[發明專利]化合物在生物合成核酸以增加細菌培養物的產率中的應用

在審

• 申請號: 201210207738.6
• 申請日: 2006-01-05
• 公開（公告）號: CN102747026A
• 公開（公告）日: 2012-10-24
• 發明（設計）人: 羅格·溫德爾·克林格拉姆;尼爾斯·馬丁·索羅森;克里斯蒂·加里格斯;馬丁·B.·皮德森;蘇珊娜·格恩
• 申請（專利權）人: 科·漢森有限公司
• 主分類號: C12N1/38
• 分類號: C12N1/38
• 代理公司: 北京派特恩知識產權代理事務所(普通合伙) 11270
• 代理人: 武晨燕;遲姍

1.通氣和高光學密度條件下發酵，獲得增加產率的乳酸菌培養物的方法，該方法包括以下步驟：

i)在培養介質中于一定條件下培育乳酸菌，使得發酵進行到在600nm測定的光學密度(OD₆₀₀)為10，其中所述培養介質包含至少一種卟啉化合物和至少一種產率增加劑，所述產率增加劑選自由嘌呤堿基、嘧啶堿基、核苷、核苷酸和它們的衍生物組成的組，其濃度為確保在發酵結束時培養介質含有至少1μM的所述至少一種產率增加劑，其中所述衍生物選自5-甲基胞嘧啶(^MeC)、異胞嘧啶、假異胞嘧啶、5-溴尿嘧啶、5-丙炔基尿嘧啶、5-丙炔-6-氟尿嘧啶、5-甲基噻唑尿嘧啶、6-氨基嘌呤、2-氨基嘌呤、2，6-二氨基嘌呤、7-丙炔-7-去氮腺嘌呤、7-丙炔-7-去氮鳥嘌呤和2-氯-6-氨基嘌呤；以及

ii)收集所述乳酸菌以獲得乳酸菌培養物，

其中，與在相同條件下和在含有少于1μM的各產率增加劑的相似介質中來培養微生物相比，在發酵結束時產率增加劑增加了收集到的乳酸菌的產率。

2.根據權利要求1的方法，其中，所述培養介質最初含有至少1mM的至少一種產率增加劑，其選自由一種或多種用于核酸的生物合成中的化合物或者由任何這樣的化合物的一種或多種衍生物所組成的組，其中所述衍生物選自5-甲基胞嘧啶(^MeC)、異胞嘧啶、假異胞嘧啶、5-溴尿嘧啶、5-丙炔基尿嘧啶、5-丙炔-6-氟尿嘧啶、5-甲基噻唑尿嘧啶、6-氨基嘌呤、2-氨基嘌呤、2，6-二氨基嘌呤、7-丙炔-7-去氮腺嘌呤、7-丙炔-7-去氮鳥嘌呤和2-氯-6-氨基嘌呤。

3.根據前述任意一項權利要求的方法，其中，所述培養介質是復合物發酵介質，向每升該介質中加入至少0.2g的至少一種產率增加劑。

4.根據權利要求1的方法，其中，所述至少一種產率增加劑是在發酵過程中加入的。

5.根據權利要求1的方法，其中，所述高光學密度的條件的特征是在發酵結束時OD₆₀₀高于15。

6.根據權利要求1的方法，其中，所述產率增加至少1.2倍。

7.根據權利要求1的方法，其中，所述產率增加劑是嘌呤堿基，該嘌呤堿基選自由腺嘌呤、鳥嘌呤、黃嘌呤和次黃嘌呤組成的組。

8.根據權利要求1的方法，其中，所述產率增加劑是嘧啶堿基。

9.根據權利要求8的方法，其中，所述嘧啶堿基是選自由胞嘧啶、胸腺嘧啶和尿嘧啶組成的組。

10.根據權利要求1的方法，其中，所述產率增加劑是核苷。

11.根據權利要求10的方法，其中，所述核苷是選自由腺苷、鳥苷、尿苷、胞苷、肌苷、脫氧腺苷、脫氧鳥苷、脫氧胸苷、脫氧胞苷和脫氧肌苷組成的組。

12.根據權利要求11的方法，其中，所述核苷是選自由腺苷、鳥苷、尿苷、胞苷和肌苷組成的組。

13.根據權利要求12的方法，其中，所述核苷是肌苷。

14.根據權利要求1的方法，其中，所述產率增加劑是核苷酸。

15.根據權利要求14的方法，其中，所述核苷酸是選自由腺苷單磷酸(AMP)、鳥苷單磷酸(GMP)、尿苷單磷酸(UMP)、胞苷單磷酸(CMP)、黃嘌呤單磷酸(XMP)、肌苷單磷酸(IMP)、脫氧腺苷單磷酸(dAMP)、脫氧鳥苷單磷酸(dGMP)、脫氧胸苷單磷酸(dTMP)、脫氧胞苷單磷酸(dCMP)、脫氧黃嘌呤單磷酸(dXMP)和脫氧肌苷單磷酸(dIMP)組成的組。

16.根據權利要求15的方法，其中，所述核苷酸是選自由AMP、GMP、UMP、CMP、XMP和IMP組成的組。

17.根據權利要求16的方法，其中，所述核苷酸是IMP。