[發明專利]一種地中海貧血篩查試劑及制備方法和檢測篩查方法

無效

• 申請號: 201210216021.8
• 申請日: 2012-06-27
• 公開（公告）號: CN102721682A
• 公開（公告）日: 2012-10-10
• 發明（設計）人: 黃文東
• 申請（專利權）人: 黃文東
• 主分類號: G01N21/77
• 分類號: G01N21/77
• 代理公司: 中山市科創專利代理有限公司 44211
• 代理人: 尹文濤

技術領域

本發明涉及一種地中海貧血篩查試劑，本發明還涉及一種制備該地中海貧血篩查試劑的方法。本發明還涉及一種采用該試劑檢測篩查地中海貧血的方法，屬于生物化學、物理、檢驗診斷試劑領域。

背景技術

地中海貧血（Thalassemia）是一組遺傳性溶血性疾病，其特點是血紅蛋白的珠蛋白肽鏈中有一種或偶爾幾種的合成受到抑制。在我國多見于南方沿海地區如廣東、廣西、湖南、湖北、四川、浙江、福建和臺灣等地區。這種疾病是由于紅細胞內的血紅蛋白數量和質量的異常造成紅細胞壽命縮短的一種先天性貧血。地中海貧血主要分成兩大類，包括α地中海貧血和β地中海貧血，這兩類地中海貧血有四個等級，包括重型、中間型、輕型以及基因攜帶者。現在基因（PCR）確診地中海貧血的試驗操作復雜，費用昂貴，不利于普及。而一管法篩查地中海貧血試劑操作繁瑣，且要離心沉淀，完全是手工操作，效力低下。

發明內容

本發明的目的是為了克服現有技術中的不足之處，提供一種使用方便，價格相對便宜，檢測效果好的地中海貧血篩查試劑。

本發明的另一個目的是提供一種制備該地中海貧血篩查試劑的方法。

本發明另一個目的是提供一種地中海貧血的檢測篩查方法。

為了達到上述目的，本發明采用以下方案：

一種地中海貧血篩查試劑，其特征在于包括有試劑A和試劑B，所述的試劑A由母液用蒸餾水稀釋30倍所得，所述的試劑B由母液用蒸餾水稀釋10倍所得，其中所述的母液按重量百分比由以下組分組成：

如上所述的一種地中海貧血篩查試劑，其特征在于所述的A液按重量百分比由以下組分組成：

如上所述的一種地中海貧血篩查試劑，其特征在于所述的B液按重量百分比由以下組分組成：

如上所述的一種地中海貧血篩查試劑，其特征在于所述的樣本稀釋液為醫用生理鹽水。

制備如上所述的地中海貧血篩查試劑的方法，其特征在于包括以下步驟：

在潔凈的玻璃容器中按比例加入分析純氯化鈉，磷酸二氫鉀，磷酸氫二鈉含十二個結晶水，加入部分蒸餾水，然后攪拌溶解，最后加入余量的蒸餾水，制得母液，分別取母液各一份，蒸餾水稀釋30倍即得試劑A，稀釋10倍即得試劑B。

一種地中海貧血的檢測篩查方法，其特征在于采用權利要求1-3任一種試劑，所述的在試劑全自動生化分析儀使用，試劑A及試劑B參數相同：主波長：600nm，方法：終點法，方向：上升反應，K值：10000，樣品量為15ul，試劑量為200ul，反應時間為5分鐘，反應溫度為37℃。

如上所述的制備方法，其特征在于各步驟均在無菌車間里進行。

本發明中組分的分子式、性狀及產地：

（1）分析純氯化鈉分子式：NaCl??分子量58.44

無色結晶性粉末，無嗅微有潮解性，溶于水，不溶于乙醇（廣州番禺力強化工廠）

（2）磷酸二氫鉀分子式：KH₂PO₄分子量136.09

無色結晶，無嗅微有潮解性，溶于水，不溶于醇（廣州化學試劑廠）

（3）磷酸氫二鈉（含12結晶水）分子式Na₂HPO₄.12H₂O分子量358.14

無色結晶性，無嗅微有潮解性，溶于水，在干燥空氣中易風化（廣東臺山粵橋化工廠）

本發明原理：

本發明利用地中海貧血患者與正常人的紅細胞膜結構差異，在特定均相氯化鈉磷酸鹽緩沖溶液中正常紅細胞被溶解形成吸光度變化與其溶液中的血紅蛋白濃度成反比，在全自動生化分析儀中以600nm處測定其在試劑A及試劑B均相緩沖溶液中的吸光度值，計算出A/B比值，此比值的大小與地中海貧血患者嚴重程度呈正相關關系，因此可利用此比值檢測出地中海貧血患者。

采用本發明試劑檢測可大大減低檢驗人員的工作強度，操作完全自動化，提高了生物安全等級。本發明更有利于普及普通人群、婚前或產前及新生兒對地中海貧血的篩查，預防或減少地中海貧血嬰兒的出生率。本發明填補了市場空白的，開發適應全自生化分析儀的操作程序，創造更大的社會效率。

本發明在檢驗過程中不檢測紅細胞溶血率，利用全自動生化分析儀600nm波長直接測定紅細胞在兩種不同氯化鈉濃度磷酸鹽緩沖溶液中的吸光度，然后直接計算比值。本發明不受患者貧血、黃疸、混濁程度的影響，試劑2～8℃下貯藏質量穩定時間可達一年。