[發明專利]一種人工鋅指核酸酶表達載體及其構建方法和應用

無效

• 申請號: 201210225140.X
• 申請日: 2012-07-02
• 公開（公告）號: CN102732560A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發明（設計）人: 袁玉國;成勇
• 申請（專利權）人: 揚州大學
• 主分類號: C12N15/85
• 分類號: C12N15/85;C12N15/66;C12N5/10;A01K67/027
• 代理公司: 南京知識律師事務所 32207
• 代理人: 盧亞麗

1.一種人工鋅指核酸酶表達載體，其特征在于通過下述方法構建得到：將SEQ?ID?NO.1和SEQ?ID?NO.2所示序列，分別插入到載體pMLM290、pMLM292上的Xba?l/BamH?I位點而獲得。

2.一種人工鋅指核酸酶表達載體的構建方法，其特征在于，將SEQ?ID?NO.1和SEQ?ID?NO.2所示序列，分別插入到載體pMLM290、pMLM292上的Xba?l/BamH?I位點而獲得。

3.如權利要求2所述的人工鋅指核酸酶表達載體的構建方法，包括以下步驟：人工合成編碼左右側鋅指蛋白域的基因序列，左右側鋅指蛋白域的基因序列分別如SEQ?ID?NO.1和SEQ?ID?NO.2所示，然后分別用Xba?l/BamH?I雙酶切上述人工合成基因片段，用凝膠回收試劑盒回收酶切產物片段，然后將回收片段分別插入到載體pMLM290/292上的Xba?l/BamH?I位點上，構建成一對表達鋅指核酸酶的質粒載體。

4.權利要求1所述人工鋅指核酸酶表達載體在突變轉基因細胞或轉基因動物中的增強綠色熒光蛋白標記基因中的應用。