[發(fā)明專利]一種治療骨質(zhì)疏松多肽的制備方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210213044.3
• 申請日: 2012-06-26
• 公開（公告）號: CN102731643A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 肖慶;劉建;馬亞平;袁建成
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳翰宇藥業(yè)股份有限公司
• 主分類號: C07K14/635
• 分類號: C07K14/635;C07K1/20;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 深圳市深佳知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 44285
• 代理人: 唐華明

1.一種特立帕肽的制備方法，其特征在于，制備組成特立帕肽的各肽樹脂片段，將各肽樹脂片段在固相上逐步偶聯(lián)得到特立帕肽樹脂，然后裂解得到特立帕肽粗品，純化得到產(chǎn)品特立帕肽。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述制備方法，其特征在于，所述制備方法具體包括以下步驟：

A）制備組成特立帕肽的5個肽片段：肽樹脂片段1、側(cè)鏈保護肽片段2，側(cè)鏈保護肽片段3、側(cè)鏈保護肽片段4和側(cè)鏈保護肽片段5，其中所述肽樹脂片段1為特立帕肽序列34-26位氨基酸，所述側(cè)鏈保護肽片段2為特立帕肽序列25-21位氨基酸，所述側(cè)鏈保護肽片段3為特立帕肽序列20-13位氨基酸，所述側(cè)鏈保護肽片段4為特立帕肽序列12-7位氨基酸，所述側(cè)鏈保護肽片段5為特立帕肽序列6-1位氨基酸；

B）將側(cè)鏈保護肽片段2和肽樹脂片段1偶聯(lián)得到肽樹脂Ⅰ；

C)將側(cè)鏈保護肽片段3和肽樹脂Ⅰ偶聯(lián)得到肽樹脂Ⅱ；

D)將側(cè)鏈保護肽片段4和肽樹脂Ⅱ偶聯(lián)得到肽樹脂Ⅲ；

E)將側(cè)鏈保護肽片段5和肽樹脂Ⅲ偶聯(lián)得到肽樹脂Ⅳ；

F)肽樹脂Ⅳ裂解得到特立帕肽粗品

G）特立帕肽粗品經(jīng)純化得到特立帕肽。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述制備方法，其特征在于，所述步驟A）中肽樹脂片段1所用的固相載體為王樹脂。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述制備方法，其特征在于，所述步驟A）中側(cè)鏈保護肽片段2、側(cè)鏈保護肽片段3、側(cè)鏈保護肽片段4和側(cè)鏈保護肽片段5分別由各片段的氨基酸偶聯(lián)在樹脂獲得各片段的肽樹脂，然后裂解制得。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述制備方法，其特征在于，所述步驟A）中側(cè)鏈保護肽片段2、側(cè)鏈保護肽片段3、側(cè)鏈保護肽片段4和側(cè)鏈保護肽片段5所用的固相載體為2-氯三苯甲基氯樹脂。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述制備方法，其特征在于，所述步驟A）中肽樹脂片段1、側(cè)鏈保護肽片段2、側(cè)鏈保護肽片段3、側(cè)鏈保護肽片段4和側(cè)鏈保護肽片段5的偶聯(lián)劑為HOBT/DIC、PyBOP/HOBt/DIPEA或TBTU/HOBt/DIPEA。

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述制備方法，其特征在于，所述步驟A）中側(cè)鏈保護肽片段2、側(cè)鏈保護肽片段3、側(cè)鏈保護肽片段4、側(cè)鏈保護肽片段5的裂解劑為TFE。

8.根據(jù)權(quán)利要求2所述制備方法，其特征在于，所述步驟B）-步驟E)中側(cè)鏈保護肽與肽樹脂偶聯(lián)的偶聯(lián)劑為HOBT/DIC、PyBOP/HOBt/DIPEA或TBTU/HOBt/DIPEA。

9.根據(jù)權(quán)利要求2所述制備方法，其特征在于，所述步驟B）-步驟E)中側(cè)鏈保護肽片段與肽樹脂偶聯(lián)的反應(yīng)溶劑為DMF、DCM、NMP、DMSO中的一種或幾種。

10.根據(jù)權(quán)利要求2所述制備方法，其特征在于，所述步驟F)中肽樹脂Ⅳ裂解的裂解液為TFA與水體積比為95:5的混合溶液、TFA、DET、PHOH與水體積比為90:5:3:2的混合溶液或TFA、DET、TIS、PHOH與水體積比為80:5:5:5:5的混合溶液。

11.根據(jù)權(quán)利要求2所述制備方法，其特征在于，所述步驟G)中純化為反相高效液相色譜純化。

12.根據(jù)權(quán)利要求1所述制備方法，其特征在于，所述制備方法具體包括以下步驟：

1）制備組成特立帕肽的3個肽片段：肽樹脂片段a、側(cè)鏈保護肽片段b和側(cè)鏈保護肽片段c，其中所述肽樹脂片段a為特立帕肽序列34-26位氨基酸，所述側(cè)鏈保護肽片段b為特立帕肽序列25-11位氨基酸，所述側(cè)鏈保護肽片段c為特立帕肽序列10-1位氨基酸；

2）將側(cè)鏈保護肽片段b和肽樹脂片段a偶聯(lián)得到肽樹脂A；

3)將側(cè)鏈保護肽片段3和肽樹脂A偶聯(lián)得到肽樹脂B；

4)肽樹脂B裂解得到特立帕肽粗品；

5）特立帕肽粗品經(jīng)純化得到特立帕肽。