[發明專利]一種杜鵑花無菌苗快速菌根化的方法

有效

• 申請號: 201210210895.2
• 申請日: 2012-06-25
• 公開（公告）號: CN102696466A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發明（設計）人: 張春英;黃芳;尹麗娟;陳真;楊兵
• 申請（專利權）人: 上海市園林科學研究所
• 主分類號: A01G31/00
• 分類號: A01G31/00;C12N1/14;C12R1/645
• 代理公司: 上海世貿專利代理有限責任公司 31128
• 代理人: 嚴新德

技術領域：

本發明屬于植物學領域，尤其涉及一種杜鵑花的栽培技術，具體來說是一種杜鵑花無菌苗快速菌根化的方法。

背景技術：

杜鵑花是世界著名的盆栽花卉和園林綠化植物，在我國是具有“花中西施”美譽的傳統名花，深受人們的喜愛，種苗需求量大。播種繁殖及組織培養技術的突破是杜鵑花品種選育、種苗生產的關鍵環節。目前，很多杜鵑花種類能夠播種繁殖和組織培養擴繁，但是幼苗生長緩慢、移栽成活率低、葉片發黃等問題是限制品種選育和種苗生產效率的關鍵因素。

杜鵑花是典型的菌根植物，菌根的形成可以增強寄主植物分解有機質和捕獲氮的能力，促進植物的營養吸收，提高寄主抵抗逆境脅迫（如干旱、鹽堿、重金屬等）的能力，增加寄主的生長量等。許多研究表明菌根真菌在多種農作物、園藝作物上具有很高的應用價值，尤其是對植物苗期生長促進作用非常突出。如利用菌根菌劑開展濕地松育苗，得到的菌根化苗整齊粗壯，幼苗菌根化率達80%以上（戴玉明，“濕地松菌根化育苗試驗”，《安徽農業科學》,2000,28(2):236）。組織培養技術是苗木生產的重要技術，但很多植物組培苗在練苗或移栽階段常成活率低、生長緩慢的問題。研究表明：AM真菌能促進蘋果、葡萄、柑桔等組培苗的生長，提高其移栽成活率（李瑞卿、劉潤進、李敏，“園藝作物菌根及其在生態農業的應用”，《中國生態農業學報》，2002，20（1）：24~27）。墨蘭組培苗在移栽階段接入菌根真菌，8個月的生長后，幼苗干重比對照增加13.63%～16.95%，顯著地促進了蘭苗的生長（黃磊，賀筱蓉，鄭立明等，“促進蘭花組培苗生長的墨蘭菌根真菌研究初報”，《熱帶作物學報》，2004，25（1）：36~39）?？梢?，實現種苗菌根化是克服組培苗生長緩慢，提高成活率的一個有效措施。我們曾對云錦杜鵑播種幼苗接種技術進行了初步探索，結果表明采用栽培基質單層接種法有利于菌根的形成及幼苗的生長（于芳、張春英、尹麗娟等，“云錦杜鵑菌根真菌接種技術及其效應”，《福建農林大學學報（自然科學版）》，2008，37（4）：360~364）。但在后來的試驗中發現使用云錦杜鵑單層接種法常出現菌株生長過快，影響幼苗菌根化進程及后期生長。

發明內容：

本發明所要解決的技術問題是提供一種杜鵑花無菌苗快速菌根化的方法，所述的這種杜鵑花無菌苗快速菌根化的方法要解決現有技術中使用云錦杜鵑單層接種法常出現菌株生長過快、影響幼苗菌根化進程及后期生長的技術問題。

本發明提供了一種杜鵑花無菌苗快速菌根化的方法，包括以下步驟：

1)一個準備栽培基質及營養液的步驟，所述的栽培基質由草炭和黃沙組成，所述的草炭和黃沙的重量比為2~3：1，所述的營養液是液體培養基，在所述的液體培養基中，葡萄糖的質量百分比濃度在0.1~0.3%之間；

2)一個對無菌苗進行接種的步驟，將播種或組織培養生根幼苗移栽入無菌處理的栽培基質中，接種至少1個菌塊，所述的菌塊選自保藏號為CGMCC?No：6010的真菌菌株或者保藏號為CGMCC?No：6031的真菌菌株的真菌菌株中的任意一種或者兩種的混合，所述的菌塊的直徑在2~4mm之間，所述的菌塊接種處距離根系0.5~1.0cm，接種后幼苗放置在培養室培養，培養室條件為溫度22~25℃，光照周期16~10h/8~14h，光強度為2000~4000lux，培養的時間為10~12周。

進一步的，所述的液體培養基為MMN液體培養基。

進一步的，所述的栽培基質中，所述的草炭和黃沙的重量比為3：1。

本發明還提供了一種真菌菌株，保藏號為CGMCC?NO:6031，所述的菌株屬于子囊菌綱、殼霉目、杯霉科、樹粉孢屬。

進一步的，本發明還提供了上述的一種真菌菌株在促進杜鵑花幼苗生長中的用途。

本發明的液體培養基中，葡萄糖的質量百分比濃度控制在0.1~0.3%。葡萄糖濃度高，菌株生長太快而不利于植物的生長。

本發明中的一種菌根真菌菌株（OBJF31菌株），其分類命名為Oidiodendron?sp.，該菌株保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心（CGMCC）中，中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心的地址為：北京市朝陽區北辰西路1號院3號（中科院微生物研究所），保藏日期為2012年4月20號，保藏號為CGMCCNo：6010。