[發明專利]蛋白Rh054_01780在抗黑龍江立克次體的免疫保護中的應用

有效

• 申請號: 201210216811.6
• 申請日: 2012-06-27
• 公開（公告）號: CN102716474A
• 公開（公告）日: 2012-10-10
• 發明（設計）人: 齊永;溫博海;王錫樂;熊小路;段長松;李佳明;焦俊;龔文平;賈引軍
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍軍事醫學科學院微生物流行病研究所
• 主分類號: A61K39/02
• 分類號: A61K39/02;A61P31/04
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢

技術領域

本發明涉及一種蛋白Rh054_01780在抗黑龍江立克次體的免疫保護中的應用。

背景技術

立克次體病是一種嚴重威脅人類健康的人獸共患自然疫源性疾病，在兩次世界大戰期間曾給人類帶來深重的災難。斑點熱病是立克次體病的一種，由斑點熱群立克次體引起，經蜱傳播的傳染性疾病。

黑龍江立克次體（Rickettsia?heilongjiangensis）是1983年在我國黑龍江綏芬河地區森林革蜱中新分離到的立克次體株，為專性細胞內寄生的革蘭氏陰性小桿菌。該菌引起的斑點熱病被WHO正式命名為遠東斑點熱。遠東斑點熱是一種人獸共患病，主要分布于中國東北地區、俄羅斯西伯利亞地區和日本，近年在廣東也有發現。

制備斑點熱疫苗通常方法為采用滅活菌體或化學提取亞單位疫苗，而這些方法需要雞胚或者細胞大量培養立克次體，但是提取純化立克次體的防護要求高，工藝復雜，成本昂貴，因此難以大量制備和推廣使用。

發明內容

本發明的目的是提供蛋白Rh054_01780在抗黑龍江立克次體的免疫保護中的應用。

本發明保護蛋白Rh054_01780在制備遠東斑點熱疫苗中的應用。

本發明還保護蛋白Rh054_01780在制備針對黑龍江立克次體（Rickettsia?heilongjiangensis）的疫苗中的應用。

本發明還保護蛋白Rh054_01780在制備針對遠東斑點熱的保護性抗原中的應用。

本發明還保護蛋白Rh054_01780在制備針對黑龍江立克次體（Rickettsia?heilongjiangensis）的保護性抗原中的應用。

本發明還保護一種遠東斑點熱疫苗，它的活性成分包括蛋白Rh054_01780。所述活性成分可由所述蛋白Rh054_01780和佐劑組成。

本發明還保護一種黑龍江立克次體（Rickettsia?heilongjiangensis）的疫苗，它的活性成分包括蛋白Rh054_01780。所述活性成分可由所述蛋白Rh054_01780和佐劑組成。

本發明還保護一種針對遠東斑點熱的保護性抗原，它的活性成分包括蛋白Rh054_01780。所述活性成分可由所述蛋白Rh054_01780和佐劑組成。

本發明還保護一種針對黑龍江立克次體（Rickettsia?heilongjiangensis）的保護性抗原，它的活性成分包括蛋白Rh054_01780。所述活性成分可由所述蛋白Rh054_01780和佐劑組成。

以上任一所述佐劑可為弗氏佐劑、氫氧化鋁佐劑、明礬佐劑、脂質體佐劑等。

以上任一所述佐劑具體可為弗氏完全佐劑或弗氏不完全佐劑。

以上任一所述蛋白Rh054_01780為如下（a）或（b）：

（a）由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質；

（b）將序列表中序列1所示的氨基酸序列經過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的由序列1衍生的蛋白質。

本發明的發明人發現黑龍江立克次體的蛋白Rh054_01780可以作為一種抗原蛋白，能夠刺激機體產生免疫應答對抗黑龍江立克次體毒株攻擊，為具有遠東斑點熱疫苗功能的保護性抗原。蛋白Rh054_01780可通過基因工程制備，用蛋白Rh054_01780作為疫苗與菌體蛋白疫苗相比，具有制備方法簡便、成本低、產量高、更安全等優點。本發明對于遠東斑點熱的防疫和治療具有重大價值。

附圖說明

圖1為蛋白電泳檢測圖。

圖2為實時熒光定量PCR檢測免疫小鼠脾組織內黑龍江立克次體拷貝數評價蛋白Rh054_01780的免疫保護效果。

圖3為實時熒光定量PCR檢測免疫小鼠肝組織內黑龍江立克次體拷貝數評價蛋白Rh054_01780的免疫保護效果。

圖4為實時熒光定量PCR檢測免疫小鼠肺組織內黑龍江立克次體拷貝數評價蛋白Rh054_01780的免疫保護效果。

具體實施方式

以下的實施例便于更好地理解本發明，但并不限定本發明。下述實施例中的實驗方法，如無特殊說明，均為常規方法。下述實施例中所用的試驗材料，如無特殊說明，均為自常規生化試劑商店購買得到的。以下實施例中的定量試驗，均設置三次重復實驗，結果取平均值。實施例中利用儀器Nanodrop?1000分光光度計（購自Thermo?Scientific公司）進行蛋白質濃度的測定。