[發明專利]高致病性豬繁殖與呼吸綜合征JXA1-R株-豬細小病毒病二聯活疫苗及其制備方法和應用

無效

• 申請號: 201210229548.4
• 申請日: 2012-07-04
• 公開（公告）號: CN102727881A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發明（設計）人: 陳瑞愛;田克恭;練炳洲;遇秀琳;唐滿華;翟新驗;鄧小熊;周智;林綺萍;曲萍
• 申請（專利權）人: 廣東大華農動物保健品股份有限公司;中國動物疫病預防控制中心
• 主分類號: A61K39/23
• 分類號: A61K39/23;A61K39/12;A61P31/14;A61P31/20;G01N33/15;C12Q1/70;C12Q1/02
• 代理公司: 廣州市越秀區哲力專利商標事務所(普通合伙) 44288
• 代理人: 湯喜友

1.?一種高致病性豬繁殖與呼吸綜合征JXA1-R株-豬細小病毒病二聯活疫苗，其特征在于：其是含有高致病性豬繁殖與呼吸綜合征JXA1-R株病毒和豬細小病毒混合的混合病毒抗原液的凍干疫苗，每頭份凍干疫苗中高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒含量為10^5-7TCID₅₀/ml，豬細小病毒病毒含量為10^5-7TCID₅₀/ml。

2.?根據權利要求1所述的高致病性豬繁殖與呼吸綜合征JXA1-R株-豬細小病毒病二聯活疫苗，其特征在于：其還含有凍干保護劑。

3.?根據權利要求2所述的高致病性豬繁殖與呼吸綜合征JXA1-R株-豬細小病毒病二聯活疫苗，其特征在于：所述凍干保護劑為蔗糖脫脂乳凍干保護劑，其用量與混合病毒抗原液的體積比為1:1。

4.?根據權利要求3所述的高致病性豬繁殖與呼吸綜合征JXA1-R株-豬細小病毒病二聯活疫苗，其特征在于：所述蔗糖脫脂乳凍干保護劑是由以下組分組成：蔗糖5～10g、脫脂奶100ml。

5.?根據權利要求1或2所述的高致病性豬繁殖與呼吸綜合征JXA1-R株-豬細小病毒病二聯活疫苗，其特征在于：每頭份凍干疫苗中高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒含量為10^5.5-6.5TCID₅₀/ml，豬細小病毒病毒含量為10^5.5-6.5TCID₅₀/ml。

6.?一種高致病性豬繁殖與呼吸綜合征JXA1-R株-豬細小病毒病二聯活疫苗的制備方法，其特征在于：其包括以下步驟

1）高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒液的制備：將高致病性豬繁殖與呼吸綜合征病毒JXA1-R弱毒株按體積比為1%的量接種已長成單層的Marc-145細胞，旋轉培養，當70%以上細胞出現細胞病變時，收獲病毒細胞培養物，凍融后經離心或過濾除去細胞碎片，凍存于-40℃以下；

2）豬細小病毒液的制備：采用同步接種方法，在ST細胞分瓶傳代的同時，按體積比為1～2%的量同步接種豬細小病毒弱毒株，培養至70%以上細胞出現細胞病變時，收獲病毒細胞培養物，凍融后經離心或過濾除去細胞碎片，凍存于-20℃以下；

3）配苗及凍干：把上述步驟1）、2）得到的兩種細胞培養毒液按凍干后疫苗每頭份PRRSV病毒含量為10^5-7TCID₅₀/ml，PPV病毒含量為10^5-7TCID₅₀/ml計算出兩種病毒液的配苗用量，按照計算出的用量混合，加入穩定劑，經冷凍真空干燥得到高致病性豬繁殖與呼吸綜合征-豬細小病毒病二聯活疫苗。

7.?根據權利要求6所述的高致病性豬繁殖與呼吸綜合征JXA1-R株-豬細小病毒病二聯活疫苗的制備方法，其特征在于：步驟1）中旋轉培養的溫度為37℃，旋轉速度為9～12轉/小時。

8.?根據權利要求6所述的高致病性豬繁殖與呼吸綜合征JXA1-R株-豬細小病毒病二聯活疫苗的制備方法，其特征在于：步驟2）中培養時溫度為37℃，培養時間為72～96小時。

9.?一種高致病性豬繁殖與呼吸綜合征JXA1-R株-豬細小病毒病二聯活疫苗在高致病性豬繁殖與呼吸綜合征JXA1-R株-豬細小病毒病二聯活疫苗質量標準建立中的應用。