[發明專利]魚精蛋白的純化工藝

有效

• 申請號: 201210203844.7
• 申請日: 2012-06-20
• 公開（公告）號: CN103509098A
• 公開（公告）日: 2014-01-15
• 發明（設計）人: 陸海波;王冉;李正想;曹云婷;花瓊瓊
• 申請（專利權）人: 徐州萬邦金橋制藥有限公司;上海復星醫藥產業發展有限公司
• 主分類號: C07K14/46
• 分類號: C07K14/46;C07K1/20
• 代理公司: 南京眾聯專利代理有限公司 32206
• 代理人: 張慧清

1.魚精蛋白的純化工藝，其特征是包括以下步驟：

a．將魚精蛋白溶解于pH4.0~5.0的緩沖溶液中，過濾，取清液，得到魚精蛋白樣品；

b．選擇反向柱；

c．將魚精蛋白上樣，并用pH4.0~5.0的緩沖溶液平衡反相層析柱；

d．分階段洗脫：A相，pH4.0~5.0的緩沖溶液，

B相，pH4.0~5.0的有機緩沖溶液，所述B相中有機溶劑濃度為10~20%（體積百分比），所述有機溶劑選自乙腈、甲醇、乙醇，

第一階段，洗脫液B為15%~20%，等度洗脫，收集洗脫液Ⅰ，

第二階段，洗脫液B為25%~35%，等度洗脫，收集洗脫液Ⅱ，

第三階段，洗脫液B為100%，等度洗脫，收集洗脫液Ⅲ；

e．取洗脫液Ⅱ，加入稀硫酸，再加入95%乙醇溶液，過濾，取沉淀；

f．收集步驟e中沉淀，干燥，得魚精蛋白純化產品。

2.根據權利要求1所述的魚精蛋白的純化工藝，其特征是：所述pH4.0~5.0的緩沖溶液體系為醋酸銨-醋酸緩沖溶液體系。

3.根據權利要求1所述的魚精蛋白的純化工藝，其特征是：所述步驟e中，乙醇加入量為洗脫液Ⅱ的2~5倍（體積比）。

4.根據權利要求1所述的魚精蛋白的純化工藝，其特征是：所述反向填料為C4、C8、C18。

5.根據權利要求1所述的魚精蛋白的純化工藝，其特征是：所述反相柱與紫外檢測儀聯用。

6.根據權利要求5所述的魚精蛋白的純化工藝，其特征是：220nm、254nm以及280nm處檢測流出樣品，在d步驟中，收集在254nm處和280nm處吸收值低的洗脫液。

7.根據權利要求1所述的魚精蛋白的純化工藝，其特征是：所述步驟b中，反向填料與魚精蛋白的比例不低于1L：（12~20）g。