的制備方法，其特征在于，所述配制洗滌液，配方為0.05mol/L?pH7.2Tris-HCl緩沖液，內含0.02％吐溫20和0.05％疊氮鈉。

10.一種權利要求6所述制備方法制備的時間分辨熒光檢測試劑盒在檢測生物樣品中的應用，其特征在于，檢測對象為全血、血漿、血清、腦脊液、尿液、唾液、糞便以及前列腺液標本中抗原、抗體、藥物、激素、毒品、抗生素、腫瘤標志物目標待測物，以及蔬菜、水果、食品、水源中農藥、抗生素的殘留檢測。