[發明專利]檢測HER2基因表達水平的實時熒光定量PCR試劑盒

有效

• 申請號: 201210227940.5
• 申請日: 2012-07-02
• 公開（公告）號: CN102719547A
• 公開（公告）日: 2012-10-10
• 發明（設計）人: 曾驥孟;鄭立謀;李怡;張換敬
• 申請（專利權）人: 廈門大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;G01N21/64
• 代理公司: 廈門南強之路專利事務所 35200
• 代理人: 馬應森

1.檢測HER2基因表達水平的實時熒光定量PCR試劑盒，其特征在于包括HER2基因PCR反應液、ACTB基因PCR反應液、Taq酶系、對照品和包裝物；

所述HER2基因PCR反應液由PCR反應緩沖液、HER2基因特異性上游引物、HER2基因特異性下游引物和EVA?Green熒光染料組成；

所述ACTB基因PCR反應液由PCR反應緩沖液、ACTB基因特異性上游引物、ACTB基因特異性下游引物和EVA?Green熒光染料組成；

所述HER2基因特異性上游引物F序列為：

5’-GTCCGTCCTACAACTACCTTTCTACGGAC-3’；

所述HER2基因特異性下游引物R序列為：

5’-TGAGAAGGGCTTGCTGCACTTCTCA-3’；

所述ACTB基因特異性上游引物F序列為：

5’-CAGGATTCCTGGGCATGGAGTCCTG-3’；

所述ACTB基因特異性下游引物R序列為：

5’-CGCCAACAGACAGC?ACTGTGTTGGCG-3’；

其中，引物5’端和3’端帶有下劃線的堿基為參與形成引物內雙鏈結合區的堿基；

所述PCR反應緩沖液由100mM?Tris-HCL、50mM?KCL、10mM?MgSO₄、50mM（NH₄）₂S0₄和25mM?dNTPs組成。

2.如權利要求1所述的檢測HER2基因表達水平的實時熒光定量PCR試劑盒，其特征在于所述HER2基因特異性上游引物的濃度、HER2基因特異性下游引物的濃度、ACTB基因特異性上游引物的濃度和ACTB基因特異性下游引物的濃度均為50μM。

3.如權利要求1所述的檢測HER2基因表達水平的實時熒光定量PCR試劑盒，其特征在于所述Taq酶系采用熱啟動Taq酶，每反應用量為1U。

4.如權利要求1所述的檢測HER2基因表達水平的實時熒光定量PCR試劑盒，其特征在于所述對照品采用MCF-7細胞株cDNA和無模板對照品。

5.如權利要求1所述的檢測HER2基因表達水平的實時熒光定量PCR試劑盒，其特征在于所述包裝物采用瓶或管。