[發明專利]秦川牛FoxO1基因單核苷酸多態性分子標記的檢測方法與應用有效
| 申請號： | 201210210461.2 | 申請日： | 2012-06-25 |
| 公開（公告）號： | CN103233001B | 公開（公告）日： | 2016-11-02 |
| 發明（設計）人： | 陳宏;孫雨佳;郭文嬌;潘虹;薛璟;藍賢勇;雷初朝 | 申請（專利權）人： | 西北農林科技大學 |
| 主分類號： | C12N15/11 | 分類號： | C12N15/11;C12Q1/68 |
| 代理公司： | 西安通大專利代理有限責任公司 61200 | 代理人： | 蔡和平 |
| 地址： | 712100 *** | 國省代碼： | 陜西;61 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 秦川 foxo1 基因 核苷酸 多態性 分子 標記 檢測 方法 應用 | ||
1.一種秦川牛FoxO1基因的單核苷酸多態性，其特征在于，其基因單核苷酸多態性包括：
秦川牛FoxO1基因第178132位為G或A的單核苷酸多態性。
2.一種秦川牛FoxO1基因的單核苷酸多態性的檢測方法，其特征在于，包括以下步驟：
以包含FoxO1基因的待測秦川牛全基因組DNA為模板，以引物對P為引物，PCR擴增秦川牛FoxO1基因；用限制性內切酶HhaI消化PCR擴增產物之后，再對酶切后的擴增片段進行瓊脂糖凝膠電泳；根據電泳結果鑒定秦川牛FoxO1基因第178132位的單核苷酸多態性；
所述的引物對P為：
上游引物：5’-GACTCTCCTCCGCACAACGAC-3’??21nt；
下游引物：5’-GTCCAAGTCACTGGGGAGCTTC-3’?22nt。
3.如權利要求2所述的秦川牛FoxO1基因的單核苷酸多態性的檢測方法，其特征在于，所述的PCR擴增反應程序為：
94℃預變性5min；94℃變性30s，68℃退火30s，每個循環-1℃，72℃延伸30s，18個循環；94℃變性30s，50℃退火30s，72℃延伸30s，20個循環；72℃延伸10min。
4.如權利要求2所述的秦川牛FoxO1基因的單核苷酸多態性的檢測方法，其特征在于，所述的瓊脂糖凝膠的質量濃度為3％。
5.如權利要求2所述的秦川牛FoxO1基因的單核苷酸多態性的檢測方法，其特征在于，所述的根據瓊脂糖凝膠電泳結果FoxO1基因第178132位堿基多態性為：GG型表現：316bp和89bp；GA型表現：405bp、316bp和89bp；AA型表現：405bp。
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