[發明專利]6-GGPP合酶、8-倍半萜合酶、截短側耳素高產菌株及菌株的應用

有效

• 申請號: 201210198155.1
• 申請日: 2012-06-15
• 公開（公告）號: CN102703479A
• 公開（公告）日: 2012-10-03
• 發明（設計）人: 馬景武;趙碩珍;王煒;王莉;李平作;馬麗麗
• 申請（專利權）人: 山東勝利股份有限公司
• 主分類號: C12N15/54
• 分類號: C12N15/54;C12N15/60;C12N1/14;C12P15/00;C12R1/645
• 代理公司: 濟南泉城專利商標事務所 37218
• 代理人: 李桂存

1.6-GGPP合酶，其特征是：其具有SEQ?IDNO：1或SEQ?IDNO：2所述的堿基序列。

2.8-倍半萜合酶，其特征是：其具有SEQ?IDNO：3或SEQ?IDNO：4所述的堿基序列。

3.截短側耳素高產菌株，其特征是：所述菌株中含有表達6-GGPP合酶的SEQ?ID?NO：1所述的基因和表達8-倍半萜合酶的SEQ?IDNO：3所述的基因；或者含有表達6-GGPP合酶的SEQ?IDNO：2所述的基因和表達8-倍半萜合酶的SEQ?IDNO：4所述的基因。

4.根據權利要求3所述的截短側耳素高產菌株，其特征是：所述菌株為斜蓋傘（Clitopilus?prunulus）TM110518?CGMCC?NO.6093或斜蓋傘（Clitopilus?prunulus）TM110519?CGMCC?NO.?6094。

5.一種截短側耳素的發酵生產方法，其特征是：以權利要求3或4所述的截短側耳素高產菌株為菌種，經過發酵得截短側耳素。

6.根據權利要求5所述的發酵生產方法，其特征是，發酵培養的步驟為：將菌種以1%-15%的接種量接入發酵培養基中，在溫度20-35℃、pH1-10的條件下，發酵3-20天。

7.根據權利要求5所述的發酵生產方法，其特征是：發酵培養時，濕度為30-60%，溶氧為5-100%，轉速為100-1000rpm。

8.根據權利要求5所述的發酵生產方法，其特征是：發酵培養基為：葡萄糖45-55g/L，玉米漿粉15-25?g/L，MgSO₄?0.2-0.6?g/L，CaCO₃?0.5-2?g/L，豆油3-5?g/L。

9.根據權利要求5所述的發酵生產方法，其特征是：在發酵培養前，先將菌種進行斜面活化和種子培養，過程為：

(1)將菌種接種到斜面培養基上，在20-35℃培養5-10天，對菌種進行活化；

(2)將活化的菌種接種到種子培養基中，20-35℃、100-500?r/min下進行一級種子培養，振搖培養5-10天，得一級種子液，然后以5-15%的接種量將一級種子液在相同的種子培養基、相同條件下進行二級種子培養，培養3-5天，得二級種子液。

10.根據權利要求9所述的發酵生產方法，其特征是：斜面培養基為：土豆180-250?g/L，葡萄糖15-25g/L，瓊脂15-25g/L，pH1-10；種子培養基為：葡萄糖45-55?g/L，酵母提取物10-20?g/L，MgSO₄?0.3-1.0?g/L，Ca(NO₃)₂0.03-0.1?g/L，KH₂PO₄?0.5-2?g/L，pH1-10。