[發明專利]一種羥基紅花黃色素A的制備方法和應用

有效

• 申請號: 201210202264.6
• 申請日: 2012-06-19
• 公開（公告）號: CN102702150A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發明（設計）人: 葉鳳起;盧敏;林德君;邵圣省;劉曉波
• 申請（專利權）人: 浙江永寧藥業股份有限公司
• 主分類號: C07D309/10
• 分類號: C07D309/10
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種羥基紅花黃色素A的制備方法和應用，具體地說，涉及從中藥材紅花中提取羥基紅花黃色素A的制備方法。屬于天然藥物化學領域。

背景技術

紅花為菊科紅花屬植物紅花的干燥花，具有活血止痛的功效。紅花活血的有效成分主要集中在水溶性的紅花黃色素。紅花黃色素是三種水溶性成分的混合物，即羥基紅花黃色素A、羥基紅花黃色素B和羥基紅花黃色素C。其中，羥基紅花黃色素A是含量最高的，而且是紅花藥理功效的最有效水溶性成分。

現有技術中，關于羥基紅花黃色素A的藥理作用、臨床藥物制劑已有很多報道。從紅花藥材中提取、分離和純化羥基紅花黃色素A的方法，也有很多報道。CN1475272公開了紅花經水提取、柱層析分離、醇沉淀、再經柱層析分離、超濾膜除菌和冷凍干燥步驟，制備得到羥基紅花黃色素A干粉。該方法雖然保證了羥基紅花黃色素A的純度，但采用醇沉工藝，導致羥基紅花黃色素A流失大，最終制備得到羥基紅花黃色素A的收率很低，不到2％，不利于工業化生產，工藝無生產實際應用價值。CN101195647A公開了羥基紅花黃色素A的制備方法，藥材紅花經水煮提取、大孔吸附樹脂柱層析分離、葡聚糖凝膠柱層析分離和微孔濾膜過后，噴霧干燥制得羥基紅花黃色素A干粉。該方法生產羥基紅花黃色素A的純度和收率，整體上而言，比之前現有技術均大大提高。然而，現有技術從紅花中生產羥基紅花黃色素A的方法，羥基紅花黃色素A的收率還是不夠理想，其不利于紅花藥材的充分利用，以及造成羥基紅花黃色素A在生產工藝中被大量流失。

發明內容

本發明目的在于提供一種高純度、高收率的從紅花中提取、分離和純化羥基紅花黃色素A的方法。為實現本發明目的，本發明技術方案如下：

本發明提供了一種制備羥基紅花黃色素A的方法，其包括紅花藥材的提取、大孔樹脂分離、葡聚糖凝膠層析分離和超濾的步驟，其特征在于：

所述的提取是紅花藥材以水為提取溶劑，于40～60℃超聲波頻率40KHZ進行超聲波提取40-60分鐘；

所述的大孔樹脂分離是用大孔吸附樹脂HZ801；

所述的葡聚糖凝膠層析分離是用葡聚糖凝膠LH-20；

所述的超濾是用截留分子量8000-10000道爾頓的超濾膜。

上述所述的方法，其中所述的大孔樹脂分離，大孔吸附樹脂柱的柱內徑與柱高的比值為1∶8～15。

上述所述的方法，其中所述的大孔樹脂分離，以純化水為洗脫劑，洗脫流速10～30ml/min。

上述所述的方法，其中所述的葡聚糖凝膠層析分離，層析柱的徑高比為1∶5～10.

上述所述的方法，其中所述的葡聚糖凝膠層析分離，以純化水為洗脫劑，洗脫流速控制線性流速為1～10cm/h。

作為優選，本發明提供了一種制備羥基紅花黃色素A的方法，其特征在于包括如下步驟：

(1)提?。喝〖t花藥材，粉碎，加水10～15倍，于40～60℃超聲波頻率40KHZ進行超聲波提取40-60分鐘，得到紅花水提取物；

(2)大孔吸附樹脂分離：步驟(1)得到的紅花水提取物用大孔吸附樹脂HZ801柱分離，大孔吸附樹脂柱的柱內徑與柱高的比值為1∶8～15，以純化水為洗脫劑，洗脫流速10～30ml/min，收集洗脫液，減壓濃縮，得紅花黃色素濃縮液粗品；

(3)葡聚糖凝膠層析分離：步驟(2)得到的紅花黃色素濃縮液粗品過濾或離心后用Sephadex?LH-20葡聚糖凝膠層析分離，層析柱的徑高比為1∶5～10，以純化水為洗脫劑，洗脫流速控制線性流速為1～10cm/h，收集含羥基紅花黃色素A洗脫液，減壓濃縮得濃縮液；

(4)超濾：步驟(3)所得濃縮液經過濾或離心后采用截留分子量8000-10000道爾頓的超濾膜進行超濾得到超濾液；

(5)凍干：步驟(4)所得超濾液經冷凍干燥，即得羥基紅花黃色素A。

本發明通過對紅花藥材提取羥基紅花黃色素A的大量提取工藝研究，令人意外地發現，采用中藥材超聲波提取技術，在一定的溫度和超聲波頻率下，即于40～60℃超聲波頻率40KHZ進行超聲波提取40-60分鐘，能從紅花藥材中最大限度地提取出羥基紅花黃色素A，而且提取時間短，提取出的雜質成分少，不僅提取效率高，而且有利于后續的分離和純化步驟，大大提高羥基紅花黃色素A的收率和得率水平。

表1：超聲頻率對比表

試驗結果表明，本發明超聲波頻率40KHZ進行超聲波提取可以提高提取率。

表2：溫度對比表