[發明專利]植物組培方法及裝置

有效

• 申請號: 201210194132.3
• 申請日: 2012-06-13
• 公開（公告）號: CN102668990A
• 公開（公告）日: 2012-09-19
• 發明（設計）人: 盧加舉;張正學;蒙秋伊;黃先群;張志勇;王健;劉鵬飛;査蘭松;雷石富;李向勇;彭仕榮
• 申請（專利權）人: 貴州省亞熱帶作物研究所
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 貴陽中新專利商標事務所 52100
• 代理人: 李亮;程新敏

技術領域

本發明涉及植物科學技術，尤其是一種無糖式的組培方法及裝置。

背景技術

傳統組培是在全封閉的無菌環境下進行，傳統組培需要用糖作為植物生長所需的碳源，且要求高壓滅菌和超凈工作臺，對操作技術和培養環境要求極其嚴格，對工作人員的業務素質要求也較高，每個環節都可能增加微生物污染的機會，造成植物生產緩慢，組培苗質量較差。為解決傳統組培存在的這些問題，許多科技工作者探索了開放組培和無糖組培等新的組培方法。當前的無糖組培雖改進了傳統組培的許多不足，但無糖組培不僅需要高壓滅菌鍋及超凈工作臺，還需要昂貴的設備來控制CO₂氣體的供給，限制其廣泛推廣應用；而植物開放組培雖然簡化了傳統組培繁瑣的程序，不需要高壓滅菌鍋及超凈工作臺，但開放式組培添加到培養基里的糖，又為微生物的污染創造了有利條件，仍然沒能從根本上解決污染問題。

發明內容

本發明的目的是：提供一種植物組培方法及裝置，它操作簡單，能抑菌殺菌，能提高組培苗質量，以克服現有技術的不足。

本發明是這樣實現的：植物組培方法，在相對無菌的環境下，配制1L培養基需稱取瓊脂粉3.5～5.5g，將瓊脂粉加熱至充分溶解，然后按照培養階段加入除蔗糖以外的MS培養基各種元素，根據不同培養階段添加入對應的植物激素和抑菌劑3～5ml，調整培養基pH值至5.6～5.8，定容、分裝，獲得無糖培養基；在接種室內，用質量百分比濃度為75%的酒精將接種臺面和手擦干凈，將無糖培養基放入二氧化碳氣肥培養瓶中，再將植物外植體接種到無糖培養基上，將二氧化碳氣肥放入二氧化碳氣肥培養瓶后，使二氧化碳氣肥培養瓶密閉；二氧化碳氣肥的用量為0.5～1.0g/250ml。

根據不同培養階段添加不同濃度的植物激素是指，植物愈傷組織的誘導、增殖、壯苗和生根等4個階段，根據現有技術的方式加入相應的植物激素。

接種工具浸泡于無水乙醇中，每轉接一瓶外植體就用酒精燈灼燒一次接種工具。

在接種植物外植體前，為不耽誤白天的接種工作,將接種室用臭氧發生器在夜間消毒2小時，在接種前用質量百分比為75%的乙醇進行降塵處理，并用紫外燈照射15～20分鐘；所述的相對無菌的環境是指將培養室每隔2個月用甲醛熏蒸處理一次。

按質量百分比濃度計算，所述的抑菌劑的包括煙堿1～5%、成熟蒜泥汁液2%～6%、50%的多菌靈及水。其中煙堿、成熟蒜泥汁液及多菌靈按質量百分比取量后，再加入水，使其均勻混合并定容。

二氧化碳氣肥培養瓶，包括透明的瓶體和瓶蓋，在瓶蓋頂部設有氣肥入孔，在氣肥入孔內裝有氣肥入孔旋蓋，在氣肥入孔的下方設有托盤，托盤與瓶蓋底部連接。

由于采用了上述技術方案，與現有技術相比，本發明選用二氧化碳氣肥作為“橋梁”，利用二氧化碳氣體代替培養基中的蔗糖，為植物提供光合作用所需的碳源，同時在培養基中添加抑菌劑來抑制微生物的污染，將“無糖組培”和“開放式組培”的優點有機結合，以達到抑菌殺菌、簡化操作及提高組培苗質量的多重效果；而且由于培養基不經高壓滅菌，無需耗費培養基滅菌所需的大量電能，所以營養成分幾乎無損失；同時由于不需要超凈工作臺，直接在相對無菌的環境接種，其接種速度是傳統組培的3倍以上，勞動力成本投入大大減少；無糖抑菌培養基由于不含糖，且添加有抑菌劑，從很大程度上解決了微生物的污染問題；二氧化碳氣肥在植物組培中的創新應用使組培苗進行自養光合，不經過馴化，可直接移植，組培苗質量優于傳統組培苗；因為不需高壓滅菌鍋和超凈工作臺,而且組培苗由異養轉為自養，所以固定資產投入、基地建設及勞動力成本投入要比傳統組培低50%左右，組培苗質量提高。本發明方法簡單，容易實施，所使用的裝置結構簡單，成本低廉，使用效果好。

附圖說明

附圖1為本發明的結構示意圖。

具體實施方式

本發明的實施例：二氧化碳氣肥培養瓶的結構如圖1所示，包括透明的瓶體4和瓶蓋3，在瓶蓋3頂部設有氣肥入孔1，在氣肥入孔1內裝有氣肥入孔旋蓋2，在氣肥入孔1的下方設有托盤5，托盤5與瓶蓋3底部連接。