[發(fā)明專利]擬南芥ERIP2蛋白及其編碼基因與應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210234418.X
• 申請(qǐng)日: 2012-07-06
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103524606A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-01-22
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張勁松;陳受宜;陶建軍;張萬(wàn)科;馬彪;何鍶潔;林晴
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所
• 主分類號(hào): C07K14/415
• 分類號(hào): C07K14/415;C12N15/29;C12N15/63;C12N5/10;C12N1/15;C12N1/19;C12N1/21;C12N15/11;A01H5/00
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種擬南芥ERIP2蛋白及其編碼基因與應(yīng)用。

背景技術(shù)

在非生物和生物逆境的脅迫下，高等植物細(xì)胞有多種途徑感受和應(yīng)答外界環(huán)境中物化參數(shù)的變化，將胞外的信號(hào)變?yōu)榘麅?nèi)信號(hào)，經(jīng)過(guò)一系列磷酸化級(jí)聯(lián)反應(yīng)將信號(hào)傳遞到細(xì)胞核，經(jīng)轉(zhuǎn)錄因子調(diào)控相關(guān)的功能基因，啟動(dòng)逆境應(yīng)答基因的表達(dá)，提高植物的耐逆性。已經(jīng)證實(shí)，植物中特異的激素乙烯作為一種重要的植物激素，參與調(diào)控植物生長(zhǎng)發(fā)育的諸多方面。目前發(fā)現(xiàn)擬南芥II類乙烯受體ETR2和EIN4的獲得功能突變體etr2-1和ein4-1均有大蓮座的表型，而他們的突變體及雙突變體etr2-2和etr2-3ein4-4均有小蓮座的表型。因此應(yīng)用酵母雙雜技術(shù)從擬南芥中獲得了乙烯受體ETR2和EIN4的互作蛋白，ERIP1,ERIP2和ERIP3（Ethylene?Receptor-Interacting?Protein）,ERIP1與ERIP2和ERIP3的相似性分別為73.5%和47.5%。本申請(qǐng)是有關(guān)ERIP2及其編碼基因的應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一種擬南芥ERIP2蛋白及其編碼基因。

本發(fā)明提供的蛋白，來(lái)源于擬南芥（Arabidopsis?thaliana），名稱為ERIP2，是如下（a）或（b）的蛋白質(zhì)：

（a）由序列表中序列2所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；

（b）將序列表中序列2所示的氨基酸序列經(jīng)過(guò)一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且與植物蓮座或子葉大小相關(guān)的由序列2衍生的蛋白質(zhì)。

上述（a）或（b）中的蛋白可人工合成，也可先合成其編碼基因，再進(jìn)行生物表達(dá)得到。上述（b）中的蛋白的編碼基因可通過(guò)將序列表中序列1所示的DNA序列缺失一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的密碼子，和/或進(jìn)行一個(gè)或幾個(gè)堿基對(duì)的錯(cuò)義突變，和/或在其5′端和/或3′端連上表2所示的標(biāo)簽的編碼序列得到。

上述蛋白的氨基酸序列中一個(gè)或幾個(gè)氨基酸殘基的取代、替換和/或添加，有的是由于自然發(fā)生的變異引起的，有的是由人工誘變處理引起的。

序列表中序列2氨基酸殘基序列是由131個(gè)氨基酸殘基組成的蛋白質(zhì)。

編碼所述蛋白（ERIP2）的基因（ERIP2)也屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。

所述基因（ERIP2)可為如下1）-4）中任一一種的DNA分子：

1）序列表中序列1所示的DNA分子；

2）序列表中序列1自5’端第1到第393位堿基所示的DNA分子；

3）在嚴(yán)格條件下與1）或2）限定的DNA序列雜交且編碼植物蓮座或子葉大小相關(guān)蛋白的DNA分子；

4）與1）或2）限定的DNA序列至少具有70%、至少具有75%、至少具有80%、至少具有85%、至少具有90%、至少具有95%、至少具有96%、至少具有97%、至少具有98%或至少具有99%同源性且編碼植物蓮座或子葉大小相關(guān)蛋白的DNA分子。

序列表中序列1的DNA序列由396個(gè)堿基組成，該基因的讀碼框分別為自5’末端第1到第396位堿基。

所述特異性雜交條件可為如下：50℃，在7％十二烷基硫酸鈉（SDS）、0.5M?NaPO₄和1mM?EDTA的混合溶液中雜交，在50℃，2×SSC，0.1%SDS中漂洗；還可為：50℃，在7％SDS、0.5M?NaPO₄和1mM?EDTA的混合溶液中雜交，在50℃，1×SSC，0.1%SDS中漂洗；還可為：50℃，在7％SDS、0.5M?NaPO₄和1mM?EDTA的混合溶液中雜交，在50℃，0.5×SSC，0.1%SDS中漂洗；還可為：50℃，在7％SDS、0.5M?NaPO₄和1mM?EDTA的混合溶液中雜交，在50℃，0.1×SSC，0.1%SDS中漂洗；還可為：50℃，在7％SDS、0.5M?NaPO₄和1mM?EDTA的混合溶液中雜交，在65℃，0.1×SSC，0.1%SDS中漂洗；也可為：在6×SSC，0.5%SDS的溶液中，在65°C下雜交,然后用2×SSC,0.1%SDS和1×SSC,0.1%SDS各洗膜一次。