[發(fā)明專利]制備isochromophilone VIII的方法及其在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210228658.9
• 申請日: 2012-07-03
• 公開（公告）號: CN102746995A
• 公開（公告）日: 2012-10-24
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳玉嬋;張玲;李冬利;王磊;章衛(wèi)民
• 申請（專利權(quán)）人: 廣東省微生物研究所
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C12P17/06;A61K31/352;A61P35/00;C12R1/80
• 代理公司: 廣州科粵專利商標(biāo)代理有限公司 44001
• 代理人: 劉明星

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于醫(yī)藥生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及利用海洋真菌Penicillium?sp.FS60制備isochromophilone?VIII的方法，以及化合物isochromophilone?VIII在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用和作為抗腫瘤藥物活性成份方面的應(yīng)用。?

背景技術(shù)：

癌癥是目前危害人類健康的主要疾病之一。國際抗癌聯(lián)盟發(fā)布的數(shù)據(jù)表明，2008年，全球有1270萬人患癌，死亡人數(shù)高達(dá)760萬。世界范圍內(nèi)因癌癥死亡的人數(shù)，比艾滋病、瘧疾和結(jié)核病加起來還要多。如果不采取有效的措施，預(yù)計(jì)到2030年，每年將出現(xiàn)2600萬新增癌癥病例，癌癥死亡人數(shù)將達(dá)1700萬。我國癌癥發(fā)生率正處于快速上升時(shí)期，每年癌癥發(fā)病人數(shù)約260萬，死亡180萬。癌癥已成為中國城市和農(nóng)村居民的第一死因，癌癥帶來的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)和對社會(huì)發(fā)展的不良影響也日益突顯。在癌癥的三大療法中，藥物治療占有主要位置。?

海洋是一個(gè)物種和資源豐富的世界，具有多樣的化合物，是手性底物的資源庫。生長在海洋這一特殊環(huán)境中的海洋生物，在其生長和代謝過程中，產(chǎn)生并積累了大量具有特殊化學(xué)結(jié)構(gòu)并具特殊生理活性和功能的物質(zhì)，是開發(fā)新型藥物的重要資源。海洋抗腫瘤天然產(chǎn)物在海洋藥物研究中一直占據(jù)主導(dǎo)地位，不僅開展得最早而且具有扎實(shí)的研究基礎(chǔ)。學(xué)者預(yù)言，最有前途的抗癌藥將來自海洋。現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)海洋生物提取物中至少有10%具有細(xì)胞毒活性，美國每年有1500個(gè)新化合物從海洋中分離出來，其中1%具抗腫瘤作用。目前已有多個(gè)海洋抗癌藥物進(jìn)入臨床或臨床前研究階段。?

化合物isochromophilone?VIII，其結(jié)構(gòu)式如式(Ⅰ)所示：?

化合物isochromophilone?VIII最早公開于文獻(xiàn)“Yang?DJ,Hiroshi?T,Noriko?T,et?al.New?isochromophilones?VII?and?VIII?produced?by?Penicillium?sp.FO-4164[J].J?Antibiot,1995,49(3):223-229.”，該文獻(xiàn)測試了該化合物對抑制二酰甘油酰基轉(zhuǎn)移酶（DGAT）和卵磷脂-膽固醇-酰基轉(zhuǎn)移酶（ATAC）的活性，半數(shù)抑制濃度（IC₅₀值）分別為127μM和47μM。但到目前為止，在國內(nèi)外文獻(xiàn)報(bào)道中，均未涉及化合物isochromophilone?VIII具有抗腫瘤活性的報(bào)道。?

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供一種化合物isochromophilone?VIII的制備方法。?

本發(fā)明的化合物isochromophilone?VIII的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：化合物isochromophilone?VIII是從海洋真菌Penicillium?sp.FS60的發(fā)酵培養(yǎng)物中分離制備得到的。?

所述的化合物isochromophilone?VIII從海洋真菌Penicillium?sp.FS60的發(fā)酵培養(yǎng)物中分離制備得到的，具體步驟如下：?

（1）制備海洋真菌Penicillium?sp.FS60的發(fā)酵培養(yǎng)物，分離菌絲體和發(fā)酵液，取菌絲體干燥后粉碎用乙醇或乙醇水溶液浸提，濃縮浸提液至無乙醇，再用水懸浮，懸浮液用乙酸乙酯萃取，萃取液經(jīng)濃縮后得浸膏；?

（2）浸膏經(jīng)硅膠柱層析，以石油醚-乙酸乙酯作為洗脫劑，從體積比100：0~0：100梯?度洗脫，收集石油醚-乙酸乙酯體積比為5：1洗脫下來的餾分，經(jīng)反相硅膠柱層析，以甲醇-水體積比80：20作為洗脫劑洗脫，再經(jīng)純化后得到化合物isochromophilone?VIII。?

所述的步驟（1）制備海洋真菌Penicillium?sp.FS60的發(fā)酵培養(yǎng)物具體步驟為：挑取Penicillium?sp.FS60的菌絲接種于半海水馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基中，在28℃、120r/min條件下培養(yǎng)5天，制得種子液，然后將種子液按10%的接種量接種于半海水馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基中，28℃、120r/min條件下培養(yǎng)7天，而制得Penicillium?sp.FS60的液體發(fā)酵培養(yǎng)物，所述的半海水馬鈴薯葡萄糖液體培養(yǎng)基，每升是通過以下方法配制的：用500mL的海水煮200g的馬鈴薯，煮沸20min，過濾得馬鈴薯汁，再加入葡萄糖20g、KH₂PO₄3g、MgSO₄1.5g、維生素B₁10mg、用水補(bǔ)足至1000mL。?

所述的乙醇水溶液優(yōu)選為體積分?jǐn)?shù)98%的乙醇水溶液。?