[發明專利]一株伯克霍爾德氏菌QZ7及其產生生物表面活性劑的應用

有效

• 申請號: 201210226085.6
• 申請日: 2012-07-03
• 公開（公告）號: CN103074243A
• 公開（公告）日: 2013-05-01
• 發明（設計）人: 于彩虹;趙茜茜;王然;王亞;黃瑩;張春輝;何緒文
• 申請（專利權）人: 中國礦業大學(北京)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P7/02;C12R1/01
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技術領域

本發明涉及一株伯克霍爾德氏菌(Burkholderia?sp.)QZ7及其產生生物表面活性劑的應用?

背景技術

表面活性劑，具有典型的兩親結構，并能顯著改變溶液表面張力，或具有乳化性能的物質。它的一端為極性的親水基團，另一端為非極性的疏水基團。由于表面活性劑的結構特性，它具有助懸、乳化、去垢、分散、增溶、發泡、洗滌、抗硬水性等作用，并在工業、農業、醫藥、日用化工等眾多領域得到廣泛應用。?

表面活性劑屬于生物難降解物質，在我國環境標準中將其歸屬為第二類污染物質。表面活性劑廢棄物來源廣泛，成分復雜。它的廣泛使用，對地表水、地下水、土壤造成了污染，也對農業生產、水生生物，甚至人類健康產生不良影響。據統計2009年我國表面活性劑的表觀消費量已達到145.45萬噸，表面活性劑帶來的環境問題已不容忽視。人們希望能夠得到活性高、性能優良、環境友好型的表面活性劑。而微生物產生的生物表面活性劑正具備上述優點，符合人們需求。?

生物表面活性劑是微生物的次級代謝產物，是微生物在特殊條件下產生的。生物表面活性劑同化學表面活性劑相比，同樣具有典型的兩親結構，但表面/界面性能更優秀，并且具有獨特的性能。例如：無毒或低毒性，高生物降解性、極端溫度、pH和鹽度條件下仍然保有界面活性、在自然環境中易被生物降解、環境兼容性強等優點。近年來由于生物表面活性劑在工農業、醫藥衛生、環境保護等多個領域取得的重要進展，成為國內外研究的熱點。?

能夠產生表面活性劑的微生物有細菌、真菌、酵母菌，其中細菌占絕大多數，且大多數為假單胞菌、桿菌，其它菌屬較為少見。大多數已知的生物表面活性劑屬于糖脂、脂肽類，其它種類如磷脂類、脂肪酸、中性脂類、聚合表面活性劑類等較為少見。微生物產表面活性劑產量普遍較低，且微生物的種類和培養條件對表面活性劑的產量有很大影響。因此篩選表面活性劑高產菌株，優化培養條件有重要意義。?

申請人從中國礦業大學(北京)中心餐廳周邊長期被植物油污染的環境中篩選得到了一株表面活性劑的高產菌株，經16S?rRNA鑒定為Burkholderia?sp.。該菌株產生的表面活性劑類型為脂肪醇類。該菌屬及其產生的脂肪醇類表面活性劑較為少見，且表面性能優秀，具有很好的應用潛力。?

發明內容

本發明涉及一株用于生產生物表面活性劑的革蘭氏陰性伯克霍爾德氏菌(Burkholderia?sp.)，命名為QZ7，該菌株可產生脂肪醇類生物表面活性劑。該菌株于2012年6月25日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其保藏編號為CGMCC?No：6269。?

經優化培養條件，菌株QZ7產生表面活性劑的最佳碳源為大豆油，最佳氮源為NaNO₃與(NH₄)₂SO₄結合使用。QZ7最佳發酵條件為：大豆油10g/L，NaNO₃?1.0g/L，(NH₄)₂SO₄?0.5g/L，K₂HPO₄?1.5g/L，KH₂PO₄?1.5g/L，溫度為35℃，pH為7.0，接種量為10％。?

QZ7所產的表面活性劑為陰離子型，脂肪醇類物質。純化之后的表面活性劑可在室溫下將純水的表面張力由71.19mN/m降至30.74mN/m，臨界膠束濃度為0.3g/L，其表面性能遠遠超過普通化學表面活性劑。發酵優化后的最大產量為1.67g/L，培養24h便可達到最大值。?

附圖說明

圖1為菌株QZ7培養液表面活性與OD₆₀₀變化圖?

圖2為菌株QZ7離子型鑒定圖?

圖3為菌株QZ7表面活性劑紅外光譜圖?

圖4為菌株QZ7產生物表面活性劑最佳碳源篩選結果?

圖5為菌株QZ7產生物表面活性劑最佳氮源篩選結果?

具體實施方式

以下實施例用于說明本發明，但不用來限制本發明的范圍。?

實施例1菌株篩選?

1、菌株的采樣與富集?