[發(fā)明專利]一種天然黃色素生產(chǎn)方法及其生產(chǎn)菌株

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210218005.2
• 申請日: 2012-06-28
• 公開（公告）號: CN102899265A
• 公開（公告）日: 2013-01-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 毛得獎;朱亞玲;韓寧
• 申請（專利權(quán)）人: 山東輕工業(yè)學(xué)院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P1/04;C12R1/39
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一株產(chǎn)黃色素?zé)晒饧賳伟?Pseudomonas?fluorescens?BMG-1)?CGMCC?No.?6060。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的熒光假單胞菌(Pseudomonas?fluorescens?BMG-1)?CGMCC?No.?6060發(fā)酵生產(chǎn)提取黃色素的方法，包括如下步驟：

1).?將保藏的熒光假單胞菌(Pseudomonas?fluorescens?BMG-1)?CGMCC?No.6060使用MKB培養(yǎng)基活化、擴大培養(yǎng)；

2).?將步驟1)?的菌株培養(yǎng)物以2%-8%的接種量接種于PD培養(yǎng)液中，20℃-28℃淺盤靜置、自然通氣方式培養(yǎng)36-60小時；

3).?將步驟2)?的培養(yǎng)液除去菌體，收集上清液，以乙醇提取其中的黃色素，經(jīng)濃縮干燥后獲得黃色素粗制品及精制品。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：活化復(fù)壯熒光假單胞菌的MKB培養(yǎng)基含有下述物質(zhì)：5.0克酪蛋白氨基酸，15mL甘油，2.5克K₂HPO₄，2.5克MgSO₄·7H₂O，加蒸餾水至1000毫升，115℃滅菌20分鐘，pH為7.2。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：所選發(fā)酵生產(chǎn)黃色素的PD培養(yǎng)液含有下述物質(zhì)：20克葡萄糖，200克新鮮馬鈴薯的沸水浸出物，加蒸餾水至1000毫升，121℃滅菌20分鐘，pH為7.0。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：所述黃色素生產(chǎn)采用淺盤靜置、自然通氣方式。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于：所述含黃色素上清液是通過離心除去培養(yǎng)液中的菌體后得到的，離心轉(zhuǎn)速為3000-8000r/min。

7.根據(jù)權(quán)利要求2或6所述的方法，其特征在于：低溫(35℃-45℃)真空濃縮離心除菌后的含黃色素上清液至原體積的1/5-1/10；以乙醇浸提濃縮液，收集合并黃色乙醇提取液，低溫(35℃-40℃)真空濃縮干燥可制得黃色素粗制品；將含黃色素乙醇提取液在濃縮后過硅膠柱層析、減壓濃縮干燥可制得黃色素精制品。

8.根據(jù)權(quán)利要求2或7所述的方法，其特征在于：所述黃色素提取溶劑為無水乙醇，用量為濃縮液的5-10倍。

9.根據(jù)權(quán)利要求2或7或8所述的方法，其特征在于：所述柱層析采用60-100目或100-200目試劑級硅膠，以蒸餾水為洗脫劑；收集洗脫液真空干燥后獲得黃色素精制品；所述黃色素精制品在250nm處有1個最大吸收峰。