[發明專利]一種從金針菇菇根廢料中提取具有細胞免疫活性的多糖的方法

有效

• 申請號: 201210219695.3
• 申請日: 2012-06-29
• 公開（公告）號: CN102702378A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發明（設計）人: 胡秋輝;楊文建;趙立艷;傅亞欣;安辛欣;楊方美;方勇;辛志宏;馬寧;鄭惠華;陳坤;林德祥
• 申請（專利權）人: 南京財經大學;南京農業大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61P37/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

一、技術領域

本發明涉及一種從金針菇菇根廢料中提取具有細胞免疫活性的多糖的方法，屬于生物醫藥領域，產品可廣泛應用于功能食品、生物醫藥等領域。其中金針菇菇根為金針菇加工過程中，作為廢料被切除的根蒂部分。

二、背景技術

金針菇(Flammulina?velutipes)又名樸菇、冬菇，隸屬真菌門、層菌綱、傘菌目、口蘑科、金線菌屬，含有較高的蛋白質，碳水化合物和粗纖維，而脂肪含量較低，還含有VB1、VB2、VC等多種維生素，且富含鈣、磷、鐵等多種礦物質，是一種不可多得的高營養品。

隨著人類對保健食品以及金針菇營養價值的認識逐漸加深，金針菇將會有非常廣闊的開發前景，與此同時，也將會有越來越多的金針菇菇根的廢料產生。據我國食用菌協會統計，截止至2007年我國金針菇總產量約為144.1萬噸，其中金針菇菇根占金針菇重量的15％左右，約為21.6萬噸，然而在金針菇的生產過程中，菇根大多被廢棄，甚至連作牲畜的飼料都不甚理想，沒有得到充分的利用。這樣金針菇菇根在生產流通環節的廢棄，給企業增加了處理廢棄物的成本。因此，金針菇菇根的合理開發利用迫在眉睫，所以需要為金針菇菇根的利用開辟一條途徑。

在多糖的開發利用中，分離提取是關鍵的步驟之一，它不僅影響著產品的得率，還與產品的活性價值密切相關。金針菇多糖能溶于水，不溶于醇、醚、酮等有機溶劑，因而多糖傳統提取方法主要有熱水浸提法、酸堿浸提法、酶法等。傳統的熱水浸提法和酸堿浸提法，所需提取時間長、提取溫度高、能耗大，而且長時間的高溫或者酸堿介質有可能造成多糖發生降解，使多糖的提取很難達到理想效果，這些都大大限制了多糖的開發利用。隨著科技的進步，目前關于多糖提取的采用較多的方法為超聲提取法，利用超聲波輻射產生的強烈空化效應、機械振動、擾動效應、高的加速度、乳化、擴散、擊碎和攪拌等多種作用，增加物質分子的頻率和速度，從而加速目標成分進入溶劑，實現高效快速地提取細胞內容物，從而提高了效率，縮短了時間；同時提取過程不涉及化學試劑，這在一定程度上減少了對浸提物質生物活性的影響，因此超聲提取技術在中藥有效成分提取工藝中已得到廣泛應用。利用超聲波提取金針菇菇根多糖，研究其適宜的提取條件，提高多糖得率，是提高金針菇菇根廢料利用率的重要途徑，也是后續生物活性研究的基礎。

三、發明內容

技術問題

本發明的目的是提供一種可以從金針菇菇根廢料中提取具有細胞免疫活性多糖的方法，該方法避免了傳統提取技術，提取時間長，提取率低、能耗高的弊端。同時該法操作簡單，提取的多糖得率較高，可以最大程度地提高廢料的利用率，減少對環境的污染。

技術方案

一種從金針菇菇根廢料中提取具有細胞免疫活性多糖的方法，是通過以下方法制成的：

1)金針菇菇根超微粉的制備：新鮮金針菇菇根晾曬至半干后，放于烘箱中60℃鼓風烘干，然后經30B粉碎機粉碎，雙輥破碎機破碎，80目篩分，氣流粉碎機粉碎，300目篩分，制得金針菇菇根超微粉，置于-20℃備用。

2)稱取金針菇菇根超微粉，加入適量85％乙醇室溫下靜置2h以除去部分色素及雜質，再按照水料比10～50mL/g加入去離子水，利用DCTZ-2000恒溫超聲提取機，以200～680W超聲提取5～25min，離心取上清液；上清液采用Sevag試劑(正丁醇∶三氯甲烷＝1∶4)法去蛋白，8000r/min條件下離心10min取上清；

3)使用旋轉蒸發儀將上清液濃縮至適量，加入4倍體積無水乙醇，4℃下醇沉12h，5000r/min離心15min取沉淀，于60℃烘箱烘干得到金針菇菇根粗多糖粉末；

4)將金針菇菇根粗多糖粉末用去離子水配成10mg/mL溶液，加入DEAE-纖維素-52交換柱，然后依次用去離子水、0.1、0.3mol/L?NaCl溶液梯度洗脫，分離得到3個組分；

5)粗多糖得率的計算公式：

粗多糖得率(％)＝粗多糖質量(g)/超微粉重(g)×100％

有益效果

本發明與傳統的熱水浸提法相比，提取效率高，金針菇菇根多糖得率高。