[發明專利]一種由纖維素酶和碳酸氫鈉組成的飼料添加劑、飼料及其應用和雞球蟲病活卵囊疫苗

無效

• 申請號: 201210229824.7
• 申請日: 2012-07-05
• 公開（公告）號: CN102726617A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發明（設計）人: 郝言芝;王江青
• 申請（專利權）人: 煙臺青大生物制藥有限公司
• 主分類號: A23K1/175
• 分類號: A23K1/175;A23K1/18;A61K39/012;A61P33/02
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 鄧建國

?

技術領域

本發明涉及一種由纖維素酶和碳酸氫鈉組成的飼料添加劑、飼料及其應用、和雞球蟲病活卵囊疫苗。

背景技術

雞球蟲病是一種原生動物寄生蟲病，由柔嫩艾美爾球蟲、堆形艾美爾球蟲、巨型艾美爾球蟲、毒害艾美爾球蟲、和緩艾美爾球蟲、布氏艾美爾球蟲、早熟艾美爾球蟲的一種或一種以上引起。它們在雞的腸道各部位寄生，引起腸道的炎癥、出血和雞的死亡，給養雞業造成巨大的經濟損失。

長期以來，該病的防治以藥物為主。由于藥物殘留影響食品安全和人類健康，加上球蟲對藥物容易產生抗藥性，該病的防治越來越依靠免疫手段。

目前使用的雞球蟲病疫苗主要是活卵囊疫苗，例如先靈葆雅PARACOX和COCCIVAC、加拿大維泰克的IMMUCOX、梅里亞的LIVACOX，其中COCCIVAC和IMMUCOX為強毒活卵囊疫苗。

在制造雞球蟲病活卵囊疫苗時，需要將活的疫苗卵囊從雞的糞便中分離出來，得到相對純凈的疫苗液。已知固形物的存在影響雞球蟲活卵囊疫苗的外觀和內在質量，現有的技術主要采用過濾、離心、超濾等手段除去疫苗液中的固形物。如公開號為?CN102174408A的專利所描述的方法。由于固形物在比重和大小等方面比較接近疫苗卵囊，因而現有技術不容易將固形物全部除去，如何進一步除去疫苗液中的固形物，是一個需要解決的問題。

發明內容

本發明的目的是為克服上述現有技術的不足，提供一種由纖維素酶和碳酸氫鈉組成的飼料添加劑、飼料及其應用、和雞球蟲病活卵囊疫苗。

為實現上述目的，本發明采用下述技術方案：

一種飼料添加劑，它由纖維素酶和碳酸氫鈉組成。

所述碳酸氫鈉與纖維素酶的比例為1克碳酸氫鈉：20U的纖維素酶。

纖維素酶和碳酸氫鈉在雞球蟲病活卵囊疫苗制備過程中減少疫苗液中固形物含量的應用。

添加的碳酸氫鈉與纖維素酶的比例為1克碳酸氫鈉：20U的纖維素酶。

纖維素酶和碳酸氫鈉在制備雞球蟲病活卵囊疫苗制備過程中用于減少疫苗液中固形物含量的飼料中的應用。

所述纖維素酶酶的添加量為200?—1000?U/kg飼料；添加的碳酸氫鈉的數量為每公斤飼料10—50克。添加的碳酸氫鈉與纖維素酶的比例為1克碳酸氫鈉：20U的纖維素酶。

一種用于雞球蟲病活卵囊疫苗制備過程中的飼料，制備疫苗所用雞的飼料中包括纖維素酶和碳酸氫鈉。

所述纖維素酶酶的添加量為200—1000?U/kg飼料。添加的碳酸氫鈉的數量為每公斤飼料10—50克。碳酸氫鈉與纖維素酶的比例為1克碳酸氫鈉：20U的纖維素酶。

所述纖維素酶為經過包被的飼料纖維素酶。

上述的飼料在雞球蟲病活卵囊疫苗制備過程中減少疫苗液中固形物含量的應用。

一種雞球蟲病活卵囊疫苗，其是以下步驟制成的：

（1）????????配制飼料：在常規雞飼料中添加纖維素酶和碳酸氫鈉，所述纖維素酶酶的添加量為200—1000?U/kg飼料。添加的碳酸氫鈉的數量為每公斤飼料10—50克。碳酸氫鈉與纖維素酶的比例為1克碳酸氫鈉：20U的纖維素酶；

（2）????????飼喂和接種：將配制的飼料飼喂待接種雞，自由采食；且給待接種雞接種球蟲弱毒株孢子化卵囊；

（3）????????收糞和卵囊分離：接種后96小時，收集雞的糞便，經60目篩過濾所收集雞糞，得濾液；離心濾液得到沉淀物；加鹽水到該沉淀，攪拌均勻并離心，收集表面部分鹽水，其中含有大量卵囊；收集表層鹽水后，向其中加入10倍體積的水，攪勻后離心，得到沉淀；向沉淀中再加入水并攪拌離心，如此3次，得到最終沉淀物，加適量水到最終沉淀物中得到疫苗液。

為了最大限度地減少疫苗液中的固形物，現有技術主要采用過濾、離心、沉淀、鹽水漂浮、超濾等方法，使用設備包括振動篩、離心機、超濾機等。本發明人意外發現，給制造疫苗所用雞的飼料中添加纖維素酶和碳酸氫鈉可以進一步減少疫苗液中固形物的含量，該飼料用于疫苗生產可提高疫苗質量。上述的纖維素酶可以是單一的纖維素酶，或是纖維素酶與其他酶的復合物。我們發現，當酶的添加量為10，100，400，500，1000，5000?U/kg飼料時，添加的碳酸氫鈉的數量為每公斤飼料10—50克時，最終制得的疫苗液中的固形物依次降低。其中添加200—1000U/kg飼料，能降低固形物20—25%。

本發明的有益效果是：該酶和碳酸氫鈉的添加能減少疫苗中固形物的含量。

具體實施方式