[發明專利]一種高效表達Hst 5的重組工程菌及構建方法和應用無效
| 申請號： | 201210227517.5 | 申請日： | 2012-07-03 |
| 公開（公告）號： | CN102719390A | 公開（公告）日： | 2012-10-10 |
| 發明（設計）人： | 張同存;羅學剛;李方;何影影;王楠 | 申請（專利權）人： | 天津科技大學 |
| 主分類號： | C12N1/21 | 分類號： | C12N1/21;C12N15/12;C12N15/74;A23L3/3571;A23L1/00;C12R1/46;C12R1/23;C12R1/245;C12R1/25 |
| 代理公司： | 天津盛理知識產權代理有限公司 12209 | 代理人： | 王來佳 |
| 地址： | 300457 天津市濱海新*** | 國省代碼： | 天津;12 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 高效 表達 hst 重組 工程 構建 方法 應用 | ||
1.一種高效表達Hst5的重組工程菌，其特征在于：所述重組工程菌包括Hst5基因，其序列見序列6，所述重組工程菌的表達質粒為pMG36e，所述重組工程菌的宿主菌為乳酸菌。
2.根據權利要求1所述的高效表達Hst5的重組工程菌，其特征在于：所述乳酸菌包括乳酸乳球菌、嗜酸乳桿菌、干酪乳桿菌、植物乳桿菌。
3.一種如權利要求1所述的高效表達Hst5的重組工程菌的構建方法，其特征在于：構建方法如下：
⑴構建N端引入乳酸菌信號肽的Hst5基因，Hst5基因序列見序列6；
⑵將Hst5基因插入到乳酸菌表達載體的多克隆位點，構建得到Hst5重組質粒，所述重組質粒為pMG36e-Hst5；
⑶將Hst5重組質粒轉化至宿主菌，所述宿主菌為乳酸菌，得到Hst5重組乳酸菌。
4.根據權利要求3所述的高效表達Hst5的重組工程菌的構建方法，其特征在于：所述步驟⑴中N端引入乳酸菌信號肽的Hst5基因通過DNA合成或重疊PCR方法獲得，在采用重疊PCR方法時，所用引物序列包括：
在引物P3、P4中分別引入SalI和HindIII酶切位點，下劃線部分，重疊PCR分為兩步：第一步，以P1和P2引物互為模板進行PCR擴增；第二步，以第一步獲得的PCR產物為模板，以P3和P4為引物進行PCR擴增得到目的基因。
5.一種如權利要求1所述的高效表達Hst5的重組工程菌作為防腐添加劑的應用。
6.一種如權利要求1所述的高效表達Hst5的重組工程菌作為發酵劑的應用。
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