[發明專利]一種靈芝水提物的質量控制方法

有效

• 申請號: 201210222763.1
• 申請日: 2012-07-02
• 公開（公告）號: CN102735772A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發明（設計）人: 王勇;陳碩;盧端萍;蔣婷婷;范明;李曄;吳長輝
• 申請（專利權）人: 福建省藥品檢驗所;福建仙芝樓生物科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N21/31
• 代理公司: 福州元創專利商標代理有限公司 35100
• 代理人: 蔡學俊

技術領域

本發明涉及一種藥品或保健品質量分析方法，具體涉及一種靈芝水提物的質量控制方法。?

背景技術

靈芝為多孔菌科真菌赤芝Ganoderma?lucidum(Leyss．ex?Fr．)Karst．或紫芝Ganoderma?sinense?Zhao，Xu?et?Zhang或松杉靈芝Ganoderma?tsugae?Murr.?的干燥子實體，具有補氣安神、止咳平喘等功效。靈芝提取工藝主要有水提與醇提，而多數采用水提工藝，即采用多孔菌科真菌赤芝（Ganoderma?lucidum?(Leyss.?ex?Fr.)?Karst.）、紫芝（Ganoderma?sinnese?Zhao,?Xu?et?Zhang）及松杉靈芝（Ganoderma?tsugae??Murr.）的干燥子實體經水提取、濃縮、干燥后制得。故本發明采用靈芝水提物命名。研究表明，靈芝中主要含有多糖、三萜、核苷、生物堿、黃酮、氨基酸及微量元素等多種化學成分。目前，對靈芝藥理活性研究主要集中在靈芝多糖和靈芝三萜類成分，因此，靈芝多糖和三萜類成分作為靈芝的最主要功效成分，很有必要對其含量進行測定。

本發明在一系列實驗過程中對保健食品原料靈芝水提物標志性成分的測定方法進行了研究。靈芝多糖是靈芝中的主要活性成分之一，具有免疫調節、抗腫瘤、抗氧化、降血糖等多種藥理活性。目前，某些企業為了達到干燥甚至虛報靈芝多糖含量的目的，常在靈芝水提物中加入糊精、淀粉等各種輔料。若按2010年版中國藥典的方法測定，將造成靈芝多糖測定結果偏高。本研究通過水提醇沉法提取靈芝粗多糖，用銅試劑沉淀其中具有葡聚糖結構的多糖，采用紫外分光光度法測定其含量，排除了輔料對測定的影響，為靈芝水提物質量控制提供依據。?

靈芝三萜類化合物是靈芝的另一主要藥效成分，由于具有抗癌，抗炎，抗氧化等藥理活性而備受關注。本發明人在采用高效液相色譜法對靈芝水提物三萜類成分進行研究中發現，靈芝水提物中含有含量相對較高的靈芝酸A、B、C₂。對比目前常用的比色法測定總三萜含量的方法，特異性強，可達到鑒別和質量控制的目的。?

發明內容

為了有針對性地控制產品質量，本發明采用粗多糖含量和靈芝酸A、B、C₂含量之和作為靈芝水提物的質量控制指標，提供了一種靈芝水提物的質量控制方法。?

本發明采取的技術方案如下：?

以靈芝酸A、靈芝酸B、靈芝酸C₂含量之和以及粗多糖含量作為靈芝水提物的質量控制指標。

????所述靈芝酸A、B含量的檢測方法如下：?

（1）對照品溶液的制備??

取減壓干燥至恒重的靈芝酸A、B對照品，加入甲醇制成每1ml含164?μg靈芝酸A和含52?μg靈芝酸B的混標溶液。

（2）供試品溶液的制備??

取靈芝水提物0.5?g，置25?ml容量瓶中，加甲醇適量超聲處理10?min，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過。

（3）高效液相色譜檢測??

以辛烷基鍵合硅膠為填充劑，乙腈為流動相A，0.1?%?醋酸水溶液為流動相B，梯度洗脫；檢測波長為257?nm；柱溫為22?℃；流速為1.0?ml/min；理論板數按靈芝酸A計算，應不低于5000；分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各?10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。

所述靈芝酸C₂含量的檢測方法如下：?

（1）對照品溶液的制備??

取減壓干燥至恒重的靈芝酸C₂對照品，加甲醇制成每1?ml含33μg靈芝酸C₂的對照品溶液。

（2）供試品溶液的制備??

取靈芝水提物0.5?g，置25?ml容量瓶中，加甲醇適量超聲處理10?min，放冷，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，濾過。

（3）高效液相色譜檢測??

以十八烷基鍵合硅膠為填充劑，乙腈為流動相A，0.1?%?醋酸水溶液為流動相B，梯度洗脫；檢測波長為257?nm；柱溫為20℃；流速為1.0?ml/min；理論板數按靈芝酸C₂計算，應不低于5000；分別精密吸取對照品溶液和供試品溶液各?10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。

????所述粗多糖含量的檢測方法如下：?

（1）標準曲線繪制：