[發明專利]利用高壓電暈電場對黃霉素產生菌進行誘變的方法及其裝置

無效

• 申請號: 201210201025.9
• 申請日: 2012-06-18
• 公開（公告）號: CN102703421A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發明（設計）人: 那日
• 申請（專利權）人: 那日
• 主分類號: C12N13/00
• 分類號: C12N13/00;C12M1/42
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及的是一種利用高壓電暈電場對黃霉素產生菌進行誘變的方法及其裝置。

背景技術

黃霉素(Flavomycin)又名默諾霉素(Moeno-mycin)、黃磷酯素(Flavophospolipl）、斑伯霉素(Bam-bermycin)，是德國赫斯特公司在20世紀70年代初期開發的一種新型抗生素類促生長劑。黃霉素主要由五個微生物活性物質組成，其中默諾霉素A為主要成分，此種抗生素通過真菌的厭氧發酵形成，存在于菌絲體中，可通過提取分離。對純化后的抗生素進行理化分析表明，它是一種含磷的糖酯，不同于現有的任何一種抗生素。具有用量小、促生長效果顯著，性能穩定，不與其它添加劑產生拮抗作用，不易產生耐藥性，無污染、無殘留、安全性高等特點。黃霉素在國外畜牧水產養殖業已得到普遍應用，而在我國的應用剛剛起步，科技工作者將紫外(UV)、微波物、離子注入劑和化學[9]誘變技術引進了誘變育種領域。為了提高黃霉素等微生物菌種的生產能力，應用合理的篩選程序及適當的篩選辦法把優良的菌種選育出來，開發新的誘變方法為一個有益的嘗試，我們用高壓電暈電場作為新的誘變源對黃霉素產生菌進行了研究。

自從人們發現電場生物效應后，電場對生物體的影響成為了研究的熱點，并且在許多領域得到了應用，電子束輻照可以對食物進行保鮮。電場處理能明顯提高植物愈傷組織誘導率和分化率。而利用高壓電暈電場對微生物進行誘變的方法尚未見報道。本試驗用我們研究設計的針-板高壓電暈電場處理裝置，以出發菌08-28菌種進行電場誘變處理，以期得到性能穩定、優良高產的黃霉素生產菌種，從而證實高壓電暈電場裝置可以對微生物進行誘變。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是針對現有技術的不足提供一種利用高壓電暈電場對黃霉素產生菌進行誘變的方法及其裝置。

本發明的技術方案如下：

一種利用高壓電暈電場對黃霉素產生菌進行誘變的方法，誘變電壓為21kV，針尖距離為8mm，誘變時間為4min。

所述的方法中采用的高壓電暈電場裝置，針尖間距為20mm，針板間距是25mm，針尖直徑d＜0.01mm。

黃霉素產生菌08-28對電場很敏感，隨著誘變劑量的增大菌種致死率也隨之增大，誘變電壓為21kV，針尖距離為8mm，誘變時間為4min時是最佳誘變劑量。經過電場誘變處理、篩選及傳代培養得到了“誘變3號”菌株，其產黃霉素的能力相對原始菌株最高提高了1.92倍。說明高壓電暈電場處理黃霉素產生菌有較好的誘變效果。

附圖說明

圖1為高壓電暈電場實驗裝置；a：針尖間距；d：針板間距；A：電流表；V：電壓表；

圖2為負電暈放電的伏安特性；

圖3為正電暈放電的伏安特性；

圖4為極板間溫度與電壓的關系；

圖5為誘變致死率曲線。

具體實施方式

以下結合具體實施例，對本發明進行詳細說明。

1.材料和方法

1.1材料

1.1.1菌種?出發菌種：08-28(斑駁鏈霉菌S.bambergiensis)內蒙古中牧生物藥業有限公司提供。

1.1.2試劑?黃霉素標準品(1mg相當于1395黃霉素單位)，中國獸醫藥品監察所；硫酸鏈霉素(650μg/mg)，進口；Ager，Japan；糊精、K₂HPO₄3H₂O，天津市風船化學試劑科技有限公司；FeSO₄·7H₂O、葡萄糖、MgSO₄·7H₂O，天津市四通化工廠；甲酸銨、蛋白胨、天津市光復精細化工研究所；酵母浸粉，北京奧博星生物技術責任有限公司；抗壞血酸，天津市化學試劑三廠；牛肉浸膏，天津市英博生化試劑有限公司；淀粉酶，北京雙旋微生物培養基制品廠；Tris-Base，Sigma；以上試劑均為分析純。甲醇(色譜純)，天津市光復精細化工研究所；乙腈(色譜純)，天津市永大化學試劑有限公司；大豆粉、玉米漿、玉米淀粉，市售。

1.1.3色譜柱?選用Agilent?HC-C18色譜柱(250×4.6mm)。