[發明專利]HPMC水凝膠用于促使脂肪干細胞分化為淋巴細胞的用途

有效

• 申請號: 201210205393.0
• 申請日: 2012-06-20
• 公開（公告）號: CN102703384A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發明（設計）人: 趙大慶;李青;邱建華;馬鈺;招明高
• 申請（專利權）人: 中國人民解放軍第四軍醫大學
• 主分類號: C12N5/0775
• 分類號: C12N5/0775;A61L27/20;A61L27/38;A61L27/52
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技術領域

本發明涉及生物領域，具體涉及一種HPMC水凝膠用于促使脂肪干細胞分化為淋巴細胞的用途。?

背景技術

2001年Zuk等^[1]第一次從人抽脂術中的脂肪懸液中分離獲得了多向分化干細胞，隨著研究的深入，證實其具有干細胞的生物學特性及多向分化潛能，因此被正式命名為脂肪組織來源的干細胞(ADSCs)。由于取材容易，且可把過去抽脂術中棄掉的脂肪懸液變為人干細胞庫的重要來源，因此雖然發現較晚，但研究非常迅速深入，現已證實ADSCs具有多分化潛能，能向骨細胞、軟骨細胞及肌肉等細胞定向誘導轉化，因此有可能成為一種理想的新型的組織工程種子細胞，其有著非常重要的研究和應用價值，這也為各種組織的創傷修復治療開辟了新的途徑^[2-5]。?

脂肪干細胞作為組織工程種子細胞具有其獨特的優越性：現今組織工程技術中研究較多的作為種子細胞的干細胞主要有：胚胎干細胞、骨髓基質干細胞和脂肪基質干細胞(ADSCs)等。胚胎干細胞具有向三個胚層組織細胞分化的全能性，但存在論理學、取材來源等方面的限制。ADSCs與骨髓基質干細胞在適宜條件下可都分化為軟骨、肌肉、神經和血管等多種組織，ADSCs表型與骨髓基質干細胞類似，其干細胞表面抗原CD29、CD44均為陽性，而CD34、CD45、HLA-DR等造血譜系標記呈陰性^[6]。但與骨髓基質干細胞等相比，ADSCs具有取材容易、取材量大、可多部位反復取材、損傷小、體外增殖快及不必進行永生化處理就能獲得足夠量的細胞用于損傷修復等優點。而且脂肪細胞分泌的許多脂肪因子，在創傷修復中的各個階段都發揮著重要作用。此外，ADSCs易于外源基因的導入和表達，以其作為組織工程的種子細胞，不僅可獲得預定形態的組織，而且有望獲得具有生理功能(如分泌功能)的組織，所以ADSCs展現了廣泛的應用前景，有望成為優秀的組織工程種子細胞。?

脂肪基質干細胞與另一類同樣起源于中胚層的成體干細胞——骨髓基質干細胞(bone?marrow?stem?cells，BMSCs)不但具有非常相似的生物學特性，而且在細胞表面標志譜的表達方面也非常接近。免疫學研究表明，正常狀態下BMSCs不表達HLA?II類抗原、B7-1、B7-2、CIMO、CD40L等免疫調節分子。近來研究發現，MSCs具有調節免疫反應的能力，其可不被同種異體的T細胞和自然殺傷細胞識別^[7]。它們僅表達極低水平的II型主要組織相容性復合物(MHC)和中級?水平的I型主要組織相容性復合物分子，而不表達如B7-1，B7-2，CD40，或CD40等共刺激分子^[8]。此外，MSCs似乎具有天然的免疫抑制能力，在體外可抑制幼稚的和記憶T細胞的增殖與免疫反應功能^[9-11]，而bFGF不僅可以促進MSCs的增殖和分化，而且可以在體內提高其免疫抑制潛能。而針對脂肪干細胞的免疫學研究表明，骨髓經放射線照射滅活的小鼠體內輸注脂肪干細胞后，其造血與淋巴細胞可在體內重新生成，表明脂肪干細胞在特定體內環境下可促進淋巴細胞的發生?^[12]。曹誼林等^[13]通過體外實驗發現，在正常狀態下脂肪干細胞表達HLA?I類分子，體外培養第2代的脂肪干細胞未見HLA?II類分子明顯表達。在IFN一γ刺激后，HLA?II類分子表達明顯升高，但淋巴細胞未見明顯增殖。這一結果與BMSCs的報道非常相符，提示脂肪干細胞可能具有與BMSCs相似的調節淋巴細胞反應的免疫調節功能，因此認為，脂肪干細胞具有與BMSCs相近的低免疫原性，同時具有一定的調節免疫反應的能力，可抑制混合淋巴細胞的體外增殖反應。曾秋棠等^[11]同樣發現，hMSCs呈劑量依賴性抑制同種異體淋巴細胞增殖，其機制可能與hMSCs通過分泌TGF-β、L-10促進CD4⁺CD25^-T細胞向表達Foxp3的CD4+CD25+調節T細胞轉化，進而發揮免疫抑制作用有關。Panagiota^[15]等觀察到，bFGF在體外可以提高MSCs的增殖和分化能力，使MSCs細胞形態和表型也發生了明顯的變化，細胞變短失去梭形形態。重要的是，bFGF可上調I型HLA的表達，在體內可以提高其免疫抑制能力，與外周單個核細胞相比僅引起輕度異體免疫反應。FGF還可下調CD44的表達，從而減輕MSCs移植后的植入反應。?