[發明專利]一種寡核苷酸及其衍生物以及它們的應用

無效

• 申請號: 201210197251.4
• 申請日: 2012-06-15
• 公開（公告）號: CN103484460A
• 公開（公告）日: 2014-01-01
• 發明（設計）人: 奚曉東
• 申請（專利權）人: 上海交通大學醫學院附屬瑞金醫院
• 主分類號: C12N15/113
• 分類號: C12N15/113;A61K48/00;A61P35/00;A61P35/02;A61P35/04
• 代理公司: 上海華工專利事務所 31104
• 代理人: 應云平

技術領域

本發明屬于細胞生物工程技術領域，具體地說，是關于一種寡核苷酸及其衍生物以及它們的應用。

背景技術

許多血液系統惡性腫瘤患者在臨床上常合并明顯的異常出血、凝血征象，其原因除了血小板的異常外，還存在著復雜的出凝血功能異常（Tallman?MS,Kwaan?HC,Rev?Clin?Exp?Hematol,8(1),E1,2004;Nadir?Y,Katz?T,Sarig?G,et?al.Haematologica,90(11),1549-1556,2005）。急性白血病常合并出凝血功能障礙，容易出現出血、血栓等并發癥。急性白血病凝血系統的異常與多種因素如組織因子（Tissue?Factor，TF）表達增高，腫瘤促凝物質的釋放等有關。其中TF的表達增高被認為是急性白血病中導致凝血功能障礙的主要因素之一。

急性早幼粒細胞白血病（Acute?Promyelocytic?Leukemia，APL）是急性髓細胞白血病的一個獨特亞型（FAB分型AML-M₃），95%~99%的APL病例具有t（15；17）染色體易位，由位于17號染色體（17q21）的維甲酸受體α（RARα）與位于15號染色體（15q22）的早幼粒細胞性白血病基因（PML）融合而成的嵌合基因PML/RARα（Larson?RA,Kondo?KV,Vardiman?JW,et?al.Am?J?Med,76(5),827-841,1984;Gallagher?RE,Li?YP,Rao?S,et?al.Blood,86(4),1540-1547,1995;Tallman?MS,Andersen?JW,Schiffer?CA,et?al.N?Engl?J?Med,337(15),1021-1028,1997）。該融合基因編碼的PML/RARα融合蛋白是APL發病的分子基礎（Tallman?MS,Andersen?JW,Schiffer?CA,et?al.N?Engl?J?Med,337(15),1021-1028,1997）。與APL的出血癥狀有關的機制中，病理性幼稚細胞上TF表達的異常增高是最主要的原因之一（Koyama?T,Hirosawa?S,Kawamata?N,et?al.Blood,84(9),3001-3009,1994;Falanga?A,Consonni?R,Marchetti?M,et?al.Blood,92(1),143-151,1998;Zhu?J,Guo?WM,Yao?YY,et?al.Leukemia,13(7),1062-1070,1999）。

TF即凝血因子III，又稱為組織凝血活酶。它屬于細胞因子受體超家族成員，其基因位于1號染色體短臂（1p21-22），總長度為12.4kb，包含6個外顯子，所編碼的mRNA長度為2.1kb。TF是一個由263個氨基酸殘基組成的分子量為47kD的跨膜糖蛋白，其胞外區包含氨基末端的219個氨基酸殘基（絲氨酸1～谷氨酸219）；緊接其后的跨膜區包含23個氨基酸殘基（異亮氨酸220～亮氨酸242），該區是一疏水肽段，23個氨基酸中有21個是疏水性的；胞質區包含21個氨基酸殘基（組氨酸243～絲氨酸263）。TF的胞外區是凝血因子VII（FVII）或其活化形式（FVIIa）的受體，在凝血過程中作為FVII/FVIIa的輔因子，在Ca²⁺存在的情況下，TF通過其胞外區與FVII/FVIIa結合而形成TF-FVII/FVIIa復合物。TF-FVII/FVIIa的形成大大增強了FVIIa的催化活性，從而啟動外源性凝血過程（Camerer?E,Huang?W,Coughlin?SR,et?al.Proc?Natl?Acad?Sci?USA,97(10),5255-5260,2000）。

另外，TF在惡性腫瘤中除參與高凝狀態的形成，還作為一種受體發揮信號傳導功能（Jiang?X,Guo?YL,Bromberg?ME,Thromb?Haemost,96(2),196-201,2006）。FVIIa與細胞表面的TF結合可以誘導細胞內鈣水平的變化，對多種參與細胞生長、轉錄、細胞遷移的基因具有調控作用，因此TF參與了腫瘤的生長、血管生成、轉移等重要的病理過程。由于TF在腫瘤的上述相關病理過程中起關鍵的作用，因此TF有可能成為一個有前景的抗腫瘤治療的靶點（Yu?JL,May?L，Lhotak?V,et?al.Blood,105(4),1734-1741,2005）。