[發(fā)明專利]組織培養(yǎng)器皿與組織培養(yǎng)方法

無(wú)效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201210204315.9
• 申請(qǐng)日: 2012-06-20
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN102696484A
• 公開(kāi)（公告）日: 2012-10-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 曹鴻國(guó);章孝榮;楊盼;蒲勇;張運(yùn)海;陶勇;李運(yùn)生;劉亞
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

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技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種專用于組織培養(yǎng)的培養(yǎng)器皿及其組織培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

組織工程是當(dāng)前生命科學(xué)研究的前沿學(xué)科，人類身體健康離不開(kāi)組織工程科學(xué)的發(fā)展和完善。傳統(tǒng)機(jī)體修復(fù)多采用自體組織移植手術(shù)，雖然可以取得滿意療效，但它是以犧牲自體健康組織為代價(jià)，挖東墻補(bǔ)西墻的保守辦法，最終會(huì)導(dǎo)致很多并發(fā)癥及附加二次損傷。最重要的是，一些人體重要的組織在機(jī)體內(nèi)是獨(dú)一無(wú)二的，例如，眼角膜。在眼角膜受到傷害之后，機(jī)體內(nèi)沒(méi)有可以替代的組織，只能采用其他供體的或者人造的。但是，目前人體捐獻(xiàn)的供體眼角膜來(lái)源十分有限，許多病人的健康恢復(fù)無(wú)法得到保障。從而，組織工程為眾多的組織缺損的病人治療帶來(lái)了曙光。組織培養(yǎng)是組織工程得以發(fā)展和組織產(chǎn)品能夠快速應(yīng)用的重要技術(shù)基礎(chǔ)。目前，組織培養(yǎng)研究較為迅速和成熟的是有關(guān)皮膚、眼角膜和卵巢組織的培養(yǎng)或再造等方面。通過(guò)體外培養(yǎng)角膜，再移植回人體，讓因?yàn)榻悄と笔Щ驌p壞而失明的人士恢復(fù)視力。對(duì)于被燒傷、炎癥等因素?fù)p害的皮膚，通過(guò)體外培養(yǎng)皮膚組織移植人體，達(dá)到修復(fù)皮膚的外形和功能的目的。通過(guò)卵巢組織的培養(yǎng)，能夠?qū)崿F(xiàn)卵巢內(nèi)遺傳資源的開(kāi)發(fā)和利用，對(duì)于現(xiàn)代畜牧業(yè)的遺傳育種、新品種培育和瀕臨滅絕野生動(dòng)物的保護(hù)具有著重要的意義。

由于組織培養(yǎng)不同于細(xì)胞培養(yǎng)，組織培養(yǎng)需要有一個(gè)氣液共存的培養(yǎng)環(huán)境。而目前常規(guī)的細(xì)胞培養(yǎng)器皿的結(jié)構(gòu)無(wú)法提供理想的氣液共存的培養(yǎng)環(huán)境，不能滿足組織培養(yǎng)的需要。因此，當(dāng)前缺乏專業(yè)的組織培養(yǎng)器皿。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種專用于組織培養(yǎng)的培養(yǎng)器皿。

本發(fā)明要解決的另外一個(gè)技術(shù)問(wèn)題是提供一種使用上述培養(yǎng)器皿的組織培養(yǎng)方法。

對(duì)于組織培養(yǎng)器皿，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種組織培養(yǎng)器皿，包括底壁與至少一個(gè)側(cè)壁以限定出的內(nèi)腔的培養(yǎng)皿，內(nèi)腔中還包括至少一個(gè)托盤(pán)和支架，托盤(pán)底設(shè)有通孔；托盤(pán)設(shè)在支架上。

作為改進(jìn)，支架為圓筒形，支架與底壁固定連接；托盤(pán)外緣伸出3個(gè)耳攀；托盤(pán)通過(guò)3個(gè)耳攀架在圓筒形支架上。

作為另一個(gè)改進(jìn)，支架為圓柱形，支架與底壁固定連接；托盤(pán)底部與圓柱形支架連接。

作為進(jìn)一步改進(jìn)，托盤(pán)由塑料制成。

更進(jìn)一步的改進(jìn)，支架與培養(yǎng)皿由塑料一體制成。

對(duì)于組織培養(yǎng)方法，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種使用所述組織培養(yǎng)皿的組織培養(yǎng)方法，包括以下步驟：

（1）使用二甲基硅油溶液處理托盤(pán)，使托盤(pán)表面具有疏水性；?

（2）把二甲基硅油溶液處理過(guò)的托盤(pán)通過(guò)耳攀與培養(yǎng)支架進(jìn)行連接；

（3）向托盤(pán)下方的支架所在的培養(yǎng)皿中內(nèi)添加組織培養(yǎng)液，直到培養(yǎng)液液位升高并透過(guò)托盤(pán)底部通孔，使托盤(pán)底部現(xiàn)出薄層培養(yǎng)液為宜；

（4）把培養(yǎng)的組織放入培養(yǎng)液中，以組織塊的上表面暴露的空氣中，下表面浸在培養(yǎng)液中為準(zhǔn)，蓋上組織培養(yǎng)器皿蓋子，放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

為了避免在組織培養(yǎng)過(guò)程中，培養(yǎng)組織與托盤(pán)之間發(fā)生粘連，在培養(yǎng)前先使用二甲基硅油溶液處理托盤(pán)，疏水性試劑聚二甲基硅氧烷在托盤(pán)表面形成一粘附層，能夠有效避免組織培養(yǎng)過(guò)程中組織粘貼在托盤(pán)表面，能夠有效保持組織的形態(tài)和完整性。

聚二甲基硅氧烷又稱二甲基硅油，具有較高耐熱性和耐寒性，防潮絕緣和極強(qiáng)的疏水性，是日常廣泛應(yīng)用的消泡劑，在-50℃～200℃條件下具有良好的穩(wěn)定性能，透光性為透光率100%。二甲基硅油除直接使用外，為了使甲基硅油分散好，便于浸漬，噴涂，提高效率。也可配成溶液型，脂類，乳液型三種類型使用。二甲基硅油無(wú)毒無(wú)味，一般公認(rèn)是安全的，?在食品中常作為釀造、發(fā)酵時(shí)間的消泡劑，在醫(yī)用方面，常用于急性肺水腫和腸胃脹氣治療的消泡劑。

本發(fā)明的有益效果是：

通過(guò)在普通培養(yǎng)皿的結(jié)構(gòu)上增加用支架支撐的托盤(pán)，營(yíng)造了組織培養(yǎng)所需要的氣液共存的培養(yǎng)環(huán)境，使得所培養(yǎng)的組織在該環(huán)境中既能接觸空氣，又能保持營(yíng)養(yǎng)供給，培養(yǎng)的組織具有保持既定的形態(tài)和完整性，其使用方便、成本低廉、培養(yǎng)效果好，能夠有效解決當(dāng)前組織培養(yǎng)專業(yè)器皿的缺乏問(wèn)題。本發(fā)明非常適合表面積較大或組織密度較小的組織塊的培養(yǎng)。

附圖說(shuō)明

下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明。

圖1是本發(fā)明組織培養(yǎng)器皿實(shí)施例1的主視圖。

圖2是本發(fā)明組織培養(yǎng)器皿實(shí)施例1的俯視圖。

圖3是本發(fā)明組織培養(yǎng)器皿實(shí)施例2的主視圖。

圖4是本發(fā)明組織培養(yǎng)器皿實(shí)施例2的俯視圖。