[發(fā)明專利]綠花百合快速繁殖方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201210203227.7
• 申請日: 2012-06-19
• 公開（公告）號: CN102696483A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 杜喜春;丁群英;孟長軍;趙銀萍;王芫英
• 申請（專利權(quán)）人: 西安文理學(xué)院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 西安創(chuàng)知專利事務(wù)所 61213
• 代理人: 譚文琰

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于植物培養(yǎng)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種綠花百合快速繁殖方法。

背景技術(shù)

秦嶺作為我國南北的分界線，地形復(fù)雜，氣候多樣，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的野生百合就有11種，資源十分豐富，且極具開發(fā)價值。百合是世界著名的切花和盆花，花色花型各異，常具有優(yōu)雅的香味，多可藥用和觀賞，經(jīng)濟(jì)價值很高。綠花百合是其中的一種，被譽(yù)為“花中大熊貓”，現(xiàn)在已經(jīng)瀕臨滅絕，為了更好的保護(hù)和利用珍貴的綠花百合資源，首先必須進(jìn)行大量繁殖，快速擴(kuò)大其種群。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于針對上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種不受季節(jié)限制，可常年、快速繁殖綠花百合，實(shí)現(xiàn)綠花百合的規(guī)模化生產(chǎn)的綠花百合快速繁殖方法。采用該方法繁殖綠花百合，生根率達(dá)93.3%以上，移栽成活率達(dá)90%以上。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：一種綠花百合快速繁殖方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

步驟一、挑選無病斑的綠花百合地下鱗莖上的鱗片葉，用洗滌劑將所述鱗片葉上的泥土洗凈，然后用流水沖洗0.5h～1.5h，再采用常規(guī)外植體材料滅菌方法對沖洗后的鱗片葉進(jìn)行滅菌，得到外植體；

步驟二、在無菌條件下將步驟一中所述外植體接種于愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，培養(yǎng)兩個月后整個外植體產(chǎn)生愈傷組織；所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：在MS常規(guī)基本培養(yǎng)基中添加6-芐氨基嘌呤1.5mg/L～2.5mg/L、萘乙酸0.05mg/L～0.2mg/L和瓊脂6g/L～12g/L；所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基的pH值為5.4～5.8；所述培養(yǎng)的條件為：培養(yǎng)溫度21℃～25℃，12h光照與12h黑暗交替培養(yǎng)，光照強(qiáng)度為1000Lx～2000Lx；

步驟三、在無菌條件下將步驟二中產(chǎn)生的愈傷組織接種于繼代培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)，增殖培養(yǎng)12～18天后愈傷組織增大并有新的愈傷組織產(chǎn)生；所述繼代培養(yǎng)基為：在MS常規(guī)基本培養(yǎng)基中添加6-芐氨基嘌呤0.8mg/L～2.0mg/L、萘乙酸0.05mg/L～0.2mg/L和瓊脂6g/L～12g/L；所述繼代培養(yǎng)基的pH值為5.4～5.8；所述增殖培養(yǎng)的條件為：培養(yǎng)溫度21℃～25℃，12h光照與12h黑暗交替培養(yǎng)，光照強(qiáng)度為1000Lx～2000Lx；

步驟四、在無菌條件下將步驟三中所述增大的愈傷組織或新的愈傷組織接種于芽分化培養(yǎng)基上進(jìn)行芽分化誘導(dǎo)，接種40～50天后分化出叢生芽；所述芽分化培養(yǎng)基為：在MS常規(guī)基本培養(yǎng)基中添加6-芐氨基嘌呤0.5mg/L～1.5mg/L、萘乙酸0.05mg/L～0.2mg/L和瓊脂6g/L～12g/L；所述芽分化培養(yǎng)基的pH值為5.4～5.8；所述芽分化誘導(dǎo)的培養(yǎng)條件為：培養(yǎng)溫度21℃～25℃，12h光照與12h黑暗交替培養(yǎng)，光照強(qiáng)度為1000Lx～2000Lx；

步驟五、在無菌條件下將步驟四中分化出的叢生芽接種于生根培養(yǎng)基上，培養(yǎng)10～15天后獲得生根的綠花百合幼苗；所述生根培養(yǎng)基為：在MS常規(guī)基本培養(yǎng)基中添加6-芐氨基嘌呤0.5mg/L～1.2mg/L、萘乙酸0.02mg/L～0.08mg/L和瓊脂6g/L～12g/L；所述生根培養(yǎng)基的pH值為5.4～5.8；所述培養(yǎng)的條件為：培養(yǎng)溫度21℃～25℃，12h光照與12h黑暗交替培養(yǎng)，光照強(qiáng)度為1000Lx～2000Lx；

步驟六、將步驟五中所述生根的綠花百合幼苗移植于栽培基質(zhì)中培養(yǎng)，得到綠花百合再生植株；所述栽培基質(zhì)由草炭、珍珠巖和沙組成，其中草炭、珍珠巖和沙的體積比為5～7∶1～3∶2。

上述的綠花百合快速繁殖方法，步驟二中所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：在MS常規(guī)基本培養(yǎng)基中添加6-芐氨基嘌呤2.0mg/L、萘乙酸0.1mg/L和瓊脂9g/L；所述愈傷組織誘導(dǎo)培養(yǎng)基的pH值為5.6。

上述的綠花百合快速繁殖方法，步驟三中所述繼代培養(yǎng)基為：在MS常規(guī)基本培養(yǎng)基中添加6-芐氨基嘌呤1.2mg/L、萘乙酸0.1mg/L和瓊脂9g/L；所述繼代培養(yǎng)基的pH值為5.6。

上述的綠花百合快速繁殖方法，步驟四中所述芽分化培養(yǎng)基為：在MS常規(guī)基本培養(yǎng)基中添加6-芐氨基嘌呤1.0mg/L、萘乙酸0.1mg/L和瓊脂9g/L；所述芽分化培養(yǎng)基的pH值為5.6。

上述的綠花百合快速繁殖方法，步驟五中所述生根培養(yǎng)基為：在MS常規(guī)基本培養(yǎng)基中添加6-芐氨基嘌呤0.8mg/L、萘乙酸0.05mg/L和瓊脂9g/L；所述生根培養(yǎng)基的pH值為5.6。

上述的綠花百合快速繁殖方法，步驟六中所述草炭、珍珠巖和沙的體積比為6∶2∶2。