[發明專利]山大顏提取物及其制備方法與抗腫瘤應用

有效

• 申請號: 201210214331.6
• 申請日: 2012-06-26
• 公開（公告）號: CN102764320A
• 公開（公告）日: 2012-11-07
• 發明（設計）人: 張翠仙;張冬梅;陳敏峰;葉文才;雷玲芳;王志芳;鐘瑩
• 申請（專利權）人: 廣州中醫藥大學;暨南大學
• 主分類號: A61K36/74
• 分類號: A61K36/74;A61P35/00;C07J21/00;A61K31/7048
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 林名欽

技術領域

本發明涉及天然藥物及化學藥物領域，具體涉及山大顏提取物及其主要成分的制備方法和在抗腫瘤方面的應用。?

背景技術

目前，我國共有惡性腫瘤患者約450萬人，每年新增病例200多萬，死亡病例約170萬。惡性腫瘤已經超越心腦血管疾病，成為威脅人類生命的第一大殺手^[1]。因此，研究開發抗癌藥物一直是全世界醫藥界難點和熱點。在我國，臨床上中草藥已被廣泛應用于抗腫瘤，具有確切的療效、較低的毒副作用、不易產生耐藥等特點^[2-4]，越來越受到醫藥工作者的關注。據統計，目前抗腫瘤藥物中約有60%來源于天然產物^[5-6]。?

山大顏為茜草科植物九節木（Psychotria?asiatica?L.）的干燥葉及嫩枝，又名大丹葉、暗山公、暗山香、刀傷木、青龍吐霧（臺灣）。具有清熱燥濕、解毒、殺蟲等功效。臨床上常用于治療感冒、上呼吸道感染、急性扁桃體炎、腸炎、細菌性痢疾、高血壓等疾病^[7-8]。近年有研究表明，山大顏能具有顯著的抗老年癡呆的活性^[9]。同時也是國家非物質文化遺產——廣東涼茶的常用中藥之一，但是尚未見山大顏在抗腫瘤研究方面的報道。本專利首次公開了山大顏總三萜皂苷及其7種主要成分Psychotrianosides?A~G的抗腫瘤作用。?

發明內容

本發明的目的在于提供一種山大顏提取物及其制備方法和在抗腫瘤方面的應用。?

本發明的目的通過下述技術方案實現：?

一種山大顏提取物，其化學成分主要為三萜皂苷類，其中總三萜皂苷所占質量百分數為20~90%；所述總三萜皂苷主要是13-28環氧的烏蘇烷型三萜皂苷，主要包括新化合物Psychotrianosides?A~F(1~6)和從自然界中首次獲得的天然產物Psychotrianosides?G(7)（結構如圖1所示）的混合物，此7種三萜皂苷占總三萜皂苷質量的20~80%；所述具有抗腫瘤作用的山大顏提取物HPLC檢測總皂苷含有上述7種三萜皂苷的含量依次為：6~10%的1、10~40%的2、2~5%的3、3~8%的4、3~8%的5、3~8%的6、10~15%的7；所述百分比為質量百分比；?

所述具有抗腫瘤作用的山大顏主要成分是指三萜皂苷化合物Psychotrianosides?A~G。?

所述Psychotrianosides?A~G的制備方法包括以下步驟：山大顏經乙醇/水加熱提取，減壓濃縮得浸膏，浸膏加水攪拌，依次用有機溶劑萃取，正丁醇部位大孔樹脂富集，乙醇/水洗脫，產物在經反相ODS分離純化（甲醇/水洗脫）、重結晶后得到。?

所述山大顏提取物由如下方法制備而成：將山大顏經乙醇或甲醇加熱回流或滲濾提取，減壓濃縮得到浸膏，經大孔樹脂富集，甲醇－水洗脫，得到山大顏提取物。所述乙醇或甲醇的體積濃度是65~90%。具體包括如下步驟：山大顏（Psychotria?sp.）干燥莖經乙醇(或甲醇)80℃回流(或滲濾)提取，減壓濃縮得到浸膏，浸膏經大孔樹脂富集，甲醇—水(V/V=40~90%)梯度洗脫，得到山大顏提取物；該提取物經硅膠柱層析分離，用石油醚（PE）-乙酸乙酯（EtOAc）(100:0→0:100)?梯度洗脫（10個百分點為一個梯度），TLC追蹤，得到18個餾分(C1-C18)，餾分C15經氯仿甲醇（10:1~10:3）梯度洗脫（每100ml為一個流份），TLC追蹤，得兩個餾分A1（10:1）和A2（10:3）；A1經反相碳十八（簡稱ODS）(V_MeOH/V_H2O=85:15)分離純化，TLC追蹤，依次得7,1。A2經ODS(V_MeOH/V_H2O=60:40)分離純化，TLC追蹤，10%硫酸乙醇顯色，依次得2和3；C18經ODS(V_MeOH/V_H2O=50:50~60:40)純化，TLC追蹤，10%硫酸乙醇顯色，依次得4、5、6。?

上述山大顏提取物能用于制備治療腫瘤藥物或保健品，所述腫瘤為胃癌、肝癌、肺癌、腸癌、鼻咽癌、乳腺癌、耐藥型肝癌或耐藥型乳腺癌。?