[發明專利]一株嗜熱兼氧菌UTM601及其應用

有效

• 申請號: 201210226967.2
• 申請日: 2012-06-29
• 公開（公告）號: CN102732465A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發明（設計）人: 劉永躍;周順桂;許宜北;汪涌
• 申請（專利權）人: 大地綠源環保科技(北京)有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C05F11/08;C05F17/00;C12R1/01
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王朋飛;張慶敏

技術領域

本發明涉及環境微生物技術領域，具體地，涉及一種嗜熱兼氧菌菌株UTM601及其在高溫堆肥中的應用。?

背景技術

堆肥化是在微生物作用下通過高溫發酵使有機物礦質化、腐殖化和無害化而變成腐熟肥料的過程。高溫堆肥作為一種微生物學過程，依賴于具一定數量及活力的微生物源。隨著堆肥的產業化、商品化，微生物接菌劑已經成為一項重要的技術而被應用。?

目前，高溫堆肥采用的發酵工藝一般為好氧發酵，微生物接種劑也主要是中溫好氧菌。好氧發酵必須維持一定的氧濃度。但堆肥是一個復雜系統，對于不同混料比例、堆體的不同部位，鼓風過程的影響范圍和程度都會隨之變化，即便是相同的通風量下，堆體中不同部位的氧含量分布也不一致，這就使得在實際操作中難以把握適當的通風量：通風量過小，微生物無法獲得足夠的氧氣，活性降低，甚至會處于厭氧狀態，堆肥反應進程緩慢；通風量過大，堆體的溫度不容易積累，難以保證無害化效果，也影響堆肥的正常進程，且增加能耗，氮素大量損失，降低發酵產物的肥料效益。尤其是在50℃-70℃的堆肥高溫期環境中，常用微生物接種劑的活性還受到溫度的抑制。?

嗜熱兼氧菌具有嗜熱、兼性厭氧，較中溫菌，具有更高的有機物降解活性和更快的代謝速率的優點，可提高有機物質的降解速率，縮短工藝運行時間，在有機廢物資源化利用領域中具有潛在的應用價值。將嗜熱兼氧菌作為接種劑應用于堆肥，將有效解決以上問題，促進堆肥進程。但目前還未見到關于嗜熱兼氧菌作為接種劑應用于高溫堆肥的公開報告。?

發明內容

本發明的目的在于提供一種嗜熱兼氧菌（Anoxybacillus?pushchinoensis）及其應用。?

本發明菌株UTM601是從采自大地綠源環保科技（北京）有限公司堆肥發酵車間的高溫期污泥堆肥樣品中，在40℃下，經微氧傳代馴化，分離純化、需氧性生長性能測試、降解性能比較試驗篩選后得到的Anoxybacillus?sp.菌株，命名為UTM601。該菌株已于2012年3月22日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（簡稱CGMCC，地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，郵編100101），分類命名為Anoxybacillus?pushchinoensis，保藏號CGMCC?No.5929。?

本發明菌株UTM601具有如下特性：?

UTM601在NA培養基（牛肉膏3-5g，蛋白胨6-10g，氯化鈉3-5g，瓊脂14-18g，植物凝膠7-9g，蒸餾水1000ml，pH7.2）上菌落特征是：形態為不規則狀，表面濕潤，淺黃色，嚙蝕狀，扁平，生長迅速，50-70℃培養下36小時菌落直徑約3mm。利用引物引物為27f：5′-AGA?GTT?

TGA?TCC?TGG?CTC?AG-3′和1492r：5′-GGT?TAC?CTT?GTT?ACG?ACTT-3′經PCR擴增該菌株的16S?rRNA基因序列，獲得序列提交到EzTaxon數據庫(http://www.eztaxon.org/)進行同源性比對，結果顯示與Anoxybacillus?pushchinoensis?K-1^T相似性最高，為98.80%，此序列是鑒定該菌株的主要特征依據。其次是上述菌株在微氧條件下生長良好和具有快速降解淀粉的特性為鑒別該菌株的次要特征。?

上述嗜熱兼氧菌UTM601的富集馴化方法是：高溫期污泥堆肥樣品10g加入到90ml的無菌水中，在200rpm的搖床上搖30分鐘，然后取出靜置30分鐘，取10ml上清液接到90ml的NA培養液中，置于水浴搖床上，在60℃下，變速馴化培養：以每6小時為一個時間單位，以50rpm為變速單位，逐步增加轉速，直到達到150rpm后，同理逐步減小轉速，此為一個馴化周期；當完成3個馴化周期后，取?10ml馴化液轉接至新的NA培養液中，繼續馴化培養，如此傳代3次。?

上述嗜熱兼氧菌UTM601的需氧性能測試篩選方法是：按接種量5%向已滅菌的裝有50ml、100ml、150ml、200ml、250ml?NA培養液的250ml三角瓶進行接種，在60℃下靜置培養3天，檢測培養液的OD₆₀₀。?