[發明專利]一株產芽孢漆酶的死亡谷芽孢桿菌及其應用

無效

• 申請號: 201210204548.9
• 申請日: 2012-06-19
• 公開（公告）號: CN102757909A
• 公開（公告）日: 2012-10-31
• 發明（設計）人: 陸兆新;張充;呂鳳霞;刁含文;別小妹;王昱灃;趙海珍
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N9/02;C02F3/34;C12R1/07
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 徐冬濤;傅婷婷

1.一株產芽孢漆酶的死亡谷芽孢桿菌（Bacillus?vallismortis）fmb-103，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏日期為2012年06月08日，保藏號為CGMCC?No.6198。

2.權利要求1所述的保藏號為CGMCC?No.6198的死亡谷芽孢桿菌fmb-103在降解三苯甲烷類染料中的應用。

3.根據權利要求2所述的應用，其特征在于利用保藏號為CGMCC?No.6198的死亡谷芽孢桿菌fmb-103產生的芽孢漆酶在降解三苯甲烷類染料中的應用。

4.根據權利要求3所述的應用，其特征在于所述的三苯甲烷類染料選自孔雀石綠、亮綠、苯胺藍中的任意一種或多種。

5.根據權利要求3所述的應用，其特征在于所述的芽孢漆酶主要通過如下步驟制備：

a.將保藏號為CGMCC?No.6198的死亡谷芽孢桿菌fmb-103接種于100mL?BPY種子液培養基，37℃，180rpm，培養12～16小時得種子液；

b.按3％的接種量將種子液轉接到發酵培養基中，37℃，180rpm，發酵48小時，所述的發酵培養基配方為玉米粉4.65g/L，黃豆粉5.88g/L，MgSO₄?2.53g/L，MnSO₄?0.1g/L，K₂HPO₄?0.3g/L，FeSO₄?0.5g/L，pH?7.0；

c.取出發酵液，濾紙抽濾，棄去菌體；

d.抽濾液10000～12000rpm離心25～30min，棄去上清，沉淀物用去離子水重懸，10000～12000rpm離心10～15min，重復兩次，所得沉淀物即為所述的芽孢漆酶。

6.一種利用權利要求1所述的保藏號為CGMCC?No.6198的死亡谷芽孢桿菌fmb-103降解三苯甲烷類染料的方法，其特征在于在0.2mol/LpH6的醋酸-醋酸鈉緩沖液中，加入終濃度為0.1mol/L的介體，5.38U/mL?fmb-L820和50mg/L的三苯甲烷類染料，于37℃下靜置反應48h，所述的介體選自2，2’-連氮-二(3-乙基苯并噻唑-6-磺酸)、丁香醛或乙酰丁香酮中的任意一種；其中所述的fmb-L820為保藏號為CGMCC?No.6198的死亡谷芽孢桿菌fmb-103產生的芽孢漆酶。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于所述的保藏號為CGMCC?No.6198的死亡谷芽孢桿菌fmb-103產生的芽孢漆酶主要通過如下步驟制備：

a.將保藏號為CGMCC?No.6198的死亡谷芽孢桿菌fmb-103接種于100mL?BPY種子液培養基，37℃，180rpm，培養12～16小時得種子液；

b.按3％的接種量將種子液轉接到發酵培養基中，37℃，180rpm，發酵48小時，所述的發酵培養基配方為玉米粉4.65g/L，黃豆粉5.88g/L，MgSO₄?2.53g/L，MnSO₄?0.1g/L，K₂HPO₄?0.3g/L，FeSO₄?0.5g/L，pH?7.0；

c.取出發酵液，濾紙抽濾，棄去菌體；

d.抽濾液10000～12000rpm離心25～30min，棄去上清，沉淀物用去離子水重懸，10000～12000rpm離心10～15min，重復兩次，所得沉淀物即為所述的芽孢漆酶。

8.根據權利要求6所述的方法，其特征在于所述的三苯甲烷類染料選自孔雀石綠、亮綠、苯胺藍中的任意一種或多種。