[發明專利]以五倍子生產單寧酸的廢棄物為原料制備鞣花酸高純品的方法

有效

• 申請號: 201210202795.5
• 申請日: 2012-06-19
• 公開（公告）號: CN102702217A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發明（設計）人: 肖文軍;盛達成;龔志華;鄧燕莉;張盛
• 申請（專利權）人: 湖南農業大學
• 主分類號: C07D493/06
• 分類號: C07D493/06
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 何為;袁穎華

技術領域：

本發明涉及一種從五倍子生產單寧酸的廢棄物中制備鞣花酸高純品的方法，尤指一種采用732強酸型陽離子交換樹脂初步富集鞣花酸后，再采用高速逆流色譜分離純化得到鞣花酸高純品的方法。

背景技術：

五倍子（Galla?chinensis）為漆樹科植物鹽膚木（Rhus?chinensis?Mill.）、青麩楊（Rhus?potaninii?Maxim.?）或紅麩木（Rhus?punjabensis?Stew.Var.sinica(Diels)?Rehd.et?Wils.?）葉上的蟲癭，主要由五倍子蚜（Melaphis?chinensis(Bell)Baker）寄生而形成。《中國藥典》2010年版第一部記載，五倍子具有斂肺降火、澀腸止瀉、收濕斂瘡等功效，用于肺虛久咳、肺熱痰嗽、久瀉久痢等癥。

鞣花酸（Ellagic?acid）廣泛存在于石榴、葡萄、烏桕、五倍子等各種軟果、堅果的組織中，是一種沒食子酸二聚衍生物的天然多酚組分，屬多酚二內酯，不僅以游離的形式存在，更多的是以縮合形式(如鞣花單寧、苷等)存在于自然界。鞣花酸具有抗癌、抗氧化、抗病毒、抗菌、抗增殖、增強免疫活性等多種藥理活性，無毒性，具有廣闊的應用前景。

目前工業化生產制備天然鞣花酸的常用方法主要有：（1）從石榴皮中提取鞣花酸：石榴皮(粉碎)→溶劑浸提→過濾→純化→濃縮→干燥→產物，得到鞣花酸粗品。李海霞等對其提取工藝作了優化，最佳工藝為1mol/L的鹽酸水溶液作溶劑、8倍量、回流提取60min、提取2次，溶劑類型對鞣花酸提取率影響最大；朱靜等采用大孔吸附樹脂對石榴多酚進行了分離純化研究，通過梯度洗脫得到88%的鞣花酸。（2）從葡萄中提取鞣花酸：葡萄→榨汁→過濾→洗滌（水和甲醇）→產品，主要來源于葡萄籽和皮。（3）從烏桕中提取鞣花酸：烏桕枝條(粉碎)→回流提取→萃取→硅膠柱層析→產品，可得到8中鞣花酸以及衍生物的組分。（4）從其他植物組織中提取鞣花酸：植物組織(浸提)→浸提液(用NaOH調pH值至10-13，離心分離)→溶液(用稀鹽酸調pH值至2-4，離心分離)→沉淀(水洗，重結晶)→鞣花酸。這幾種方法都可以得到較高純度的鞣花酸，但是由于原料中鞣花酸含量普遍不高，工藝流程相對復雜，成本相對較高，且產品鞣花酸含量不高，嚴重制約了鞣花酸功能性終端產品的開發。

目前對五倍子的開發利用主要是從五倍子原料中提取單寧酸濃縮液，而對其產生的富含沒食子酸、鞣花酸等功能成分的大量廢棄物，則未能開發利用。為此，本發明利用此廢棄物直接分離制備五倍子鞣花酸高純品，以期實現五倍子的高值化利用，并為鞣花酸藥理藥效的研究以及功能性終端產品開發提供支撐。

發明內容：

本發明所要解決的技術問題是：針對上述現有技術的不足，提供一種以五倍子生產單寧酸的廢棄物為原料制備鞣花酸高純品的方法。

為了解決上述技術問題，本發明所采用的技術方案是：一種以五倍子生產單寧酸的廢棄物為原料制備鞣花酸高純品的方法，該方法包括如下步驟：

a、732陽離子交換樹脂初步富集廢棄物中的鞣花酸制備鞣花酸粗提物：以五倍子生產單寧酸的廢棄物為原料，將廢棄物真空濃縮成總固形物質量濃度為15～20%的溶液，將此7～9BV溶液以2.5～3.5BV/h的流速通過裝有732型強酸性陽離子交換樹脂的層析柱進行吸附，先用4～6BV蒸餾水以1～3BV/h流速沖洗至無色，再以5～7BV?60%～80%體積濃度的食用乙醇以1.5～2.5BV/h的流速進行洗脫，收集洗脫液，真空濃縮，回收食用乙醇，再真空冷凍干燥，得鞣花酸粗提物；

b、采用高速逆流色譜儀純化上述鞣花酸粗提物：將正丁醇、異丙醇和水按體積比3：2：5配制成溶劑系統，充分搖勻靜置分層后，將上下相分開，將上述鞣花酸粗提物150～250mg用含10ml上相和10ml下相的混合溶劑（上相：下相體積比為1：1）溶解配成待分離樣品溶液，將上相以20ml/min的流速注入高速逆流色譜的色譜柱，開啟色譜儀至700～900rpm/min，然后以1.5～2.5ml/min的流速泵入下相，待下相流出并穩定時，將待分離樣品溶液用注射器一次性進樣，再以1.5～2.5ml/min的流速注入下相進行洗脫，收集目標組分流出液，真空濃縮，回收溶劑，再真空冷凍干燥，即得鞣花酸高純品。

上述五倍子生產單寧酸的廢棄物中鞣花酸含量為0.15%～0.20%。

上述步驟a和步驟b中的真空濃縮過程的真空度為?-0.05～-0.09MPa，溫度為50～60℃。?