[發明專利]一種提取腺苷的方法

無效

• 申請號: 201210208346.1
• 申請日: 2012-06-14
• 公開（公告）號: CN102731601A
• 公開（公告）日: 2012-10-17
• 發明（設計）人: 謝暢豐;鄭凝堅;劉劍;朱義福;雷劍芬;鄭明英;寧韓林
• 申請（專利權）人: 廣東肇慶星湖生物科技股份有限公司
• 主分類號: C07H19/167
• 分類號: C07H19/167;C07H1/06
• 代理公司: 廣州粵高專利商標代理有限公司 44102
• 代理人: 羅曉林

技術領域

本發明涉及一種從發酵液中分離提取腺苷粗品的方法

背景技術

腺苷作為藥物，在國際上首次投入市場是由日本藤澤藥廠的子公司Lyhomed于1989年在美國投入市場，隨后又在英國。比利時。法國等很多國家獲得批準，腺苷，又名腺嘌呤核苷，分子式C₁₀H₁₃N₅O₄，分子量267.24，無臭、無味、白色結晶性粉末，難溶于水、乙醇和乙醚，熔點233-238℃，比旋度-68.0°～-72.0°是一種遍布人體細胞的內源性核苷，可直接進入心肌經磷酸化生成腺苷酸，參與心肌能量代謝，同時還參與擴張冠脈血管，增加血流量。腺苷對心血管系統和肌體的許多其它系統及組織均有生理作用。腺苷生產發酵液是指腺苷生物發酵過程所得到的含有糖、氮源、無機鹽等多種腺苷培養基混合物，由于微生物生長代謝是一個十分復雜的過程，產生多種初級及次級的代謝產物，使發酵液成分變得非常復雜，如細胞自溶產生的細胞碎片以及細胞本身，微生物代謝生成的糖。蛋白質類膠體物質，還有培養基中違背完全吸收和利用的殘余營養物質，而產品腺苷只是占了其中很少的一部分。為了得到發酵液中的腺苷，首先需要將發酵液中各種破碎的微生物細胞、糖、蛋白質等膠態以及纖維顆粒物等固態雜質分離去除。由于生物發酵也是一個復雜體系，同時微生物細胞及碎片細胞，糖、蛋白質類膠粘物質增加了發酵液的粘度，從而使固態雜質的去除變得困難。目前發酵液固液分離方法主要采用一下幾種方法：高速離心法，該方法設備投資較大，運行維護費用較高：超濾法，該方法操作簡單，產品收率較高，但超濾膜維護困難，實用周期較短；混凝法(單獨投加硫酸鋁等鋁鹽混凝劑)，強力攪拌或離心進行固液分離，由于發酵液中存在大量的分子各異得膠體雜質，且鋁鹽分子量較小，電荷較低，難以完全絮凝沉淀，因而分離去除率低，產品收率不高，尤其針對腺苷發酵液，難以完全絮凝沉淀。

發明內容

針對上述技術問題，本發明提供一種經濟有效的腺苷粗品提取方法，該方法具有操作簡便、投資少。

為解決上述技術問題，本發明所采取的技術方案是：一種提取腺苷的方法，步驟為：A、將腺苷發酵液用堿溶液調節pH值至7～8，加熱攪拌后加入絮凝劑，60±10分鐘后，調整轉速為60±10轉/分，再攪拌5～7分鐘，靜置10～15分鐘后壓濾，所述絮凝劑是聚合硫酸氯化鐵鋁PAFCS，加入絮凝劑的量占整個腺苷發酵液的體積百分比是(20±5)％；B、將步驟A的濾液在旋轉式薄膜蒸發器中進行濃縮得濃縮液，所述的濃縮溫度控制在70±10℃，真空度-0.095±.01Mpa；C、將步驟B的濃縮液室溫放置，自然冷卻2±1h，然后繼續降溫至0℃以下，冷凍結晶得結晶液；D、將步驟C的冷凍結晶液抽濾，得到濕品，將濕品放置烘箱中烘干10±1h得到干燥腺苷粗品。

進一步：在上述提取腺苷的方法中，所述步驟A的堿溶液是NaOH液，聚合硫酸氯化鐵鋁PAFCS的質量濃度為4％。所述步驟A加熱攪拌的加熱溫度為50～60℃，攪拌速度為180±20轉/分，壓濾是用板框壓濾機實現壓濾工藝。所述步驟B的濃縮液體積是濾液體積的1/4～1/5。所述步驟C冷凍結晶的時間是24±3h。

與現有技術相比，本發明在固液分離除菌步驟中采用一種絮凝劑——聚合硫酸氯化鐵鋁(PAFCS)，該絮凝劑脫色能力優、絮凝物比重大、絮凝速度快、易過濾、出水率高、且其原料均來源于工業廢渣、成本較低、來源廣，生產工藝簡單。一般情況下，絮凝效果會隨著絮凝劑的用量增加而提高，但過量時會使絮凝劑重新變為穩定的膠體，其最佳用量是根據懸浮物的含量通過具體的實驗而得出的。PH值對膠體顆粒表面電荷的電位、絮凝劑的性質和作用等都有很大的影響。另外溫度：高水溫時，反應速度過快，形成的絮凝體細小，低水溫時反應速度過慢，影響處理的水量，同時過高的粘度對絮凝劑的撕裂作用也會使絮凝體變得細小。攪拌速度和時間：速度過快，時間過長，會將大顆粒的固體攪碎成小顆粒，將能沉淀的顆粒攪碎成不能沉淀的顆粒。速度過慢，時間過短：絮凝劑與固體不能充分接觸，不利于絮凝劑捕固體膠體顆粒，且絮凝劑的濃度也分布不均，更不利于發揮絮凝的效果。采用本方法從發酵液中提取腺苷，得到的腺苷粗品含雜量少，產品腺苷損失較少，明顯提高后續純化工藝，精制工藝的腺苷收率。且整個提取方法經濟有效。

具體實施方式

下面，將通過本發明的實施例進行更加詳細的說明。但以下這些實施例只是為了對本發明進行詳細的說明而列舉的示例，本發明的范圍并不只局限于這些實施例。

實施例1